杨宏亮
- 作品数:31 被引量:32H指数:3
- 供职机构:上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- LA0301为一新的定位于钩端螺旋体外膜的蛋白被引量:1
- 2008年
- 目的研究LA0301在钩端螺旋体中的膜定位。方法运用Triton X-114抽提分离钩端螺旋体膜蛋白,以LA0301抗体为一抗进行Western blot。结果Western blot表明,LA0301位于有机相。结论LA0301为定位钩端螺旋体外膜的蛋白,这为开发研究LA0301为钩端螺旋体疫苗候选基因打下了基础。
- 赖卫强赵蔚陈春燕杨宏亮林玮肖家祁郭晓奎秦金红
- 关键词:钩端螺旋体
- 问号钩体Ⅱ型分泌系统相关基因特征分析
- 2004年
- 目的 分析问号钩体Ⅱ型分泌系统相关基因特征。方法 根据问号钩体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库 ,应用BLAST ,Tmpred ,Pfam等软件分析问号钩体Ⅱ型分泌系统的基因组成和编码蛋白的结构特征 ,并比较问号钩体与铜绿假单胞菌和大肠埃希菌K12Ⅱ型分泌系统组成蛋白的同源性。结果 问号钩体中与Ⅱ型分泌系统相关的蛋白有 11个 ,其中 6个为一般分泌途径蛋白 ,5个为Sec分泌途径蛋白 ,问号钩体中可能存在Ⅱ型分泌系统 ,但一些辅助蛋白未发现 ,需要进一步研究。结论 初步预测了问号钩体中Ⅱ型分泌系统的作用模式 。
- 顾艳杨宏亮李文俊姜叙诚郭晓奎
- 关键词:钩端螺旋体基因致病机制
- 问号钩体趋化相关基因特征分析被引量:1
- 2005年
- 目的预测问号钩体黄疸出血群赖型赖株的趋化信号传导途径,并深入分析趋化相关基因。方法使用ProtParamtool,NCBI/Blastp进行蛋白参数分析和结构域分析,使用Clustalw软件进行多序列对比,与大肠埃希菌K-12趋化相关基因进行比较。结果问号钩体趋化相关基因共30个,分为MCPs和che两组基因,功能与大肠埃希菌趋化相关基因相似,并预测出问号钩体趋化信号传导途径。结论问号钩体趋化相关基因较大肠埃希菌、苍白密螺旋体和伯氏疏螺旋体多,提示其趋化传导途径更为复杂,适应宿主的能力也更强,可能是钩体的重要毒力因子之一。
- 霍丽杨宏亮李文俊李振红郭晓奎姜叙诚
- 关键词:钩端螺旋体趋化性信号传导途径生物信息学
- 钩端螺旋体外膜蛋白研究进展被引量:2
- 2003年
- 钩端螺旋体外膜蛋白在钩端螺旋体病的致病和免疫应答过程中起着十分重要的作用,也是未来新一代疫苗开发的主要候选者。本文主要对钩端螺旋体外膜蛋白的基因结构、在感染动物中的表达状态、致病机制、在免疫保护中的特性以及在血清诊断中的应用等进行综述。
- 杨宏亮姜叙诚郭晓奎
- 关键词:钩端螺旋体外膜蛋白致病机制疫苗钩端螺旋体病
- SARS的病理学研究现状被引量:1
- 2003年
- 李文俊杨宏亮张占卿姜叙诚
- 关键词:SARS病理学严重急性呼吸综合征病因学冠状病毒
- 钩端螺旋体赖株豚鼠感染模型的建立和免疫组化法对钩体抗原的检测被引量:12
- 2003年
- 目的 建立钩端螺旋体赖型赖株感染豚鼠的动物模型 ,并用免疫组化法检测钩端螺旋体抗原在组织中的分布。方法 不同剂量钩端螺旋体赖株通过腹腔内注射感染豚鼠 ,观察豚鼠发病情况 ,及时解剖死亡豚鼠 ,HE染色观察肝、肾、肺等器官病变 ,EnVision二步法染色检测肝、肾、肺组织中钩体抗原。结果 感染后豚鼠发病 ,死亡与感染的钩端螺旋体剂量明显相关 ,大体标本及HE染色光镜下均出现典型钩体病病变。免疫组化显示在肝、肾、肺组织中均存在钩体抗原。结论 通过钩端螺旋体赖株腹腔注射的方法成功地建立了豚鼠动物模型。应用EnVision二步法染色 ,可有效显示组织中的钩体抗原。为进一步研究钩端螺旋体发病机制奠定了基础。
- 杨宏亮姜叙诚傅爱芬赵伶兹李文俊胡宝瑜郭晓奎
- 关键词:钩端螺旋体感染动物模型免疫组化法抗原发病机制
- 问号钩端螺旋体中一个新的OmpA家族蛋白抗原性及保守性研究被引量:4
- 2007年
- 目的克隆表达和鉴定问号钩端螺旋体(L.interrogans)黄疸出血群赖型赖株中一个新的外膜蛋白(Omp)A家族基因LA0301,研究LA0301编码蛋白的抗原性和在15个钩端螺旋体(简称钩体)血清群代表株中的保守性,探讨其在疫苗研究中的意义。方法生物信息学软件分析预测LA0301的特征。构建原核表达重组体pQE31-LA0301,经IPTG诱导后用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质印迹法(Western blot)鉴定表达情况。用表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,Western印迹检测其免疫反应性和在不同血清型钩体中的保守性。酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹检测兔抗钩体全菌血清中的LA0301编码蛋白的抗体。结果生物信息学预测结果显示,LA0301具有OmpA家族的结构域。克隆表达了重组质粒pQE31-LA0301,重组蛋白能刺激BALB/c小鼠产生特异性抗体,效价为1:32000。在兔抗钩体全菌血清中检测到特异的LA0301蛋白抗体,并在15个血清群的代表株钩体中均可检测到LA0301蛋白。结论LA0301蛋白是问号钩体中一个新的OmpA家族蛋白,具有良好的抗原性和保守性,并且能在钩体感染的过程中刺激机体产生相应的抗体。为进一步研究钩体新型疫苗候选基因奠定了基础。
- 林玮杨宏亮杨杨胡宝瑜董珂谭立志郭晓奎
- 关键词:问号钩端螺旋体OMPA
- 基于逆向疫苗学的钩端螺旋体疫苗候选基因的研究
- 钩端螺旋体病是由致病性钩端螺旋体引起的一种人兽共患病,是我国的法定乙类传染病之一.同时钩端螺旋体病在世界范围内也多次爆发过局部范围的流行,其中包括一些发达国家和地区,钩端螺旋体病依然是一种危害严重、威胁人类健康和畜牧业生...
- 杨宏亮
- 关键词:钩端螺旋体基因疫苗生物信息学基因芯片
- 文献传递
- 钩端螺旋体在豚鼠组织中的动态分布和钩体病的病理改变被引量:1
- 2005年
- 杨宏亮姜叙诚朱平李文俊傅爱芬赵伶兹郭晓奎赵国屏
- 关键词:问号钩端螺旋体病理改变钩体病鼠组织透射电镜观察
- 钩端螺旋体LA_1100蛋白膜定位研究
- 2012年
- 目的研究LA_1100蛋白在钩端螺旋体中的膜定位并分析其在中国流行血清群中的保守性。方法利用生物信息学软件对LA_1100的二级及三级结构进行分析,以Triton X-114抽提分离钩体细胞的各个组分,Westernblot及FACS方法验证LA_1100在钩端螺旋体中的膜定位。Western Blot和PCR在蛋白水平及核酸水平检测了其在13个中国流行血清群代表株中的保守性。结果 LA_1100的二级结构显示具有α-螺旋及β-折叠结构,进一步分析表明,此蛋白具有跨膜区。LA_1100单体结构具有典型的TolC结构域,三级结构模拟显示三聚体可形成孔状结构。膜定位显示,该蛋白定位于外膜。该基因的保守性分析结果表明,在中国13个流行代表株中有12株均检出该基因或该蛋白的特征性条带。结论 LA_1100为具有TolC结构域可以形成孔状结构的钩端螺旋体外膜蛋白,在中国流行株钩端螺旋体中保守。由于TolC蛋白与病原菌分泌致病因子密切相关,推测此蛋白可能与钩体感染宿主时粘附及致病相关,进一步对此蛋白进行研究有利于揭示钩体的致病机制。
- 赵蔚陈春燕杨宏亮胡宝瑜郭晓奎秦金红
- 关键词:钩端螺旋体外膜蛋白