目的对青海省2013年手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease;HFMD)的病原谱和人肠道病毒A组71型(Human Enterovirus Group A Type 71,HEV_(A71))的基因特征进行分析。方法对青海省2013年送检的HFMD标本,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)方法进行筛查,对HEV_(A71)阳性标本进行病毒分离,对分离到的病毒提取核酸,用RT-PCR方法对VP1编码区进行扩增及核苷酸序列测定和整理分析,并与HEV_(A71)各基因型和基因亚型的代表株序列构建亲缘关系进化树。结果对青海省2013年分离的62株HEV_(A71)进行VP1编码区核苷酸序列测定后,分析发现它们在VP1编码区核苷酸水平和氨基酸水平的同源性分别为95.5%-100.0%和99.0%-100.0%。与其他各基因型和基因亚型的HEV_(A71)代表株构建的亲缘进化树中显示,青海省HEV_(A71)分离株与C4亚型代表株聚为一簇,属于C4基因亚型C_(4a)进化分支。与2008年、2012年在青海省分离的HEV_(A71)在核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为95.8%-97.5%和99.0%-99.7%。结论2013年,C_(4a)亚型HEV_(A71)在青海省持续传播并占有绝对优势,且存在两条传播链的流行。
目的对陕西省2009~2012年肠道病毒71型(Enterovirus Type 71,EV71)的分子流行病学特征进行研究。方法采用体外逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction,RT—PCR),对陕西省2009—2012年分离白手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD)病例的38株EV71进行衣壳蛋白(Capsid Protein)VP1编码区基因序列扩增。通过双脱氧末端终止法(Sanger法)测序,获得VP1编码区核苷酸序列。采用软件Sequeneher5.0和MEGA5.0对序列进行生物信息学分析。结果陕西省2009~2012年流行的EV71与C4基因型C4a分支具有最高的核苻酸序列同源性,为93.4%~99.4%;与C4a分支代表株在亲缘性关系树上具有最近的进化关系。陕西省EV71具有较高核苷酸和氨基酸序列同源性,分别为93.3%~100%(平均97.3%)和98.3%~100%(平均99.4%)。但相同年代和不同年代EV71毒株间的核苷酸序列平均差异随年代逐渐增大。结论陕西省2009~2012年流行的EV71均属于C4基因亚型C4a分支,为中国近年来流行的优势基因亚型。陕西省EV71具有较高的基因同源性,但基因多态性随着时间逐渐增大。进一步阐明EV71在陕西省的变异变迁规律,需继续开展并加强EV71的分子流行病学监测。
目的研究太原市手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD)患者中,肠道病毒A71型(Enterovirus Type A71,EVA71)的分子进化特征。方法采集太原市HFMD患者的咽拭子和粪便标本,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription—Polymerase Chain Reaction,RT—PCR)方法检测EV核酸。然后随机选取11株EVA71阳性标本进行衣壳蛋白(Capsid Protein)VP,编码区基因扩增、核苷酸序列测定和分析,与其他48株各基因型和基因亚型的EV71代表株构建基因亲缘性关系树。结果太原市11株EVA71均属于C4基因亚型C4a进化分支,但11株EVA71在VP1编码区核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.7%~100.0%和99.0%~100.0%。在亲缘进化树中显示,这些EVA71处在不同的簇中,表现为11株EVA71至少属于3条病毒传播链。结论太原市流行的EVA71属于C4基因亚型C4a进化分支,并且存在多个传播链。与中国其他地区流行的EVA71在基因亲缘关系和流行时间关系上都很接近,说明太原市EVA71不是独立进化的,而是与中国其他地区流行的EVA71在共同进化。