王丛阳
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
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- 人β-微管蛋白2C蛋白的原核表达与纯化被引量：2
- 2009年
- 目的构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C(TubB2C)蛋白。方法通过聚合酶链反应(PCR)扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架(ORF),并插入pGEX-6P-1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒。经大肠杆菌BL21转化后,用异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导谷胱甘肽S转移酶(GST)-TubB2C融合蛋白表达,用免疫印迹(W estern b lot)分析鉴定表达的GST-TubB2C蛋白,并在非变性条件下利用G lutath ione Sepharose 4B纯化GST-TubB2C蛋白。结果酶切分析和DNA测序表明TubB2C cDNA完整ORF以正确的阅读框架插入pGEX-6P-1载体;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达的GST-TubB2C蛋白相对分子量约为78 000,W estern b lot结果显示该融合蛋白可被抗GST抗体特异性识别。纯化后的GST-TubB2C蛋白纯度约90%。结论TubB2C蛋白可在体外大量表达和纯化。
- 武慧娟田田王露徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- TBC1D3表达上调降低人乳腺癌MCF-7细胞对长春新碱敏感性
- 目的研究乳腺癌细胞中TBC1D3表达上调时细胞对长春新碱(VCR)敏感性的变化,探讨TBC1D3表达是否影响VCR对乳腺癌的治疗效果。方法用RT-PCR方法扩增人TBC1D3的基因,酶切鉴定和测序确认,TBC1D3基因与...
- 何泽王丛阳王辉王露徐宁田田郭丹沈传陆
- 关键词：MCF-7乳腺癌细胞人乳腺癌长春新碱
- 文献传递
- PRC17癌蛋白与β微管蛋白2C相互作用功能区的初步鉴定
- 目的:鉴定PRC17癌蛋白与细胞骨架β微管蛋白2C相互作用的功能区,以进一步阐明癌蛋白PRC17的功能。方法:用PCR方法构建PRC17癌蛋白的一系列氨基端或羧基端截短变异体,经用Lipofectamine转染人HEK2...
- 何泽王丛阳王辉田田
- 文献传递
- PRC17癌蛋白与β微管蛋白2C相互作用功能区的初步鉴定
- 2010年
- 何泽王丛阳王辉田田
- 关键词：癌蛋白微管蛋白细胞骨架蛋白结合变异体羧基端
- 癌基因TRE17与细胞骨架蛋白MLC2和β-Tubelin相互作用的初步研究
- 目的: TRE17癌基因最早发现于人Ewing's肉瘤,由TBC1D3基因和USP32基因融合而成,在多种肿瘤如平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、前列腺癌、乳腺癌、肾癌和膀胱癌中高表达,其过量表达可使正常成纤维细胞Nm3T...
- 王丛阳
- 关键词：蛋白相互作用肿瘤发生
- 肌球蛋白轻链的调节及其对肿瘤细胞增殖、转移的影响被引量：9
- 2010年
- 肌球蛋白作为一种超家族蛋白质,是细胞骨架的重要组成部分,通过各种调节因子对其轻链磷酸化和去磷酸化的调节,参与了几乎所有的细胞生理、病理过程,尤其在肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移中发挥重要作用。到目前为止,肿瘤的发生、发展机制还不是十分清晰,对肌球蛋白轻链的调节及其与肿瘤相关性的研究,将有助于阐明肿瘤的发生、发展机制,为肿瘤的靶向治疗提供依据。
- 王丛阳王辉沈传陆
- 关键词：肌球蛋白轻链磷酸化去磷酸化肿瘤
- 阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响。方法:用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色。结果:与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变。结论:阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究。
- 王露武慧娟徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：阿霉素细胞衰老MCF-7细胞
- 癌基因TRE17与细胞骨架蛋白MLC2和β-Tubulin相互作用的初步研究
- 王丛阳
