王怡
- 作品数：31 被引量：75H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 短期血清饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞代谢及自噬发生的影响
- 2024年
- 旨在研究短期饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)代谢及自噬发生的影响,解析自噬机制在骨骼肌发育调控网络中的地位和作用,为改良家猪产肉性状提供理论依据。将本实验室分离并保存的SMSCs细胞系复苏,按培养体系中血清浓度将细胞分为20%血清组(对照组)、15%血清组、10%血清组、5%血清组和0%血清组,以形成不同程度的饥饿胁迫。当细胞融合度达到70%~80%后再培养24 h进行检测,每组4个重复。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、膜电位和活性氧水平;试剂盒测定ATP水平;WB检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ、p62和通路相关蛋白AMPK、mTOR的表达;透射电镜检测细胞线粒体形态和细胞器的变化。结果显示,随着细胞中血清浓度降低,细胞活力、p62蛋白量、p-mTOR/mTOR比值逐渐降低;细胞凋亡率、ROS水平、ATP水平、LC3B-Ⅱ蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值、细胞内自噬溶酶体数量、细胞核及线粒体异常率则逐渐升高;与对照组相比,15%组膜电位显著升高,5%和0%组极显著降低。这表明,短期血清饥饿胁迫能诱导基于AMPK/mTOR信号通路的自噬发生,加快细胞代谢,但同时存在加快细胞凋亡、抑制细胞增殖等毒副作用。
- 王怡王怡胡悦旻杨跃飞杨跃飞鞠辉明
- 关键词：自噬
- 实验动物学教学改革初探被引量：2
- 2016年
- 实验动物学是实验动物专业的重要课程,笔者结合本院实验动物学的教学实际,对课程内容和设置作了介绍,通过提升教师的业务水平,实施分层次授课,结合传统的教学方法,针对不同的教学内容,灵活采用合适的教学方法,取得了良好的教学效果。
- 杨玲张泉王怡薛整风
- 关键词：实验动物学教学改革教学内容教学方法
- 基于学生成长的研究性教学模式的探讨
- 2019年
- 研究性教学作为一种新的教学组织形式,让学生通过独立的探索和研究活动获取知识、提高能力。在研究性教学的教学过程中,作者通过指导学生查阅文献,引导学生制定目标,建立团队合作,培养学生对结果的关注,让学生学会参照优秀模版,锻炼学生表达的能力,从而促进学生的成长。
- 杨玲王怡
- 关键词：研究性教学模版
- 1例ENU诱变小鼠模型角膜病变分析及致病基因定位
- 2022年
- 角膜病是人类第4大致盲眼病。通过乙烷基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导小鼠突变建立遗传性角膜病小鼠模型,对角膜病小鼠角膜组织进行病理分析并确定致病基因的染色体位置。HE染色发现:角膜病小鼠角膜基质层出现新生血管及较多的角膜细胞,角膜与虹膜发生粘连。采用免疫组织化学技术检测角膜上皮Keratin 12(K12)、Keratin 14(K14)、Keratin 10(K10)及PAX6的表达情况,结果发现:角膜病小鼠K12信号局部减弱或为阴性,K10局部免疫组织化学染色结果为阳性,K14可表达于整个角膜上皮层且局部信号增强,PAX6阳性细胞明显减少或消失。连锁分析将致病基因定位于小鼠第10号染色体D10Mit162与D10Mit233之间。该研究有望为人类角膜病研究提供一种新的小鼠模型。
- 陈兵陈兵陈兵陈瑞王怡陈瑞薛整风
- 关键词：角膜病基因定位小鼠模型
- 骨保护素对鸭胚破骨细胞分化与活化的影响
- 2013年
- 为研究骨保护素(Osteoprogerin,OPG)对体外培养鸭胚破骨细胞(Osteoclast,OC)分化与活化的影响,收集23日胚龄鸭胚骨髓细胞,体外培养过程中分组加入0 ng/mL(A组)、30 ng/mL(B组)、100 ng/mL(C组)OPG进行处理。通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP),骨吸收陷窝分析技术,检测TRAP阳性细胞数量及OC的骨吸收活性。结果显示,3个试验组TRAP阳性细胞数、OC的骨吸收活性均在OPG处理7 d后达到最高水平。与A组相比,OPG处理组OC数目及其骨吸收活性均显著减弱(P<0.05),每个时间段骨吸收陷窝净增长面积与OC数目变化趋势一致。表明OPG能够抑制OC细胞前体分化,促进成熟OC发生凋亡,抑制成熟OC的骨吸收活性。
- 丁小丽付应霄顾建红王怡刘宗平
- 关键词：骨保护素抗酒石酸酸性磷酸酶骨吸收活性
- 1α,25-(OH)_2D_3影响体外培养OB增殖分化的钙离子通道机制
- 2011年
- 为研究1α,25-(OH)2D3影响体外培养成骨细胞(Osteoblasts,OB)增殖分化是否存在L-型钙离子通道机制。在体外培养SD大鼠OB基础上,添加不同浓度的1α,25-(OH)2D3(0、10-11、10-9、10-7 mol/L)或和10-8 mol/L硝苯地平(NIF)作用24、48、72h。采用MTT法测定OB增殖率,PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。结果显示,1α,25-(OH)2D3剂量依赖性地抑制OB增殖、促进ALP活性;10-8 mol/L NIF单独作用亦能抑制OB增殖、促进ALP活性;并且在培养早期(24、48h)能消除10-9 mol/L 1α,25-(OH)2D3对OB增殖的抑制效应及对ALP活性的促进效应。结果表明,1α,25-(OH)2D3能够抑制OB增殖、促进其分化;并且此过程涉及L-型钙离子通道机制。
- 顾建红蒋杉杉王世涛闫汶王怡刘宗平
- 关键词：碱性磷酸酶硝苯地平钙离子通道
- 实验动物学实验教学改革的探索和实践被引量：3
- 2016年
- 在实验动物学实验教学改革的探索和实践中,采用提升教师业务水平、改进教学方法、增强学生的实验动物伦理观念、强化基本操作,优化实验内容,搭建开放实验室平台、改变考核方法等措施;取得了显著效果,增强了学生的操作技能,培养了学生的创新意识和创新能力。
- 杨玲张泉王怡薛整风
- 关键词：实验动物学实验教学教学改革
- 激素剂量、品系及周龄对小鼠超数排卵的影响
- 目的：采用孕马血清促性腺激素(PMSG)和人促绒毛膜性腺激素(hCG)对不同品系和周龄的小鼠进行超数排卵处理，比较分析激素(PMSG／hCG)注射剂量、小鼠品系和周龄对超排效果的影响，以便获得比较优良的超排方法。结果：(...
- 宋绍征杜庆辉陈则东龚文王宝珠王怡成勇
- 关键词：超数排卵品系周龄
- 镉对大鼠成骨细胞OPG/RANKL表达的影响被引量：10
- 2014年
- 在大鼠成骨细胞体外培养过程中添加不同浓度的镉,利用xCELLigence细胞实时分析系统观察细胞指数、蛋白免疫印迹杂交检测核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白表达,研究镉对成骨细胞毒性的影响。结果表明:镉暴露可使成骨细胞指数降低,0.5μmol·L-1镉对细胞增殖和存活具有抑制作用,呈剂量-效应和时间-效应关系;随着镉染毒剂量的增加,RANKL蛋白表达量降低(P<0.01);1.0μmol·L-1镉暴露组OPG蛋白表达量明显增加(P<0.05),镉浓度增大则导致OPG蛋白表达量降低(P<0.01或P<0.05);OPG/RANKL比值升高(P<0.01)。证明镉暴露通过RANKL/RANK/OPG系统调控骨代谢,效应可能与剂量有关。
- 王怡刘伟赵鸿雁代楠楠顾建红刘宗平
- 关键词：镉骨保护素核因子ΚB受体活化因子配体成骨细胞
- RAW264.7细胞分化为破骨细胞的凋亡观察被引量：4
- 2015年
- 采用M-csF＋RANKL联合诱导RAW264．7细胞分化为破骨样细胞（OCL），观察培养过程中的凋亡现象，了解其生长规律。在诱导培养的第5～9天，通过TRAP染色、检测TRAP基因表达水平、细胞骨架与胞核染色方法分析OCL凋亡状况。结果表明：体外培养成熟OCL短时间内即发生凋亡，表现为TRAP阳性细胞数减少，TRAP基因表达水平降低，细胞骨架结构破坏、胞核形态改变。
- 付应霄顾建红王怡袁燕刘学忠卞建春刘宗平
- 关键词：RAW264.7细胞破骨样细胞凋亡
