王爱华
- 作品数：99 被引量：137H指数：7
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响
- 2023年
- 旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染组细胞培养上清液中孕酮含量在转染12和24 h后显著低于空白组和空载体组(P<0.01),雌激素无显著差异(P>0.05)。证明布鲁氏菌VceC不仅能通过激活UPR中的IRE1通路从而激发GTC的内质网应激反应,还能改变GTC中孕酮/雌激素的比值。
- 相彩霞王相国李俊玫支飞杰房姣阳郑维芳陈家露靳亚平王爱华
- 关键词：布鲁氏菌内质网应激
- 畜牧微生物学课程开放式、多方式实验教学的实践与探索
- 2012年
- 为提高畜牧微生物学实验教学的效率和效果,结合目前的教学实际,以强调提高学生的学习热情、培养学生科学思维能力和创新能力,以及应用知识解决实际问题的能力为改革的核心。探索建立了逐级提高的"基本技能与验证性实验-综合性实验-探索与设计性实验"3大模块,打破传统实验教学模式的单一性,使畜牧微生物学实验教学形式多样化,取得了良好的教学效果。
- 王爱华孟祥敏齐雪峰王虹
- 关键词：畜牧微生物学实验教学
- 布鲁氏菌GntR样转录调控因子BSS2_II0438缺失株的构建
- <正>目的:转录调控因子GntR家族成员在调控布鲁氏菌初级代谢以及毒力等方面具有重要作用。本试验基于PUC19载体构建布鲁氏菌样转录调控因子BSS2_Ⅱ0438缺失株;制备其多克隆抗体。为深入揭示BSS2_Ⅱ0438在布...
- 支飞杰周栋王爱华
- 文献传递
- 布鲁氏菌VceC激活山羊滋养层细胞内质网应激的作用
- <正>目的:VceC是布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的效应分子和主要毒力因子之一,揭示其在感染宿主细胞中的作用与机制,对于阐明布鲁氏菌-宿主互作具有重要意义。本试验主要是通过体外实验,检测VceC对布鲁氏菌感染过程中宿主细胞内质网...
- 相彩霞白芙蓉支飞杰徐光斌王爱华
- 文献传递
- CRISPR/CAS9介导的布鲁氏菌基因敲除质粒的构建
- <正>目的:构建病原基因缺失株是研究相关基因功能、研发新疫苗等的有效手段。试验以pBBR1MCS-5为骨架载体构建能够适用于布鲁氏菌的CRISPR/CAS9介导的基因敲除质粒,为获得布鲁氏菌基因缺失株提供技术和材料。方法...
- 张广冻支飞杰相彩霞王爱华
- 文献传递
- 羊布鲁菌病iELISA检测方法的建立
- <正>目的:有效区分布鲁氏菌感染与疫苗免疫是目前防控布鲁氏菌病关键。有研究认为利用相关蛋白建立的iELISA可提高检测的特异性,并有效区分自然发病与免疫羊群。本研究以布鲁氏菌bp26为抗原,拟建立羊特异性布鲁菌氏病的iE...
- 张广冻相彩霞支飞杰王爱华
- 文献传递
- 一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株，所述菌株为敲除ArsR基因的布鲁氏菌S2疫苗株，可用于制备布鲁氏菌减毒疫苗。布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株的获得为探究布鲁氏菌致病机制及区分自然感染和人工免...
- 王爱华支飞杰周栋靳亚平李俊玫张广冻田璐璐
- 文献传递
- 苦马豆素人工抗原的合成及其免疫原性研究
- 疯草是豆科棘豆属和黄芪属有毒植物的总称，是世界范围内危害草原畜牧业生产最严重的一类毒草，可导致中毒动物消瘦、神经症状、死亡，母畜不孕或流产、畸胎、死胎，公畜不育等，并给草原畜牧业生产造成了巨大损失。目前应用的防除方法主要...
- 王爱华
- 关键词：苦马豆素人工抗原免疫原性合成工艺疯草
- 文献传递
- 合成苦马豆素抗原的方法
- 本发明公开了一种合成苦马豆素抗原的方法，首先将卤烃基芳基脂肪酸与醇反应生成卤烃基芳基脂肪酸酯，与苦马豆素反应生成带有芳香环结构的季铵盐，再与氢氧化钠反应脱酯生成钠盐，盐酸调节pH，生成SW-卤烃基芳基脂肪酸；最后与牛血清...
- 王建华王爱华靳亚平周乐宋毓民
- 文献传递
- 山羊血清中CD58间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 【目的】制备抗CD58单克隆抗体,在此基础上建立可用于定量检测山羊血清中CD58含量的间接竞争ELISA方法。【方法】以纯化的CD58蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗CD58单抗,并对其特异性进行鉴定;在此基础上,建立CD58间接竞争ELISA检测方法,对不同生理时期山羊血清中CD58的含量进行检测。【结果】筛选出1株稳定分泌抗CD58单克隆抗体的杂交瘤细胞株G6;玫瑰花环抑制试验和Western-blotting试验表明,制备的细胞株能分泌针对CD58的特异性单克隆抗体;对间接竞争ELISA方法的反应条件进行优化后,建立了检测CD58的间接竞争ELISA方法,该方法最适可测范围为10-1000000 ng/mL,理论最低检测限为3.087 ng/mL,批内和批间平均变异系数分别为3.50%和5.22%;用建立的方法检测未发情和发情山羊血清中CD58含量分别为（32.160±3.69）和（35.929±3.08）μg/mL,怀孕山羊血清中CD58含量为（61.564±5.10）μg/mL。【结论】建立了山羊血清中CD58间接竞争ELISA检测方法,该方法敏感、特异,具有良好的重复性对不同生理时期山羊血清中CD58含量的检测表明，怀孕山羊血清中CD58含量显著高于未发情和发情山羊。
- 高纪振周丽梅王爱华靳亚平宋毓民吴庆侠
- 关键词：单克隆抗体
