王鑫
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：北京交通大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白单克隆抗体的制备及体外鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的:获得能稳定分泌抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)融合糖蛋白(fusion glycoprotein,F)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株,以期用于RSV感染的早期诊断和被动免疫治疗研究。方法:通过杂交瘤技术制备可特异性识别RSV F的单抗,体外鉴定生物学特性。结果:获得了可分泌抗RSV F蛋白的杂交瘤细胞株F8,体外连续传代培养2个月,能稳定分泌抗体F8,培养上清效价为1∶1000,亲和常数(Ka)为6.8×108L/mol。F8属IgG1型抗体,可特异性识别RSV F1亚单位的AA 205-222。免疫酶法蚀斑减少中和实验证实F8具有体外中和活性及融合抑制活性。结论:获得具有中和活性的抗RSV F蛋白的单克隆抗体,为RSV感染的早期诊断及被动免疫治疗等奠定了基础。
- 张梅王小波付远辉方璇王鑫张莹何金生
- 关键词：人呼吸道合胞病毒单克隆抗体杂交瘤技术
- 阿尔茨海默病的疫苗研究进展被引量：4
- 2009年
- 王鑫张莹何金生包福祥洪涛
- 关键词：阿尔茨海默病Β-淀粉样蛋白疫苗
- β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5′RACE扩增及序列分析被引量：1
- 2010年
- 目的:克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因。方法:从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA,根据恒定区序列设计基因特异性引物,通过5′RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因,测定并分析可变区基因序列,并克隆入pMD18-T载体。结果:重链可变区基因序列全长450bp,编码150个氨基酸残基;轻链可变区基因序列全长429bp,编码143个氨基酸残基。在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析,二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征。根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区(CDR)、4个框架区(FR)和信号肽。结论:通过5′RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因,为进一步研究抗体三维结构,以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础。
- 王鑫张莹何金生
- 关键词：Β淀粉样肽单克隆抗体
- 抗Prion单克隆抗体与生物计量研究
- 张莹洪涛何金生王鑫庞思媛尹凡
- 老年性痴呆抗体药物研究进展被引量：2
- 2008年
- 老年性痴呆(Alzhimer’s disease,AD)是一种渐进性神经退化性疾病,其主要表现为记忆功能衰减及识别能力障碍,同时伴有各种神经症状和行为障碍,具有非常高的发病率,目前还没有特异性治疗药物。随着世界人口老龄化,AD发病率逐年增高,成为本世纪威胁人类健康最严重的疾病之一。近年来AD的发病机理和药物研究方面都有突破性进展,尤其是制备针对β淀粉样蛋白(amyloid beta protein,Aβ)特异性抗体药物成为AD治疗极具价值的途径。主要对以Aβ为主的AD发病机理和针对Aβ的抗体药物的治疗机制、研究现状及进展进行综述,为进一步研发AD治疗药物提供参考。
- 包福祥何金生曹贵方王鑫张莹洪涛
- 关键词：老年性痴呆发病机理AΒ蛋白人源性抗体
- 通心络治疗与SAMP8早期脑内淀粉样病变改善的相关性研究
- 2009年
- 目的:研究中药通心络(TXL)与治疗SAMP8小鼠早期脑内淀粉样病理变化改善的相关性。方法:取4月龄雄性SAMP8小鼠,随机分为6组:SAMP8(空白对照)组、石杉碱甲(阳性对照)组、TXL低剂(治疗)组、TXL中剂(治疗)组、TXL高剂(治疗)组、SAMR1(对照)组,每组15只。于第八周末,检测海马神经元染色质聚缩情况、皮质和海马糖原沉积情况、脑内淀粉样物质沉积情况、小鼠皮质Aβ1-42寡聚体的水平。结果:(1)HE染色结果显示SAMP8组有明显的核深染现象,通心络治疗组有改善;(2)与SAMP8对照组相比,TXL中剂组、TXL高剂组淀粉样沉积均有显著性差异(P<0.01);(3)与SAMP8组相比,TXL低剂组(P<0.05)、TXL中剂组(P<0.01)和TXL高剂组(P<0.05)PAS阳性颗粒(acid-Schiff(PAS)-positive granular structures,PGS)显著减少;(4)与SAMP8相比,TXL各治疗组Aβ42寡聚体水平均有显著性降(P<0.01);(5)TXL治疗剂量与淀粉样沉积、糖原沉积具有相关性,TXL中剂量治疗即可达到改善的效果,而Aβ42寡聚体聚集水平与TXL剂量有显著的线性负相关(r=-0.856,P<0.01)。结论:通心络治疗能够明显改善SAMP8小鼠早期脑内淀粉样病变。
- 李亦清张莹何金生王宏涛朱慧明宋莉张志慧周龙岗魏刚何奇龙王鑫
- 关键词：通心络超微粉阿尔茨海默症SAMP8小鼠
- 人源性天然抗体库的构建及淀粉样蛋白Aβ_(1-42)寡聚体单链抗体的筛选和鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在利用噬菌体展示技术构建人源性天然抗体库,以可溶性Aβ1-42寡聚体对抗体库进行筛选获得针对低分子量Aβ1-42寡聚体的特异性单链抗体。利用RT-PCR法从10个健康人外周血淋巴细胞中得到全套人抗体VH和VL基因,经过重叠延伸PCR将VH和VL连接得到scFv片段,将scFv片段酶切后克隆至pCANTAB5E噬菌体载体,电转化TG1感受态菌,获得库容为2.5×109单链抗体库。经辅助噬菌体M13K07拯救,以可溶性Aβ1-42寡聚体为抗原,对抗体库进行4轮筛选,ELISA法筛选特异性识别Aβ1-42寡聚体的阳性克隆,将筛选到的阳性克隆B19转化至E.coli HB2151菌,诱导表达可溶性scFv抗体。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示可溶性scFv抗体获得了正确表达,且能够与Aβ1-42三聚体及纤维特异性结合,亲和力(Kd)为9×10-6 mol/L。Aβ1-42寡聚体特异性单链抗体的获得为老年性痴呆(AD)的治疗研究奠定了基础。
- 包福祥何金生曹贵方尹凡王鑫庞思媛张莹洪涛
- 关键词：单链抗体老年性痴呆
