田新贵
- 作品数:52 被引量:122H指数:5
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 抗人B组腺病毒的广谱中和活性单克隆抗体
- 人腺病毒(Ad)有7组50多种血清型,是引起急性呼吸道感染、急性胃肠炎、肾炎、眼角膜结膜炎、膀胱炎等的重要病原体。其中人B组腺病毒7型、14型、55型常引起儿童和成人重症肺炎甚至死亡,近年来国内外多有爆发流行的报道,而1...
- 田新贵樊晔刘振卫张玲廖嘉仪周荣
- 关键词:腺病毒中和抗体生物信息学疫苗
- 文献传递
- 诺如病毒表达衣壳蛋白单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用被引量:4
- 2008年
- 目的:建立能稳定分泌抗诺如病毒(Norovirus)N蛋白的单克隆抗体(mAb)细胞株,制备抗诺如病毒核衣壳蛋白的mAb,为诺如病毒的早期快速检测及致病机制的研究提供实验材料。方法:用E.coli表达的GⅡ组广州株NVgz01(DQ369797)Norovirus-N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过PEG使小鼠脾细胞和Sp2/0细胞融合,使用HAT选择性培养基培养融合细胞,用间接ELISA和Western blot测定mAb的效价、免疫球蛋白亚型和mAb的特异性,并将各mAb之间进行配对。结果:通过细胞融合和克隆化,共筛选出4株分泌抗Norovir-us-N蛋白抗体的杂交瘤细胞株N2C3、N7C2、N4B1、N8A9。间接ELISA和Western blot检测结果表明,这4株mAb都可以与E.coli表达的GⅡ组广州株Norovirus-N蛋白产生特异性反应,并且能与天然粪便标本中的GⅡ组Norovirus产生特异性反应。配对结果显示N2C3和N7C2之间配对,对表达蛋白和天然病毒都具有较强的检测灵敏度。结论:获得了诺如病毒GⅡ组特异性mAb,为制备免疫诊断试剂盒及致病机制的研究奠定了基础。
- 李潇周荣盛慧英王长兵田新贵王友绍
- 关键词:NOROVIRUS核衣壳蛋白单克隆抗体
- 致急性呼吸道感染人腺病毒的体外感染特性初步比较被引量:13
- 2019年
- 致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55型的体外感染特性,临床分离多株人腺病毒3型、7型和55型接种人肺腺癌细胞(A549细胞)或人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞),比较其感染滴度;将人腺病毒3型、5型、7型和55型毒株接种MRC-5细胞和A549细胞进行空斑试验,比较其空斑形成以及大小、形态;接种感染MRC-5细胞,分别于感染后10h和26h收集细胞培养上清,用人炎症细胞因子抗体芯片同步检测10个主要炎症相关细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、MCP-1、IFN-γ以及TNF-α的表达水平并进行分析。结果显示,与MRC-5细胞相比,A549细胞对这几种人腺病毒更加敏感;人腺病毒55型毒株与其它型别相比产毒量较高。人腺病毒在MRC-5细胞上难以形成空斑,而用A549细胞进行的空斑试验显示人腺病毒5型和55型毒株有较高的空斑形成单位,并且形成的空斑为规则的圆形且边缘清晰,空斑直径较大;而人腺病毒7型和3型毒株感染滴度较低,人腺病毒7型形成的空斑大小不均匀,形状不规则,人腺病毒3型形成的空斑直径很小,呈点状。炎症细胞因子检测结果显示,与正常对照组相比,野生型人腺病毒55型表达差异的炎症细胞因子是IL-1α、IL-1β和TNF-α;改造的人腺病毒3型感染MRC-5细胞后,两个时间点的各炎症细胞因子基本低表达。与正常对照组相比,人腺病毒感染MRC-5细胞后表达有差异的炎症细胞因子主要为IL-6和IL-8。
- 陈诗颖樊晔张玲田新贵周荣
- 关键词:病毒培养抗体芯片炎症细胞因子
- 7型腺病毒受体同源性多肽的筛选和研究
- 2014年
- 目的:筛选7型腺病毒的结合多肽,并研究其与腺病毒受体的相关性。方法:利用噬菌体肽库,筛选7型腺病毒的结合多肽,并制备其抗体,利用抗体进行免疫荧光实验,观察抗体与细胞膜的结合情况。结果:筛选到了GTS09多肽,其与噬菌体的复合物能特异的结合7型腺病毒,亲和常数可以达到1.93×1010L/mol;制备了GTS09的兔多克隆抗体,免疫荧光显示,该抗体可以特异地结合在293细胞的细胞膜上。结论:抗GTS09的抗体可以特异的结合于细胞膜上,表明7型腺病毒受体可能与GTS09具有一定的同源性,为鉴定和分离7型腺病毒受体打下了基础。
- 许元生田新贵刘铭龙李晨阳周荣
- 关键词:7型腺病毒受体多肽免疫荧光
- 中国南方地区健康成年人抗常见呼吸道病毒中和抗体水平调查
- 目的调查健康成年人血清中抗常见呼吸道病毒的中和抗体水平,为被动免疫疗法在呼吸道重症感染儿童救治中的应用提供基础。方法采集分离96份健康成年人血清,用细胞微量中和实验检测其抗呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Adv)、流感...
- 田新贵蒋再学马强刘倩路小梅刘文宽廖小红周荣
- 文献传递
- 甲型和乙型流感病毒抗原检测新方法被引量:6
- 2017年
- 目的寻找一种更加简便的方法来定性检测流感病毒抗原阳性细胞。方法设计流式的方法来检测甲型流感病毒(IA)和乙型流感病毒(IB)抗原阳性细胞。采用2种荧光素标记抗体进行流式标记鼻咽拭子的上皮细胞,对157份鼻咽拭子进行甲型和乙型流感病毒抗原检测。结果 157例样本中,直接免疫荧光法检测到甲型流感病毒阳性44例,乙型流感病毒阳性35例,流式法检测到甲型流感病毒阳性39例,乙型流感病毒阳性29例,两种方法检测甲型和乙型流感病毒的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法检测IA的阳性与阴性总符合率为93.0%,阳性率差异无统计学意义(P>0.05),一致性系数检验κ=0.820,提示两种检测方法一致性较强且有统计学意义(P<0.05)。两种方法检测IB的阳性与阴性总符合率89.8%,阳性率差异无统计学意义(P>0.05),一致性系数检验κ=0.687,两种检测方法一致性基本满意且有统计学意义(P<0.05)。结论采用流式法可及早快速筛查甲型、乙型流感标本,操作步骤简便,只需不到2 h就可完成检测,可以推广应用。
- 刘冬兰刘铭龙毕景锐刘和录陆小梅张玲田新贵周荣
- 关键词:甲型流感病毒乙型流感病毒直接免疫荧光
- 树鼩感染相关细胞因子荧光定量PCR检测方法的建立
- 2019年
- 树鼩是一种新型的优质实验动物模型。本研究针对树鼩感染相关的细胞因子白介素6(IL-6)、IL-8、IL-10、IL-17A、γ-干扰素(IFN-γ)及管家基因磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)建立荧光定量聚合酶链式反应检测方法。研究证明所建立方法具有良好的特异性。线性范围高点可达到1×1010copies,低点则至10copies(IL-6、IL-17A)、100copies(IL-10、GAPDH)和1000copies(IL-8、IFN-γ)不等,在此区间各试剂线性相关系数R2均大于0.99。IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、IFN-γ和GAPDH最低检测值分别在8、8、4、8、128、4copies。研究表明所建立的检测方法具有很好的特异性、灵敏度及较广的线性范围,适用于多重浓度范围的样品检测,可用于后续树鼩细胞因子的研究工作。
- 李潇刘文宽邱淑燕许多周志超田新贵李炽辜淑君周荣
- 关键词:树鼩细胞因子荧光定量聚合酶链式反应
- 利巴韦林对肠道病毒体外抑制作用的研究
- 目的研究抗病毒药物利巴韦林体外抗肠道病毒(EV)的效果。方法采用细胞病变效应(CPE)法和MTT分析法,观察利巴韦林对肠道病毒(EV71、CAV16、CBV3、ECHO11、EV84)的抑制作用。结果利巴韦林对Vero细...
- 田新贵李翔周荣彭涛
- 关键词:利巴韦林肠道病毒MTT分析法抗病毒药物
- 文献传递
- B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建
- 目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-H...
- 鲁俊鹏田新贵罗满林李海涛周志超周荣
- 关键词:B型流感病毒HA基因重组腺病毒
- 文献传递
- 我国手足口病分子流行病学及防控管理措施探讨被引量:43
- 2018年
- 目的 分析汇总公开发表的"2013—2017年"间我国手足口病流行病学及病原学相关数据,浅析手足口病分子流行病学特征,为完善我国手足口病防控管理措施提供科学依据.方法 检索中国知网、万方数据库、维普网、PubMed数据库,以及中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、世界卫生组织网站发布的2013—2017年份我国大陆地区手足口病疫情的相关监测数据,采用描述性统计学分析方法对数据进行综合整理分析.结果 2013—2017年我国手足口病发病率分别为134.37/10万、203.16/10万、145.30/10万、176.62/10万、140.46/10万;2013—2017年上半年间导致手足口病的病原主要有肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)、柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CA16)、CA6、CA10等,CA6已成为我国大部分地区的主要流行株.重症病例中EV71仍为主要的病原,CA6、CA10、CA16也是重要致病原;而不同年份、不同地区手足口病的优势株有所不同.结论 2016年中EV71疫苗正式上市,但目前我国手足口病尚未得到完全控制,仍需加强防控管理,并加强肠道病毒分型监测,以正确评估我国手足口病流行趋势,加快多价疫苗研发进程,以完善我国对手足口病的防控管理措施.
- 樊晔田新贵张日新
- 关键词:手足口病分子流行病学