翟一凡
- 作品数:7 被引量:27H指数:4
- 供职机构:暨南大学更多>>
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- 相关领域:生物学理学医药卫生更多>>
- 铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及制备方法和用途
- 本发明公开了一种铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及其制备方法和用途。试纸条的制备方法:(1)抗铅离子单抗的制备和纯化;(2)检测抗原Pb-DTPA-OVA的制备;(3)胶体金溶液的制备;(4)抗铅离子单抗标记的胶体金溶...
- 唐勇向军俭翟一凡邓宁王宏杨红宇
- 文献传递
- 重金属铅多克隆抗体的制备及鉴定被引量:7
- 2010年
- 目的:合成铅离子完全抗原,并对其进行鉴定;用合成的完全抗原免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定效价和特异性。方法:用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Pb2+与载体蛋白BSA和OVA偶联在一起,合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA),并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP)检测抗原中Pb2+含量,以及通过免疫Balb/c小鼠,采集血清进行间接ELISA和竞争ELISA检测。结果:两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后,紫外吸收峰偏移等现象;免疫的4号和5号Balb/c小鼠的抗血清效价达1:400000;与OVA无交叉反应,ELISA检测IC50值为1.5ng/mL,与Fe3+有近5%的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于1%。结论:铅离子多克隆抗体制备成功。
- 翟一凡向军俭唐勇郭常伟刘小锋杨红宇
- 关键词:铅离子ELISA多克隆抗体
- 酵母表面展示技术应用的研究进展被引量:5
- 2009年
- 酵母菌的蛋白表达方式与高等真核生物细胞十分相似,酵母表面展示技术是研究真核生物,尤其是人类蛋白质表达的理想方法之一。酵母菌表面标记可溶性配基,通过流式细胞技术对酵母菌展示文库进行快速、精确的筛选,其已广泛用于研究天然蛋白质-蛋白质的相互作用、抗体Fab片段的亲和力,成熟、抗体的检测与筛选,以及功能蛋白质抗原表位图谱绘制等。
- 翟一凡邓宁
- 铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及制备方法和用途
- 本发明公开了一种铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及其制备方法和用途。试纸条的制备方法:(1)抗铅离子单抗的制备和纯化;(2)检测抗原Pb-DTPA-OVA的制备;(3)胶体金溶液的制备;(4)抗铅离子单抗标记的胶体金溶...
- 唐勇向军俭翟一凡邓宁王宏杨红宇
- 文献传递
- 重金属铅和铬单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的初步建立
- 目的:制备Pb2+和Cr3+的单克隆抗体,并对其进行鉴定,初步建立起pb2+和Cr3+的间接竞争ELISA和胶体金免疫层析试纸条的方法,从而为构建一个重金属铅和铬离子的免疫学快速检测体系奠定基础。方法:分别利用双功能螯合...
- 翟一凡
- 关键词:重金属铅单克隆抗体间接竞争ELISA胶体金
- 文献传递
- 重金属铬离子胶体金免疫层析快速检测法的建立被引量:12
- 2012年
- 建立了水样中铬离子(Cr3+)检测的免疫试纸条检测方法。将自制的抗Cr3+-EDTA单克隆抗体标记于金颗粒后,包被于玻璃纤维上,将Cr3+-EDTA-BSA抗原和羊抗鼠IgG二抗分别结合于硝酸纤维膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),组装试纸条。该试纸条可检测经亚硫酸氢钠还原为Cr3+的Cr6+,检出限为50μg/L;与10种重金属进行交叉实验验证,除与1 000μg/L的Fe3+有微弱交叉外,与其他重金属均无交叉反应;比较试纸条与仪器法ICP检测加标水样,两种方法的结果呈正相关。该试纸条可在3~5 min内肉眼观察结果,适用于现场检测,满足水样或土壤中重金属铬残留的监测要求。
- 刘茜唐勇向军俭邹军辉翟一凡
- 关键词:铬离子胶体金免疫层析法水样单克隆抗体
- 抗重金属Cr^(3+)单克隆抗体的制备及其应用被引量:6
- 2011年
- 目的:制备重金属Cr3+的单克隆抗体(mAb)并建立间接竞争ELISA法,用于Cr3+的检测。方法:用合成的重金属铬-螯合剂-BSA抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、克隆化和ELISA等技术建立杂交瘤细胞株;腹水型mAb经硫酸铵沉淀纯化后建立间接竞争ELISA法并与9种金属进行交叉实验;水样加标后,进行间接竞争ELISA法与ICP-AES法检测Cr3+的比较,计算两种方法符合率。结果:获得3株稳定分泌抗重金属Cr3+mAb的杂交瘤细胞株,其中5G12C5株mAb间接ELISA效价>1∶1×105,间接竞争ELISA法检测Cr3+的范围为0.783~50μg/L,最低检测限为1μg/L,与Fe3+存在<10%交叉,而与其他金属无交叉反应;当水样中加标量>1μg/L时,间接竞争ELISA法与ICP-AES法检测Cr3+的符合率达96.95%。结论:获得效价高、特异性强的重金属Cr3+mAb,初步建立了检测Cr3+的间接竞争ELISA法,该方法检测的灵敏度可达到国家地下Ⅰ类水的检测标准(0.005 mg/L)。
- 颜露唐勇向军俭翟一凡杨红宇
- 关键词:重金属CR3+细胞融合单克隆抗体ELISA