耿拓宇
- 作品数：96 被引量：360H指数：10
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 研究性教学在家禽生产学中的应用思考被引量：2
- 2020年
- 家禽生产学是动物科学专业的一门专业课程,在家禽生产学教学过程中既需要注重科学性、实用性,也要引导学生开展自主探索和独立思考。研究性教学是以学生为本,将课程教学内容转变成实际科学问题,在教师引导下按照科学研究模式进行分析,培养学生创新能力和解决实际问题的能力,有利于提高专业从业人员的综合素养。文章对家禽生产学教学中存在的问题,研究性教学的特征、经典方法及其在家禽生产学中的应用等方面,进行了总结。
- 赵敏孟刘龙耿拓宇龚道清
- 关键词：研究性教学
- MC5R介导鹅肌肉对营养/能量水平变化的响应
- 2023年
- 为探究黑皮质素受体MC5R在鹅营养/能量代谢中的作用及其机制,着重检测禁食/再饲喂模型中鹅胸肌和营养/能量代谢相关因子处理后鹅原代胸肌细胞中MC5R的mRNA表达水平,通过过表达MC5R后的转录组测序分析筛查MC5R调控的基因与通路,以及检测活体和细胞模型中MC5R下游基因的mRNA表达量。结果表明:肌肉中MC5R的表达为禁食所诱导,而这种诱导可被再饲喂所抑制;鹅原代肌细胞中MC5R的表达可被葡萄糖和油酸所诱导,但被甲状腺素所抑制;MC5R过表达影响的差异表达基因主要富集于糖脂代谢和炎症相关的通路;在鹅活体和细胞模型中筛选到的PLA2G4A、PTGS2、TRAF2、IL6和PLPP4基因可能介导MC5R的生物学作用。综上,MC5R可能通过糖脂代谢和炎症相关通路介导鹅肌肉中营养/能量水平变化所引起的生物学效应。
- 张瑾麒李方博王婉昕杨文鹏袁紫金葛晶赵敏孟刘龙龚道清耿拓宇
- 关键词：能量代谢炎症
- 卵巢肿瘤去泛素化酶7A基因与鹅肥肝形成关系的研究
- 2022年
- 【目的】研究卵巢肿瘤去泛素化酶7A(OTUD7A)基因与鹅肥肝形成的关系。【方法】选取健康、体重一致的70日龄朗德鹅公鹅40只,随机分为2组,对照组自由采食,试验组进行填饲试验,其中填饲第1~5天每日采食量为500 g,第6~12天每日采食量为800 g,第13~19天每日采食量为1200 g。在填饲第7、14和19天时,每组随机选取6只鹅屠宰,取肝脏,采用实时荧光定量PCR测定不同填饲阶段肝脏中OTUD7A基因的表达水平。采用Ⅳ型胶原酶消化法分离23胚龄的鹅原代肝细胞,分别用浓度为0(空白组)、125、250 mmol/L的葡萄糖,0(空白组)、50、100、200 nmol/L的胰岛素,0(空白组)、0.125、0.250 mmol/L的油酸、亚油酸及0(空白组)、0.25、0.50 mmol/L棕榈酸处理鹅原代肝细胞,并用实时荧光定量PCR检测这些脂肪肝形成相关因子对OTUD7A基因表达水平的影响。构建过表达OTUD7A基因的载体pcDNA3.1-OTUD7A,并将构建好的过表达重组质粒转染鹅原代肝细胞,通过转录组学测序(RNA-Seq)进行差异表达基因的筛选,并对获得的差异表达基因进行GO功能富集分析。【结果】在填饲第7、14天时,鹅肝脏中的OTUD7A基因表达显著高于对照组(P<0.05)。与空白组相比,250 mmol/L葡萄糖处理以及0.125 mmol/L和0.250 mmol/L棕榈酸处理均显著提高鹅原代肝细胞中OTUD7A基因的表达水平(P<0.05)。转录组学测序结果表明,OTUD7A基因过表达后共筛选到34个差异表达基因,其中有19个基因表达上调、15个基因表达下调。GO功能富集分析发现,差异表达基因注释到对微生物的防御反应、对外界生物刺激的反应、T细胞分化、细胞外外泌体等条目,其中CLMP、PROCR、SH3BP1、ARHGAP28、ACE、OTUD7A、LOC106045877、LOC106048002基因的表达上调,TNFSF8、DDX60、PLAC8、RSAD2、MX1、RSAD2、GBP1基因的表达下调。【结论】鹅肥肝形成过程中OTUD7A基因的表达水平升高,OTUD7A基因可能通过调控TNFSF8、RSAD2、MX1、GBP
- 孙青云范翔邢娅赵敏孟刘龙耿拓宇龚道清
- 关键词：脂肪肝胰岛素脂肪酸
- 二甲双胍对鸡巨噬细胞HD11天然免疫相关基因表达影响及其抗禽白血病病毒能力分析
- 2019年
- 本研究旨在探讨二甲双胍(metformin)处理对鸡巨噬细胞HD11天然免疫相关基因表达及禽白血病病毒(Avian leukosisvirus,ALV)复制水平的影响。用2mmol/L二甲双胍处理鸡巨噬细胞HD11,处理48h后收集细胞,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测天然免疫基因和内源性反转录病毒的表达。另外,将J亚群禽白血病病毒(J subgroup Avian leukosis virus,ALV-J)(MOI=5)接种于细胞板中,病毒感染细胞24 h后进行二甲双胍处理, 48 h后收集HD11细胞和上清分别进行RT-qPCR检测和ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)检测。结果表明,二甲双胍显著上调HD11细胞天然免疫相关基因TLR3(P<0.01)、IFIH1(P<0.01)、IRF7(P<0.01)、STAT1(P<0.05)、IFN-α(P<0.01)、IFN-β(P<0.01)表达水平,并激活了鸡内源性反转录病毒的表达,抑制ALV-J复制水平。综上,二甲双胍可激活鸡巨噬细胞的天然免疫反应,从而提高鸡抗禽白血病病毒的能力。本研究在体外实验中验证二甲双胍具有抑制ALV增殖的作用,对家禽业的疾病防控有一定的应用价值。
- 豆春峰王芳王芳欧阳娟胡序明贾崇信薛松磊陈世豪齐田羽耿拓宇薛松磊
- 关键词：二甲双胍天然免疫巨噬细胞
- 填饲和脂肪肝相关因子对鹅长非编码RNA基因(LOC106047490)表达的影响被引量：4
- 2017年
- 长非编码RNA(lncRNA)是重要基因调节者,参与多种疾病的发生。本研究着重测定了填饲和脂肪肝相关因子对lncRNA基因(LOC106047490)表达的影响。在填饲7、14、19 d时,该基因在填饲鹅肝脏和腹脂中的表达均受到不同程度的抑制,而在胸肌仅第19天时有较明显的抑制。高葡萄糖、胰岛素和不饱和脂肪酸可在鹅原代肝细胞中诱导该基因的表达,但饱和脂肪酸无诱导作用。此外,在常规饲料中添加20%的蔗糖虽可提高鹅肥肝产量,但并不诱导该基因的表达。最后,本研究还发现该基因在鹅胚胎的肠和肌胃中表达最高,在肝和腿肌中表达最低。综上所述,LOC106047490在鹅肥肝形成过程中扮演重要角色,其表达受葡萄糖、胰岛素和不饱和脂肪酸影响,这为研究其功能提供了良好的体外模型。
- 李富原赵星赵盼刘龙夏丽丽崔恒宓龚道清梁燕耿拓宇
- 关键词：高血糖症高胰岛素血症高血脂症
- 黑羽乌骨鸡碱性磷酸酶的测定被引量：4
- 2001年
- 以黑羽乌骨鸡为素材，测定早期碱性磷酸酶含量，计算碱性磷酸酶与早期增重的相关性。结果表明： 1～ 6周龄碱性磷酸酶含量极显著地高于 7～ 10周龄；饲养全期碱性磷酸酶 含量与早期增重呈极显著相关。
- 张学余耿拓宇卜柱赵东伟陈国宏吴新生李惠芳
- 关键词：黑羽乌骨鸡碱性磷酸酶饲养早期增重
- miR-155体外特异性靶向鸡内源性反转录病毒ALVE1 env转录物的研究被引量：2
- 2016年
- 通过生物信息学方法,发现了鸡内源性反转录病毒禽白血病E1(ALVE1)的env转录物存在gga-miR-155作用位点(AGCATTA),并在体外验证其靶位点的活性。将鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组中扩增的ALVE1 env转录物构建至荧光素酶报告载体pmir GLO,获得重组质粒pmirGLO-ALVE1-ENV-WT(野生型),并利用重叠PCR将其miR-155作用位点AGCATTA突变为ATTCAAA,然后构建重组质粒pmir GLO-ALVE1-ENV-MU(突变型),同时将gga-miR-155前体序列构建至pc DNA3.1载体,获得重组质粒pc DNA3.1-gga-miR-155,将这些质粒共转染至DF-1细胞中,48 h后收集细胞并检测荧光素酶活性。结果发现:野生组能显著下调pmir GLO-ALVE1-ENV-WT荧光素酶活性,而对照组无显著改变;对照组和突变组均未能改变pmir GLO-ALVE1-ENV-MU荧光素酶活性。本研究证实gga-miR-155可直接靶向ALVE1 env转录物,为鸡内源性反转录病毒的调控机制提供了新的启示。
- 朱文奇胡序明陈世豪刘洋洋孙振耿拓宇宋成义高波崔恒宓
- 关键词：MIR-155靶位点ENV
- 鹅肥肝形成过程中PRIMA1基因的表达规律及其调控研究
- 2020年
- 为了揭示可提高乙酰胆碱酯酶活性、促进保护性胆碱生成的PRIMA1基因在鹅肥肝形成过程中的表达规律及其调控因素,试验采用实时荧光定量PCR方法研究了填饲不同时期对照组和填饲组鹅肝脏、腹脂和胸肌中PRIMA1基因的表达水平,以及葡萄糖、油酸、胰岛素、棕榈酸等不同因子与PPAR激动剂对鹅原代肝细胞中PRIMA1基因表达量的调控,同时还测定了填饲鹅肥肝和对照鹅正常肝脏中乙酰胆碱酯酶的活性。结果表明:与对照组比较,填饲组可极显著诱导PRIMA1基因在肝脏中的表达(P<0.01),而抑制其在腹脂和胸肌中的表达;在鹅原代肝细胞中,200 mmol/L葡萄糖和0.5 mmol/L油酸均可显著诱导PRIMA1基因的表达(P<0.05),而100 nmol/L胰岛素、0.25 mmol/L棕榈酸以及PPAR激活剂均具有抑制作用(P<0.05);此外,填饲抑制了鹅肥肝中乙酰胆碱酯酶的活性。说明PRIMA1基因参与鹅肥肝的形成,其表达量的增加可能与填饲引起的高血脂高血糖有关,且PPAR激动剂可能参与脂肪酸对PRIMA1的表达调控。
- 李璧宇许程赵超邢娅刘龙赵敏孟龚道清耿拓宇梁燕
- 关键词：脂肪肝高血糖症高血脂症
- 鹅肥肝形成中脂肪酸通过PPARγ/Cyp2c45通路调节Pk和Alox5基因表达
- 赵敏孟刘同君王倩刘龙龚道清耿拓宇
- 磷脂磷酸酶3基因与鹅肥肝形成关系的研究被引量：1
- 2019年
- 为探究磷脂磷酸酶3(PLPP3)基因与鹅肥肝形成的关系,选取30只70日龄健康朗德鹅,随机分为填饲组与对照组,采用实时荧光定量PCR技术测定朗德鹅不同填饲阶段(填饲12和24d)肝脏、胸肌和腹脂中PLPP3基因的表达水平;利用不同剂量的脂肪肝形成相关因子(胰岛素、葡萄糖、油酸、亚油酸和棕榈酸)分别处理朗德鹅原代肝细胞,检测这些因子对PLPP3基因表达的影响。结果表明:与对照组相比,填饲12d时,肝脏、腹脂和胸肌中PLPP3基因的表达均显著或极显著下调;填饲24d时,肝脏中表达差异不显著,腹脂中极显著下调,胸肌中显著上调;在鹅原代肝细胞中,与对照组相比,处理组葡萄糖、棕榈酸和油酸能显著抑制PLPP3基因的表达,而胰岛素和亚油酸处理则无显著效应。这一研究提示PLPP3基因的表达变化与鹅肥肝形成密切相关,且受脂肪形成相关因子的调控,说明PLPP3可能在鹅肥肝形成中有重要作用。
- 顾旺刘立东温康张军耿拓宇龚道清
- 关键词：脂肪肝胰岛素
