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蒋玉平: 作品数：10 被引量：24H指数：3; 供职机构：苏州大学医学部医学生物技术研究所更多>>; 发文基金：江苏省临床免疫学重点实验室基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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小鼠DC上HVEM与BTLA相互作用对T细胞免疫应答的影响: 启动T细胞免疫应答需要双信号的参与：T细胞抗原受体TCR和抗原递呈细胞(antigen presenting cell, APC)上MHC/抗原肽复合物结合产生的第一信号;T细胞与APC表面的共刺激分子相互作用产生的第二...; 蒋玉平; 关键词：树突状细胞 T细胞 HVEM BTLA 免疫应答; 文献传递

可溶性FL酶联检测试剂盒的研制及其运用: 2010年; 目的建立灵敏、特异和稳定的人可溶性FL(sFL)酶联检测试剂盒,探讨其临床检测意义。方法采用鼠抗人FL单克隆抗体2D2为包被抗体,识别人FL不同位点的商品化多克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心的人sFL酶联免疫检测方法(sFL-ELISA)。在此基础上,分别对不同血清样本中sFL的含量进行定量分析。结果成功研制人sFL酶联检测试剂盒,灵敏度为7.8pg/ml。该试剂盒4℃放置3个月,离散度(CV%)<7.6%,加入rh-FL/Fc重组蛋白后的回收率在97%～110%。应用该试剂盒测得的健康供血员、再生障碍性贫血患者和白血病患者血清中sFL含量分别为(328.6±42.89)、(2607±286.8)、(1091±255.2)pg/ml。结论研制成灵敏、特异和稳定的人sFL酶联检测试剂盒,能对血清中sFL进行准确定量分析,具有良好的应用前景。; 蒋靓蒋玉平张世杰王凤鸣孙静顾宗江; 关键词：酶联免疫反应白血病再障

BTLA对T细胞活化的起始和早期阶段免疫应答的调节: 目的：观察BTLA在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制.方法：分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞.流式检测新鲜分离T细胞上BTLA、HVEM、LIGHT、CTLA-4和P...; 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江

人VSIG4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究被引量：3: 2009年; 目的:分别构建含有人VSIG4基因两种不同变异体(VSIG4L和VSIG4S)的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达VSIG4L和VSIG4S基因的L929细胞并初步研究其对T细胞的共刺激作用及可能机制。方法:从人肺cDNA文库中扩增出VSIG4L和VSIG4S的全长基因,并分别克隆入T载体中,再双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term中,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,以其培养上清感染L929细胞72小时后,经Zeocin筛选出稳定表达VSIG4L或VSIG4S分子的L929细胞株;采用RT-PCR和流式细胞仪分析VSIG4分子的表达,MTT和ELISA分别检测T细胞增殖及IL-2的分泌。结果:构建了含人VSIG4L基因和VSIG4S基因的重组逆转录病毒载体,并获得含有VSIG4L基因和VSIG4S基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人VSIG4L和VSIG4S分子的L929转基因细胞;该转基因细胞具有体外抑制T细胞增殖、活化和IL-2分泌的作用。结论:构建了稳定表达人VSIG4L和VSIG4S膜型分子的细胞株,该分子两种不同变异体在体外均可抑制T细胞增殖和IL-2分泌。; 张世杰王蕾王月颖蒋靓蒋玉平高超张学光顾宗江; 关键词：逆转录病毒基因转染共刺激分子

4-1BB信号拮抗肿瘤上清诱导的树突状细胞凋亡及其机制被引量：1: 2009年; 目的研究4-1BB信号对肿瘤上清诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)凋亡的拮抗作用及其机制。方法IL-4和GM-CSF诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞,得到未成熟DCs,磁珠纯化。以抗4-1BB激发型抗体2A或CD40激发型抗体1c10刺激DCs,在不同条件下检测DCs的凋亡情况。以抗体标记NFκ-Bp65亚基,激光共聚焦显微镜检测抗4-1BB激发型抗体2A处理后DCs内NFκ-Bp65亚基向核内的转位情况。结果DCs上4-1BB信号的激发能拮抗由B-16肿瘤上清诱导的DCs凋亡,效果低于CD40信号,并能引起NFκ-Bp65亚基向核区转位。结论4-1BB信号的激发提高了DCs抵抗肿瘤上清诱导凋亡的能力,此作用通过包含NFκ-B通路的相关胞内信号传导途径实现。; 陈曦蒋玉平王月颖周春刚张世杰张学光顾宗江; 关键词：树突状细胞 4-1BB 凋亡 NFΚ-B

负性协同刺激分子B7-H4在小鼠树突状细胞上的表达及其生物学意义: 2009年; 目的探讨B7-H4分子在小鼠树突状细胞分化发育过程中的表达及其在T细胞活化中的作用。方法采用GM-CSF和IL4联合方案体外诱导小鼠髓系树突状细胞（DCs）；采用流式细胞术检测未成熟DCs、成熟DCs以及IL-10诱导的DCs表面B7-H4分子的表达；采用。H—TdR掺入试验和抗B7-H4单抗（McAb）阻断试验分析DCs表达的B7-H4分子对T淋巴细胞的共刺激效应。结果经GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导的未成熟DCs较高水平表达B7-H4，在IL-10作用下B7-H4表达进一步上调，经TNF-α刺激成熟后，B7-H4的表达显著下调，不同功能状态下DCs表面B7-H4分子均可抑制T细胞的增殖，但以未成熟DCs、IL-10诱导的DCs表面B7．H4分子的抑制作用更为显著。结论不同功能状态下的DCs均有B7-H4分子的表达，处于抑制状态下的DCs通过高表达B7-H4介导免疫不应答效应。; 瞿秋霞陈成蒋玉平陈曦沈宇朱一蓓张学光; 关键词：树突状细胞 B7-H4 T淋巴细胞

BTLA信号对T细胞活化的起始和早期阶段的调节作用被引量：12: 2010年; 目的:观察BTLA分子在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制。方法:分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞。检测T细胞上BTLA、CTLA-4和PD-1的表达;用CD3抗体刺激T细胞活化,比较BTLA、CTLA-4和PD-1在T细胞活化过程中的动态表达。CD3抗体联合CD28抗体活化T细胞,在不同的活化时间,MTT法检测BTLA单抗8H9对T细胞增殖的影响。GM-CSF和IL-4体外诱导单核细胞分化成未成熟DC,CD40抗体刺激DC成熟,流式检测HVEM在DC上的表达。用DC诱导T细胞活化,加入游离8H9或抗HVEM抗体,阻断HVEM和BTLA结合,MTT法检测T细胞增殖。结果:静止T细胞组成性高表达BTLA,不表达CTLA-4和PD-1分子。T细胞活化后,BTLA分子表达有所降低,然后迅速回升至高水平。CTLA-4、PD-1分子在活化后两天几乎不表达,第三天开始表达并逐渐上升。8H9可以抑制CD3和CD28抗体活化的T细胞增殖。CD3和CD28抗体预先活化T细胞24小时或48小时后,再加入8H9仍然具有抑制效应,但不如在T细胞活化之初加入8H9的抑制效应。单核细胞诱导的不成熟DC上高表达HVEM,当DC成熟后,HVEM表达降低。用游离8H9或HVEM抗体阻断DC表面HVEM与T细胞表面BTLA结合,48小时之内均明显增强了DC诱导的T细胞增殖。结论:BTLA信号可以提高T细胞的活化阈值,在T细胞活化的起始和早期阶段发挥重要的负性调控作用。; 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江; 关键词：BTLA T细胞活化免疫调节

人VSIG4-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究被引量：2: 2009年; 为获取人VSIG4-Fc融合蛋白,并研究其对T细胞的调节效应。首先采用PCR获取人VSIG4基因的胞外段序列及人IgG1Fc恒定区序列,将两者顺次连接插入逆转录病毒载体,以293T为包装细胞,制备含病毒颗粒的培养上清,反复感染CHO细胞,Zeocin筛选能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白的基因转染细胞并以RT-PCR、Dot-blot及Western blot等鉴定。以MTT和ELISA分别检测VSIG4-Fc融合蛋白对T细胞增殖及IL-2分泌的影响。结果成功获取了CHO基因转染细胞,该细胞能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白,纯化后的VSIG4-Fc蛋白能与T细胞表面未知受体结合,并具有体外抑制T细胞增殖、活化和IL-2分泌的作用。; 张世杰王蕾王月颖李道明朱守兵蒋玉平蒋靓张学光顾宗江; 关键词：逆转录病毒融合蛋白共刺激分子

小鼠髓系树突状细胞表面疱疹病毒侵入介体表达的变化: 2010年; 目的探讨小鼠髓系树突状细胞(BMDC)共刺激分子疱疹病毒侵入介体(HVEM)表达的变化。方法将促DC成熟活化因子LPS、TNF-α、2A抗体、1c10抗体和免疫负性调节因子IL-10加入到各组BMDC中,观察BM-DC上HVEM表达的变化。结果加入促成熟活化因子的各组BMDC上HVEM表达与对照组明显下调(P<0.05)。而加入免疫负性调节因子的BMDC上HVEM表达较对照组明显上调(P<0.05)。结论促成熟活化因子有下调BMDC上HVEM表达的作用,而免疫负性调节因子有上调BMDC上HVEM表达的作用。; 蒋玉平蒋靓陈曦张学光顾宗江; 关键词：树突状细胞

亲和层析法纯化小鼠腹水来源的单克隆抗体的实验研究被引量：4: 2007年; 目的建立从小鼠腹水中纯化抗CD28单克隆抗体(mAb)2F5的一步亲和层析方法。方法小鼠mAb腹水样品经离心过滤后,进行亲和层析柱纯化。分别对样品稀释倍数、上样流速、梯度洗脱体积对m A b纯度的影响进行检测。结果样品在稀释4倍以上、上样流速为1.0mL/min以及Gly-HCl(pH 2.7)一步洗脱条件下,可获得纯度大于90%的mAb 2F5,回收率为80%。结论该研究建立的一步亲和层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度和回收率较高。; 徐颖蒋玉平马泓冰胡玉敏孙中文张学光; 关键词：单克隆抗体纯化亲和层析法小鼠腹水

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