贾凌
- 作品数:8 被引量:8H指数:2
- 供职机构:西南大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 家蚕化蛹第7天卵巢组织蛋白质标准图谱的构建被引量:2
- 2009年
- 家蚕蛹期是卵子发育的重要时期,对蛹期卵巢的蛋白质组学研究将有助于认识家蚕的卵子发育过程。获取处于卵黄生成期的家蚕化蛹第7天卵巢组织,提取蛋白样品进行双向电泳,经银染后检测到682个蛋白点,这些蛋白点主要分布于分子质量15-90 kD、等电点4-8之间。对其中较高丰度的蛋白点进行飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定,共分析得到40个可信蛋白点,其中包括4个在家蚕中新鉴定的蛋白。经基因功能分类分析,这些蛋白包括营养储存蛋白、应激相关蛋白、蛋白翻译相关蛋白及代谢相关蛋白等。
- 徐云敏付强张赛贾凌何宁佳
- 关键词:家蚕卵巢蛋白质谱飞行时间质谱小分子热激蛋白
- 家蚕中球孢白僵菌结合蛋白CI8A的鉴定
- 球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种昆虫致病性真菌,由于其具有高效低毒,宿主范围广的特点,现已被作为生物杀虫剂广泛应用。球孢白僵菌对昆虫的侵染主要是利用发芽管分泌的表皮降解酶和机械压力穿透昆虫的表皮,...
- 贾凌
- 关键词:球孢白僵菌家蚕
- 农杆菌介导的桑树瞬时表达体系构建及miRn51与其靶基因的表达分析被引量:4
- 2015年
- 微小RNA(miRNA)是一类内源性非编码的单链小RNA,对植物的生长发育起着重要调控作用。建立高效的桑树瞬时表达体系是研究桑树miRNA及其靶基因功能的有效手段。将川桑(Morus notabilis)基因组中克隆的miRn51前体序列连接到PLGNL载体上,构建了PLGNL-35S-miRn51重组质粒,通过农杆菌介导其在桑树叶片中瞬时表达。采用GUS组织化学染色、多酚氧化酶活性检测以及荧光定量PCR等方法,分析不同缓冲液、重组农杆菌注射菌液浓度、转化时间、桑树品种等试验条件对农杆菌介导的桑树叶片瞬时表达体系转化效率、miRn51及靶基因表达水平的影响,当采用1号缓冲液和菌液D(600 nm)=0.6的重组农杆菌进行瞬时转化时,转化桑树叶片3 d后miRn51的表达量最高,其靶基因Mn PPO2的表达水平受到明显抑制,不同桑树品种对瞬时表达体系的瞬时表达效率有一定影响。以上结果表明,建立的农杆菌介导的桑树瞬时表达体系能简便、有效、快捷地验证桑树miRNA对其靶基因的调控作用。
- 张大燕贾凌向仲怀何宁佳
- 关键词:桑树微小RNA靶基因
- 家蚕5龄第3天幼虫头部组织蛋白质双向电泳及质谱鉴定
- 2011年
- 家蚕幼虫头部有单眼、触角、口器、脑等取食和感觉的中心器官及坚硬的外壳。提取家蚕5龄第3天幼虫头部组织蛋白质进行双向电泳,经银染检测到654个蛋白点,这些蛋白的分子质量主要分布在15~97 kD之间,等电点(pI)在4~8之间;在pH 3~4和9~10的区域,也有较多的蛋白质被检测到,但该区域高丰度的蛋白质数量较少。对丰度较高的100个蛋白点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,有52个蛋白质被鉴定,其中有21个酶类相关的蛋白,占被鉴定总蛋白质数的40.4%,其它蛋白质主要包括表皮蛋白、气味结合相关蛋白、肌肉相关蛋白等。研究结果可为家蚕幼虫头部组织的功能分析提供蛋白质水平的信息数据。
- 付强徐云敏张赛贾凌商敬哲何宁佳
- 关键词:家蚕蛋白质双向电泳
- 内含肽介导的撕裂Cas9:一种非转基因的植物基因编辑系统
- 2023年
- CRISPR/Cas9技术在植物的基础研究以及谷物的遗传改造方面展现出了前所未有的潜力.目前植物基因编辑方法大多是基于农杆菌介导的遗传转化,该方法不仅涉及转基因过程,容易引发公众关注,同时该方法对较难转化的植物而言有一定的技术挑战.研究开发了一个简单的非转基因植物基因编辑方法,即采用病毒递送的方式将片段化的Cas9和gRNA运送到烟草中.为了适应马铃薯病毒X载体的运载能力,将金黄色葡萄球菌SaCas9分成3个部分,用2个片段化的内含肽将其连接成完整的Cas9蛋白.结果表明:在培养的细胞和植物叶片中,2个片段化的内含肽均能使3个片段化的Cas9重组为完整的Cas9蛋白.将3个片段化的载体和1个sgRNA载体注射到叶片中,能对PDS基因进行靶向编辑.该非转基因的植物基因编辑方法可能对其他多种植物有一定的应用效果.
- 贾凌许冰心叶冬梅李亚秀夏庆友
- 关键词:基因工程
- 桑树miRNA的鉴定及其在蚕桑互作中的功能研究
- 研究利用寡食性昆虫-家蚕和桑叶这对组合,探究家蚕摄食桑叶后,桑树的miRNA是否进入了家蚕的体内。利用Illumina高通量测序方法对野生桑(川桑)、栽培桑(湖桑32号和伦教109)叶片以及家蚕血淋巴小RNA进行大规模测...
- 贾凌
- 关键词:桑树微小核糖核酸家蚕基因鉴定生理功能
- 家蚕中球孢白僵菌结合蛋白CI7A的鉴定
- 球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种昆虫致病性真菌,由于其具有高效低毒,宿主范围广的特点,现已被作为生物杀虫剂广泛应用。球孢白僵菌对昆虫的侵染主要是利用发芽管分泌的表皮降解酶和机械压力穿透昆虫的表皮,...
- 贾凌
- 关键词:球孢白僵菌家蚕免疫应答
- 文献传递
- 测定重复序列的一种有效方法——定向删除法
- 2010年
- 基因组中存在大量的重复序列,它们具有调节基因表达和染色体的生理代谢等重要的生物功能。重复序列由于其结构的特殊性,不但鸟枪法基因组测序不能有效地测定它们的序列,而且采用引物步移法等一般的定向测序方法也不能对其准确测定。本研究利用核酸外切酶Ⅲ定向删除技术,结合菌液电泳等快速筛选方法,对黄蜂蜘蛛三个高度重复序列丝蛋白基因MaSp2、CySp1和CySp2进行了准确的测定。研究结果表明核酸外切酶Ⅲ定向删除法是一种测定高度重复序列的有效方法,利用普通的琼脂糖电泳技术,该方法可以单向地有效测定重复序列的长度可达10kb,同时我们还发现合适内切酶的选择,定向删除亚克隆的筛选与排序以及序列的准确拼接是该方法有效而准确测定高度重复序列的关键。
- 贾凌赵爱春马三垣何宁佳
- 关键词:测序