赵素慧
- 作品数:13 被引量:19H指数:3
- 供职机构:南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金:广东省社会发展领域科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 2010年冬-2011年春广州地区儿童腺病毒的分子流行病学研究
- 张其威赵素慧朱冰王长兵朱利赵卫万成松
- 肠出血性大肠埃希菌O157:H7菌株的细胞毒性比较
- 2012年
- 目的比较肠出血性大肠埃希菌流行菌株的细胞毒性,筛选强毒株,为进一步研究细菌的致病机理提供理论依据。方法采用PCR技术鉴定菌株的毒力基因E-hlyA、stx2、stx1,Giemsa染色观察细菌的黏附情况,通过测定感染后Vero细胞的乳酸脱氢酶释放情况了解细菌的Vero细胞毒性强弱。结果肠出血性大肠埃希菌O157:H7菌株含有的毒力基因不同,均具有较强的黏附能力和Vero细胞毒性,其中国际菌株933W/O,中国流行菌株882364、01H112和日本菌株Cua9的Vero细胞毒性较强。结论筛选出的流行菌株强毒株,可用于进一步的细菌感染模型构建和毒力基因致病机制研究。
- 王春晖赵素慧万成松
- 关键词:肠出血性大肠埃希菌乳酸脱氢酶
- A型肉毒梭菌atx基因TaqMan探针荧光定量PCR检测被引量:2
- 2012年
- 目的采用TaqMan探针荧光定量PCR方法对A型肉毒梭菌atx基因进行检测。方法以atx基因为靶基因,设计引物和TaqMan探针,优化反应条件,制作定量标准曲线,进行灵敏度、特异性和重复性验证,建立A型肉毒梭菌TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果构建质粒pUC57-△atx,标准曲线在103~107拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.997,灵敏度达到22个拷贝数,比普通PCR提高约100倍;能选择性检测A型肉毒梭菌,与其他5种食源性病原菌无交叉反应,结果与普通PCR一致;重复性试验表明,同一浓度的15个平行样品的变异系数为1.0%。结论 A型肉毒梭菌TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以快速、准确、定量地检测A型肉毒梭菌。
- 王春晖赵素慧韦耀周莹万成松
- 关键词:肉毒梭菌TAQMAN探针荧光定量PCR
- 新发急性呼吸道疾病病原体:人14型、55型腺病毒的基因组学研究
- 张其威曹彬朱冰王长兵陈翊赵素慧万成松
- 从师生角度浅谈医学生课外科研活动被引量:2
- 2012年
- 课外科研活动是培养大学生成为创新型人才,启发其创新思维,培养其科研能力的重要途径。本文从学生和教师两个不同的角度,探讨医学本科生参加课外科研活动的特点及存在的共性问题,并结合实例,分别提出相应对策,以期今后对医学生及指导教师有所借鉴。
- 张其威赵素慧钮红岺韩桂圆万成松
- 关键词:教师医学生课外科研活动
- 我国新发和再现的人14、55和7型腺病毒:新的挑战?
- 赵素慧周杰万成松张其威Donald Seto京舒娉曹彬王长兵朱冰陈翊柯昌文邹丽蓉
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体的制备和初步纯化
- 2012年
- 目的制备肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7EspF蛋白多克隆抗体并初步纯化。方法生物信息学方法分析EHECO157:H7EspF蛋白的柔韧性、亲水性、表面可能性及抗原表位,选取1条由15个氨基酸残基组成的多肽为半抗原,在其C端偶联钥孔血蓝蛋白(KLH),免疫新西兰大白兔制备抗血清。ELISA测定抗血清效价,免疫印迹法鉴定其特异性,辛酸-硫酸铵法初步纯化抗血清,SDS-PAGE检测抗体纯度。结果选择EspF蛋白抗原指数最高的肽段72-TPSRPAPPPPTSGQA-86(0.506)为半抗原,合成抗原多肽经高效液相色谱鉴定,纯度为95.78%,经质谱分析其分子量为1563.76Mr,与目的多肽分子量一致;加强免疫3次后,EHECO157:H7EspF蛋白的抗血清效价达1:2048000;该血清对EHECO157:H7野生株和espF突变株(△espF)的EspF蛋白均有特异性,并经辛酸-硫酸铵法获得一定纯度的抗体。结论成功地制备了效价高、特异性强的EHECO157:H7EspF蛋白多克隆抗体。
- 周莹赵素慧韦耀王春晖张其威万成松
- 关键词:O157:H7多克隆抗体
- 人3型腺病毒GZ13株的分离鉴定及六邻体蛋白的分子进化研究被引量:3
- 2012年
- 目的分离鉴定1株引起儿童急性支气管肺炎的腺病毒及分析其主要中和抗原六邻体蛋白的分子进化趋势。方法采用荧光定量PCR方法,对1例引起严重支气管肺炎的患儿咽拭子进行检测,并从中分离得到1株腺病毒(命名为GZ13)。利用型特异性引物PCR进行初步亚型鉴定;克隆该株腺病毒完整的六邻体蛋白基因,测序和序列比对,确定其型别;同时与GenBank上人3型腺病毒的六邻体蛋白进行同源性比对,分析预测六邻体蛋白的分子进化趋势。结果该临床标本经荧光定量PCR鉴定为腺病毒强阳性,型特异性引物PCR初步鉴定为3型;完整六邻体基因比对最终确定为人3型腺病毒;GZ13株与我们先前分离的GZ01、GZ02株及台湾地区分离株核苷酸及氨基酸的同源性均大于99%。结论引起该例儿童急性支气管肺炎的病原体为人3型腺病毒,目前在广州以及台湾地区流行的3型腺病毒仍属同一流行株,其主要中和性抗原六邻体蛋白未出现明显变异,这对今后开发研究人3型腺病毒疫苗及药物具有重要指导意义。
- 张其威赵素慧王长兵朱冰朱利赵卫李凌万成松
- 关键词:分子进化
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量:2
- 2014年
- 目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。
- 韩朋孙琦赵素慧张其威万成松
- 关键词:EHECO157H7RED重组系统
- TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测土拉弗朗西斯菌被引量:3
- 2012年
- 目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制作定量标准曲线,并以合成fopA基因为模板,PF、PR为引物,研究其灵敏度、特异性和准确性。结果构建了含fopA基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在103~107拷贝数之间有较好的线性关系。灵敏度试验表明,该方法可检测到30.6个拷贝数的重组质粒,比普通PCR灵敏度高;特异性试验表明,能选择性检测土拉弗朗西斯菌,而与其他病原菌无交叉反应,与普通菌落PCR结果一致;重复性试验表明,拷贝数为3.06×106样品5次平行试验,标准差为0.201,变异系数为0.88%。结论本研究建立了TaqMan探针QF-PCR快速检测技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可用于快速、实时、定量检测土拉弗朗西斯菌,为快速检测生物战剂级微生物建立了一种人工合成特异基因TaqMan探针实时荧光定量PCR新方法。
- 赵素慧王春晖周莹韦耀韩桂圆钮红岺赵卫张其威万成松
- 关键词:土拉弗朗西斯菌TAQMAN探针荧光定量PCR