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陈博: 作品数：10 被引量：4H指数：1; 供职机构：新疆畜牧科学院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划新疆维吾尔自治区科技计划项目新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用: 目的：无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用。方法：将分离得到的若干oESC-like集落，在体式显微镜下将其放入Tryple Express中，观察这些集落由原来的致密状态逐渐松散呈草莓状后立即转入oESC...; 陈博黄俊成; 关键词：绵羊饲养模式胚胎干细胞; 文献传递

多因素对昆明小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖的影响: 2011年; 目的:研究细胞因子LIF、EGF、bFGF和肝素钠,以及氧分压、温度等多因素对昆明系小鼠胚胎干细胞(KM-ESC)原代集落形成和后期增殖的影响。方法:本研究选择LIF、EGF、bFGF、肝素钠、5%O2,20%O2和37℃、39℃作为研究条件。并检测不同情况下小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖情况。结果:LIF对KM-ESC原代集落形成和后期增殖具有显著促进作用,极显著高于EGF、bFGF和肝素钠组(P<0.01)。温度对KM-ESC原代集落形成和增殖具有显著影响,39℃条件下,原代集落形成率、直径和后期增殖显著高于37℃(P<0.05);而氧分压对KM-ESC原代集落形成无显著作用(P>0.05),但是对原代集落直径和后期增殖有一定促进作用,20%O2组显著高于5%O2组(P<0.05)。结论:LIF、EGF、bFGF、肝素钠、39℃、20%O2对小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖具有显著促进作用。; 陈博赵云程陈士斌王静王静金贤华; 关键词：胚胎干细胞细胞因子氧分压

家畜胚胎干细胞多能性候选信号通路及分子标志: 2010年; 家畜胚胎干细胞具有重要的生物学意义和广阔的应用前景。以下对比了小鼠、人胚胎干细胞多能性调控信号通路的异同,阐述了小鼠、人胚胎干细胞与家畜胚胎干细胞在多能性分子标志上的差异,并结合本实验室开展绵羊胚胎干细胞研究的实际经验,对目前家畜胚胎干细胞建系中可能存在的多能性候选信号通路及分子标志进行了探讨。; 赵云程陈博周川张秀华黄俊成; 关键词：家畜胚胎干细胞多能性信号通路候选基因

LIF和bFGF对维持绵羊类胚胎干细胞自我更新和多潜能性候选基因的影响: 胚胎干细胞（Embryonic stem cell, ESC）的应用已经在医学、基础研究领域和商业化市场被认可,这些都归因于ESC多潜能性和自我更新的特点。本实验结合国际ESC最新研究进展,在本实验室前期对绵羊类胚胎干细...; 陈博; 关键词：白血病抑制因子碱性成纤维细胞因子

无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用: 2014年; 目的:本文采用N2B27无血清无饲养层的完全已知成份的培养体系,通过机械分离法分离不同阶段的绵羊囊胚,观察不同阶段囊胚对分离绵羊类胚胎干细胞的影响。方法:本实验采用N2B27无血清无饲养层成份完全已知的培养体系,利用机械分离法对不同阶段的绵羊囊胚进行分离,观察其绵羊类胚胎干细胞的原代集落形成率,以及AKP染色,多潜能性候选基因Oct-4和Sox-2免疫荧光检测。结果:分离早期阶段绵羊囊胚获得的绵羊类胚胎干细胞的形成率显著低于扩张(孵化)阶段囊胚(19.6%(11/56)vs 36.9%(31/84))(P<0.05),同时早期和扩张(孵化)阶段绵羊囊胚的AKP染色和多潜能性候选基因Oct-4、Sox-2的表达呈阳性。结论:N2B27无血清无饲养层培养体系是一种有效分离绵羊类胚胎干细胞的培养基,同时分离绵羊扩张(孵化)阶段的囊胚可以显著的提高原代类胚胎干细胞的建系率,为提高绵羊类胚胎干细胞的建系奠定了基础。; 陈博赵云程林嘉鹏孙晓岩陈雪梅黄俊成; 关键词：胚胎干细胞囊胚绵羊胚胎

Application of PDE3 and Brilliant Cresyl Blue in In-vitro Culture of Sheep Oocyte: 2011年; [Objective] The aim of this study was to increase the viability of sheep oocytes in vitro by using phosphodiesterase type 3（PDE 3） inhibitor milrinone combined with brilliant cresyl blue（BCB） staining.[Method] The differences between BCB tested and morphologically selected oocytes,as well as the effect of them on embryo development were compared;and then suitable inhibitive time of milrinone to sheep oocytes in vitro was studied and used in BCB-oocytes for in vitro embryo production（IVEP）.[Result] The BCB＋ oocytes percentage in A-and B-level sheep oocytes was 64.42%,which was extremely significantly higher than that in C-level（17.0%）.The maturing rate,cleavage rate and blastocyst rate of BCB＋ oocytes（86.16%,85.29% and 34.40%） of was significantly higher than those of BCB-oocytes（50.94%,36.19% and 6.73%）.The best time for PDE 3 inhibitor delaying the sheep oocyte mature in vitro was 6 h.In addition,the rate of embryo development in vitro could be significantly increased by inhibiting the BCB-oocytes for 6 h with Milrinone.[Conclusion] The study will provide reference for improving the efficiency of sheep oocytes culture in vitro.; 汪立芹王静王静金贤华陈博; 关键词：MILRINONE

BCB筛选后的绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的差异性分析被引量：1: 2010年; 卵母细胞的胞质成熟对于受精后正常的胚胎发育是至关重要的,亮甲酚蓝染色液(BCB)能有效筛选出胞质成熟卵母细胞。为详细了解BCB筛选出的不同质量绵羊卵母细胞中母源基因mRNA的表达量的差异性,从而证明BCB对绵羊卵母细胞筛选的可行性和可靠性,判断4种母源基因与卵母细胞的胞质成熟是否有关,为哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育分子机理的研究提供参考。本实验将卵母细胞置于BCB染色液中,细胞质着蓝色的为BCB+,没着蓝色的为BCB-;并利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mate(r胚胎必要的母体抗原)和Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同质量绵羊卵母细胞中的mRNA含量。结果表明:BCB染色筛选后,阴性卵母细胞4种基因的mRNA表达量比阳性高(P<0.01),这充分证明,BCB能有效筛选出胞质成熟度好的绵羊卵母细胞,这4种母源基因与卵母细胞的胞质成熟有关。; 王静王静石庆华林嘉鹏陈博汪立芹赵云程; 关键词：荧光实时定量PCR

牛卵母细胞玻璃化冷冻对基因mRNA表达量的影响: 2011年; 目的将处于生发泡期(GV期)和体外成熟期(IVM)的牛卵母细胞进行玻璃化冷冻-解冻,对其卵裂率和囊胚率以及一些与发育相关基因的mRNA表达量进行评价。方法玻璃化冷冻GV期(n=224)和IVM期(n=235)牛卵母细胞,解冻后对其进行体外培养并采用quantitative real time-PCR技术对冷冻-解冻后的GV和IVM期卵母细胞中Bax、Dnmt1、Hdac1、Cyclinb1、Cdc2和Cu Zn SOD等基因的mRNA表达量进行检测。结果 GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(14.7%～89.4%,34.5%～89.4%,P<0.001)及囊胚率(3.0%～28.4%,12.3%～28.4%,P<0.001)均极显著低于对照组(n=238),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率(14.7%～34.5%,P<0.001)和囊胚率(3.0%～12.3%,P<0.001)极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞;GV期卵母细胞经玻璃化冷冻后,Dnmt1和Cu Zn SOD基因的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),其余基因mRNA表达量变化不显著;对M期卵母细胞而言,Bax基因mRNA表达量极显著低于对照组(P<0.01),Cyclinb1、Cdc2和Cu Zn SOD基因的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),其余基因表达量没有发生显著变化。结论对牛GV期或IVM卵母细胞进行玻璃化冷冻可能会导致基因mRNA表达量降低,可能会对胚胎发育产生负面影响。; 林嘉鹏王静王静赵云程陈童汪立芹陈博; 关键词：玻璃化冷冻基因表达牛卵母细胞发育能力

玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响: 2011年; 为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM期(18、24h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养。GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37%、23.17%、33.07%)均极显著低于对照组(82.96%,P<0.01),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞(P<0.01)。本试验利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因:Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)、Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同处理后的绵羊卵母细胞中的mRNA含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于IVM期的卵母细胞(P<0.01);经玻璃化冷冻处理后,4个基因的mRNA表达量升高,其中GV期含量最高(P<0.01)。结果提示,绵羊GV或IVM期卵母细胞玻璃化冷冻导致母源基因mRNA表达量升高,可能会对胚胎发育产生负面影响。; 王静王静林嘉鹏石庆华陈博汪立芹赵云程; 关键词：玻璃化冷冻荧光实时定量PCR

PDE3与亮甲酚蓝在绵羊卵母细胞体外培养中的应用研究被引量：3: 2011年; [目的]探讨磷酸二酯酶3(PDE3)特异性抑制剂Milrinone与亮甲酚蓝染色液(BCB)相结合在绵羊卵母细胞体外培养中的应用。[方法]比较了BCB对绵羊卵母细胞的筛选与传统的形态分级之间的差异,以及对胚胎后期发育的影响;研究了Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,并用于BCB-卵母细胞体外培养。[结果]A、B级卵母细胞中BCB+卵母细胞的比例为64.42%,极显著高于C级卵母细胞的17.00%;BCB+卵母细胞的成熟率(86.16%)、卵裂率(85.29%)、囊胚率(34.40%)分别极显著高于BCB-卵母细胞(50.94%、36.19%和6.73%);6 h是Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,该试验组体外培养效率显著高于其他组;Milrinone对BCB-卵母细胞抑制培养6 h,极显著提高了体外胚胎发育率。[结论]为提高绵羊卵母细胞体外培养效率提供了依据。; 汪立芹王静王静金贤华陈博; 关键词：MILRINONE 绵羊卵母细胞

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