颜光涛 作品数:276 被引量:951 H指数:14 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 解放军总医院科技创新苗圃基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 农业科学 更多>>
一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒 本发明公开了属于酶联免疫检测技术领域的一种胃蛋白酶酶联免疫分析检测试剂盒。该试剂盒由固相酶标板、胃蛋白酶标准品、辣根过氧化物酶标记的胃蛋白酶抗体和辅助试剂组成。本发明的试剂盒使用时将胃蛋白酶标准品与样本中待测胃蛋白酶同时... 颜光涛 薛辉文献传递 瘦素在肝缺血/再灌注诱导的肝损伤中的作用 被引量:1 2009年 目的研究瘦素(Leptin)在肝缺血/再灌注(H-I/R)后发生的变化,以及它对H-I/R诱导的肝损伤的影响。方法建立大鼠70%H-I/R模型,设立假手术和不同再灌注时间的损伤组。采用放射免疫分析法检测损伤后各组血清、脂肪组织瘦素蛋白水平,采用酶比色法检测损伤后血清丙氨酸氨基转移酶,采用HE染色和免疫组织化学法分别检测损伤后肝的病理改变和瘦素蛋白表达,并采用RT-PCR法检测损伤后脂肪组织、肝瘦素mRNA表达。结果与损伤后假手术组相比,缺血60 min/再灌注360 min(I60’R360’)组血清瘦素显著升高,I60’R60’组脂肪组织瘦素蛋白水平显著升高,4个再灌注组血清丙氨酸氨基转移酶均显著升高。病理学观察提示H-I/R早期肝损伤较重而后期逐步减轻。与损伤后假手术组相比,I60’R60’、I60’R240’组肝瘦素蛋白表达显著升高,I60’R150’组脂肪组织瘦素mRNA表达显著降低,I60’R60’组肝瘦素mRNA表达显著升高,I60’R150’、I60’R240’和I60’R360’组肝瘦素mRNA表达均显著降低。结论瘦素在H-I/R后发生明显的表达变化,它可能作为一种保护因子对抗H-I/R诱导的肝损伤。 林季 颜光涛 薛辉 郝秀华 张凯 王录焕关键词:瘦素 再灌注损伤 脂肪组织 高灵敏orexin A放免法的建立及其对大鼠缺血再灌注的应用 被引量:4 2003年 建立高灵敏orexinA放射免疫分析方法 (RIA) ,探讨肠缺血再灌注损伤对血浆及下丘脑orexinA水平的影响。采用氯胺T法制备碘标记orexinA ,抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃温育 2 4h后 ,经PR试剂分离结合和游离的标记抗原 ,并用该方法测量正常人、高血脂患者血浆orexinA水平及大鼠肠缺血再灌注损伤后血浆及下丘脑组织中orexinA浓度的变化。结果表明 ,本方法测定orexinA标准曲线范围为 2 1 - 2 0 0 0 pg/mL ,最低检出量为 2 1 pg/mL ,批内和批间变异系数均小于 1 0 %。 30名正常人血浆orexinA水平为 338.4 8± 2 0 .2 4 pg/mL ,30例高血脂患者为 343.5 1± 1 5 .4 9pg/mL ;大鼠肠缺血再灌注损伤前后及不同损伤时间点orexinA的变化差异亦无显著性。本文提示orexinARIA方法灵敏度和特异性较高 ,可用于人血浆。 林季 颜光涛 郝秀华 张凯 王录焕 薛辉关键词:放射免疫分析 缺血再灌注损伤 不同方法制备脂质体^(125)I-IL-8包封率的比较 被引量:9 2001年 本文用四种不同的方法制备脂质体 ,同时包裹12 5I -IL - 8。对不同方法制备的脂质体包裹12 5I -IL - 8的包封率进行对比。结果表明 :机械分散法、钙融合法、反相蒸发法制备的脂质体对12 5I -IL - 8的包封率依次增大。而用反相蒸发法和钙融合法联合制备的脂质体对12 5I -IL - 石丽萍 王录焕 李英丽 颜光涛关键词:脂质体 包封率 腺苷受体2A有望成为研发抗炎症、抗损伤药物的新突破点 被引量:1 2008年 颜光涛关键词:腺苷受体 抗炎症 抗损伤 药物 受体活化 类风湿关节炎患者疾病活动期和缓解期血清瘦素水平变化的意义 被引量:2 2010年 目的了解瘦素(Leptin)在类风湿性关节炎(RA)患者血清中的变化规律。方法用DAS28评分方法判断RA病情活动性,检测96例类风湿性关节炎患者(活动期47例,缓解期49例)及40名健康对照者血清中瘦素、TNF-α、IL-1β、IL-6、RF、CRP、ESR、抗-CCP水平,分析瘦素与这些指标间的相关性。结果 RA活动期患者血清瘦素、TNF-α、IL-1β、IL-6、RF、CRP、ESR、抗-CCP水平均明显高于健康对照组和RA缓解组(P<0.01),其中女性瘦素水平又显著高于男性(P<0.05);RA缓解期组以上指标与健康对照组无统计学差异(P>0.05);RA活动期组血清瘦素与TNF-α、IL-1β、IL-6、RF、CRP、ESR、抗-CCP水平、DAS28呈显著正相关(P<0.05)。结论 RA患者血清瘦素水平与病情活动性具有密切关系,可能作为一种协同炎性因子促进RA病情的进展。 张凯 廖丽翔 邓子辉 薛辉 郝秀华 颜光涛关键词:瘦素 类风湿性关节炎 病情活动性 Leptin RIA在大鼠脓毒败血症模型中的应用 被引量:4 2007年 目的:研究脓毒败血症对外周血瘦素(Leptin)表达水平的影响,探讨Leptin在急性创伤炎症反应中的作用。方法:建立大鼠盲肠结扎穿孔模型,设立假手术组、单纯损伤组和脂肪乳、雌二醇、胰岛素组等干预能量代谢和神经-内分泌功能的实验组,每组10只,并采用自建的高灵敏大鼠Leptin R IA测量损伤后12h血清Leptin浓度的变化。结果:所用Leptin R IA标准曲线形态良好,可获得各实验组血清Leptin浓度。与伤后假手术组血清Leptin水平相比,其他四组与之无显著差异,脂肪乳组有升高的趋势,而其他三组均为降低的趋势。另外,脂肪乳组显著高于单纯损伤组和雌二醇组。结论:脓毒败血症引起内源性Leptin表达不足,早期给予能量补充有望升高Leptin表达水平,而干扰下丘脑-垂体轴功能或降低能量储备则会抑制Leptin所发挥的保护效应。 林季 颜光涛 郝秀华 王录焕 张凯 薛辉关键词:脓毒败血症 放射免疫分析 能量代谢 不同剪切力作用与不同时间点血管内皮细胞内皮素-1和一氧化氮含量变化的差异 被引量:4 2005年 目的:应用不同剪切力作用体外培养的脐静脉内皮细胞,观察其在不同时间点内皮素-1和一氧化氮含量表达的差异。方法:实验于2002-07/2004-05在解放军总医院基础医学研究所生化研究室完成。利用流室装置通过精密蠕动泵提供剪切力,以50Pa和100Pa两种剪切力作用体外培养的脐静脉内皮细胞,并分别从30,60,120,300,420min5个时间点取灌流液,对照组为没有施加剪切力的脐静脉内皮细胞。用放射免疫法和硝酸还原酶法检测50Pa和100Pa剪切力作用下及空白对照组脐静脉内皮细胞内皮素-1和一氧化氮的含量。结果:①两组剪切力作用内皮细胞,其内皮素-1的表达量在开始前120min均有升高趋势,在30,60,120min时,50Pa组和100Pa组内皮素-1含量明显高于对照组[(28.7±2.1),(37.8±3.5),(26.0±2.8)ng/L;(33.6±5.8),(43.3±7.2),(26.5±3.6)ng/L;(45.3±9.4),(53.6±8.6),(32.2±4.7)ng/L,(t=1.835~6.079,P<0.05)]。②一氧化氮含量:在30,60,120min时,50Pa组和100Pa组一氧化氮含量明显高于对照组[(37.5±5.4),(40.2±6.7),(20.7±3.0)μmol/L;(52.7±6.3),(63.7±7.2),(21.4±3.3)μmol/L;(67.8±6.9),(84.5±8.6),(23.5±4.1)μmol/L,(t=1.835~6.079,P<0.05)]。100Pa组在60,120min时明显高于50Pa组(t=2.556,3.376,P<0.05)。结论:在一定层流剪切力和时间范围内内皮细胞表达内皮素-1和一氧化氮呈递增趋势,保持相对稳定,当时间进一步延长时,其表达失去平衡,具有强烈收缩血管活性的内皮素-1相对增多,提示损伤内皮细胞的因素增加。 张晓娟 颜光涛 张凯 王录焕 薛辉关键词:内皮素-1 血管内皮细胞 一氧化氮含量 内皮细胞表达 酶法检测 灌流液 白细胞介素-1β免疫分析和临床意义 被引量:2 1999年 白细胞介素-1β(Interleukin—1β,IL-1β)是一种主要由单核巨噬细胞产生的重要细胞因子和多肽调节因子。在细胞免疫激活中发挥调节作用。IL-1β参与机体造血系统、神经、内分泌系统、机体炎症反应和某些抗肿瘤生理过程,IL—1在局部组织内持续地异常合成,可导致机体发热、炎症反应,某些疾病的病理改变。但体内IL-1β含量甚微,难以测到,给基础研究和临床应用带来困难。本研究建立了IL-1β放免分析方法。检测人血清、体液、组织脏器提取液和某些细胞培养液中IL-1β含量。对疾病的诊断、病情发展疗效观察及预后判断等临床应用和基础科研工作提供可靠手段。 陈泮藻 李英丽 颜光涛 王录焕 郝秀华关键词:白细胞介素 人血清 免疫激活 单核巨噬细胞 放免分析 乳铁蛋白酶免疫分析法的建立及乳品含量检测的初步应用 被引量:2 2009年 目的:建立乳铁蛋白(LF)酶免疫分析法,检测LF在血清及乳汁中的水平。方法:用人源的LF多次免疫兔,获得高效价的抗体。纯化后包被成固相酶标板,以识别并结合待测标本中的LF。用生物素标记抗原(Bio-Ag),同辣根酶标记亲和素(HRP-A)可特异结合。向固相酶标板中同时加入Bio-Ag和不同浓度的标准品,37℃反应1.5h。洗涤后以HRP-A为探针,经酶底物显色后可获得良好的ELISA竞争抑制曲线。结果:该法测定范围:(0.36~9.00)μg/ml,最低检出量0.25μg/ml,批内和批间误差分别为<6.3%和7.4%。用该法测正常献血员(40名)血清LF水平为(0.438±0.183)μg/ml;人初乳(5名)水平为(7.82±0.51)mg/ml。血清和初乳中的LF经65℃30min处理后活性不变,经100℃3min处理明显降解。结论:该法稳定、简便、特异适于检测人血清和乳汁中的LF水平。 薛辉 颜光涛 林季关键词:乳铁蛋白 酶联免疫分析