丁天兵
- 作品数：56 被引量：318H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金全国教育科学“十五”规划教育部重点课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 乙酰肉碱的化学合成与酶法拆分被引量：1
- 2003年
- 采用化学方法以肉碱为底物,合成了外消旋乙酰肉碱,精制后可获得纯度99%以上的乙酰肉碱,收率为96%.利用蜗牛酶(SnailEnzyme)对其进行不对称酯水解反应,发现蜗牛酶对乙酰肉碱具有高度立体选择性,并且可得到光学纯度为98%的乙酰-L-肉碱.
- 丁天兵王智翁良于大海郑良玉曹淑桂苟小军
- 关键词：化学合成酶法拆分蜗牛酶光学纯度
- 抗人μ链单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：6
- 2005年
- 目的:制备高效价的鼠源性抗人μ链单克隆抗体(mAb),并建立可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法。方法:以人IgM全分子免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合,用间接ELISA法筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗μ链mAb的杂交瘤细胞株。mAb的特性(效价、Ig亚类、特异性及相对亲和力)采用ELISA及Westernblot法鉴定。以纯化的mAb包被建立ELISA捕捉法,并用于可疑乙脑患者标本中特异性IgM抗体的检测。结果:筛选到1株可稳定分泌抗人μ链mAb的细胞株2E5。mAb腹水的ELISA效价为1×10-6,Ig亚类(型)为IgG1(κ),相对亲和力为1×10-5。Westernblot结果显示mAb2E5仅与IgM的μ链结合,Mr为75000。以辛酸硫酸铵法纯化的mAb2E5包被,建立了ELISA捕捉法,用于30份乙脑患者血清IgM的检测,敏感性及特异性良好。结论:成功地制备1株抗人μ链mAb2E5,建立了可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法。
- 杨敬丁天兵任君萍宋建华马文煜
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤ELISA
- 重视'小病案'授课法在医学微生物学教学实践中的应用
- 随着现代医学科学技术的飞速发展,医学微生物学的新病原、新技术、新方法日新月异,教学内容也在不断地增加,教学模式从古老单一的黑板加挂图向多媒体课件、声像并茂的网络课程转变.虽然多媒体教学在信息量、生动性、可视性和可重复性等...
- 宋建华丁天兵张伟
- 关键词：教学应用教学实践微生物学
- 文献传递
- 乙脑病毒全长cDNA的扩增克隆及体外转录制备感染性RNA的研究被引量：17
- 2000年
- 本研究根据已知的乙脑病毒 (JEV)SA14株基因序列设计一套引物 ,利用长模板RT PCR技术 ,一次扩增出了JEV的全长cDNA ,并采用大片段克隆技术将其克隆于载体的RNA聚合酶启动子下游。阳性克隆转录的RNA转染HBK细胞后细胞产生病变 ,经乳鼠脑内接种及特异性免疫荧光染色证明为JEV ,这一结果表明JEV感染性克隆的构建获得了成功。其次 ,合成一条含有RNA聚合酶启动子序列的 5′引物 ,利用长模板RT PCR方法扩增出带有启动子的JEV全长cDNA ,以此cDNA为模板作体外转录。转录产物转染BHK细胞后观察到了典型的JEV病变。收获的病毒经乳鼠脑内接种及免疫荧光染色证明为JEV ,从而建立了制备JEV感染性RNA的快捷方法。本研究构建的JEV感染性克隆与建立的长模板RT PCR快速制备JEV感染性RNA的方法 ,将为JEV分子生物学研究的后续工作提供有力的工具和奠定坚实的基础。
- 黄庆生马文煜姜绍谆樊英茹张富泉肖毅丁天兵
- 关键词：日本脑炎病毒全长CDNA
- 乙型脑炎病毒E蛋白N端片段在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2003年
- 利用 PCR扩增乙型脑炎病毒 E蛋白基因 5′端片段 ,克隆入原核表达载体 p ET-2 8a,转化大肠杆菌 BL2 1 ( ED3 )。经 IPTG诱导表达后 ,SDS-PAGE分析表达产物。结果表明 ,所表达的E蛋白片段的分子量约为 3 .4万 ,表达量约占菌体总蛋白的 3 5%。 JEV E蛋白片段在大肠杆菌中的成功表达 ,为制备 JE实验室诊断抗原和分析
- 柳丽娟吴玉水马文煜宋建华黄庆生任君萍丁天兵
- 关键词：乙型脑炎N端片段大肠杆菌基因表达抗原病毒性疾病
- 医学微生物学课堂教学与网络课程的比较研究被引量：9
- 2016年
- 高校网络课程的发展给传统课堂教学带来了挑战,同时也是传统课堂教学改革的重要契机。文章对这两种教学模式的优点和不足之处进行了深入分析,提出了网络课程和课堂教学进行优势互补和有效整合的几点意见,希望能够为高校医学微生物学探索出一种高效的适应时代发展的新的教学模式,从而激发学生学习兴趣,提高教学质量。
- 王媛雷迎峰黎志东杨敬寇甜甜丁天兵
- 关键词：医学微生物传统课堂教学网络课程
- 关于病原微生物毒力进化的若干思考
- 1995年
- 病原微生物的致病作用（毒力）差异很大。这些差异除了致病菌本身的原因外，还与宿主和外界环境有着极其密切的关系，并且处于不断的变化之中。作者依据现代进化理论，考察了一些传染病病原体的致病特点，认为其传播方式在某种程度上反映了其毒力的强弱，是长期适应宿主和外界环境的结果，并试图通过以上分析预测病原体毒力变异的趋势，进而制定正确的卫生保健策略，改善人类社会的行为方式，采取相应有效的医疗措施以阻止毒力向增强的方向进化，从而最终使人类自己受益。
- 丁天兵
- 关键词：病原微生物毒力进化
- 宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中的作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm1表达水平;将LSm1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24h后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析LSm1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm1与dsRNA共定位情况。结果与2h比较,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC比较,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC比较,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。结论 LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENV RNA的复制。
- 董阳超雷迎峰丁天兵时莹潘鹭翔王晓霞张泽信徐志凯
- 关键词：登革病毒宿主蛋白RNA复制
- 日本脑炎病毒受体功能缺陷细胞的筛选和鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的筛选并鉴定日本脑炎病毒(JEV)受体功能缺陷的BHK-21细胞突变株。方法用化学诱变剂ICR-191人工诱变JEV易感细胞系BHK-21,经JEV攻击,对存活细胞克隆化,RT-PCR筛选JEV RNA阴性细胞,用流式细胞术,免疫荧光和空斑实验鉴定其对JEV的敏感性。结果筛选到1株JEV RNA阴性细胞3A10-3F。流式细胞术检测3A10-3F细胞与JEV的结合率为2.10%,免疫荧光和空斑实验证实其对JEV感染有相当程度的抵抗,在JEV感染复数MOI 1时3A10-3F细胞培养上清中JEV最高滴度比BHK-21细胞中JEV最高滴度下降2个数量级。结论用化学诱变法筛选到1株JEV受体功能缺陷细胞,为进一步鉴定JEV受体,深入研究JEV致病机理提供了有益线索。
- 任君萍张伟黄庆生高淑娴宋建华丁天兵马文煜
- 关键词：病毒受体BHK-21细胞
- 中国林蛙皮cDNA文库的构建被引量：2
- 2007年
- 目的:为研究林蛙皮抗菌肽,筛选、克隆及表达相关抗菌功能基因,构建林蛙皮cDNA文库。方法:提取林蛙皮总RNA后,利用v-gene纯化试剂盒纯化mRNA,RT-PCR合成双链cDNA;取10ng/μLcDNA按照不同比例连接到λ噬菌体载体,以选择最佳连接比例。结果:获得克隆总数为1.2×105的林蛙皮cDNA文库,重组率为99.4%。结论:所建立的cDNA文库可用于进一步筛选、克隆抗菌功能新基因。
- 周杰孟庆繁丁天兵逯家辉田晓乐李青山滕利荣
- 关键词：中国林蛙CDNA文库重组率
