井上纯一郎
- 作品数:10 被引量:4H指数:1
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- 抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA及其应用。本发明所述抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA的脱氧核糖核酸序列为GAATCACTTGGCACGACACTT。本发明先设计含有抑制小鼠TRAF6基因的sh...
- 秦俊文谢琪璇秋山泰身井上纯一郎
- 可靶向激活RANK信号通路的融合蛋白及其重组质粒与应用
- 本发明公开了一种可靶向激活RANK信号通路的融合蛋白及其重组载体与应用。该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,为利用一段gyrase B序列代替小鼠RANK的C末端得到;编码该融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ...
- 秦俊文谢琪璇蔡冬青万颖黄卉卉秋山泰身井上纯一郎禹艳红齐绪峰武征
- 中枢免疫耐受缺损模型的构建被引量:1
- 2012年
- 目的构建基于shRNA介导的中枢免疫耐受缺损模型。方法分离妊娠后13.5 d的胎鼠胸腺,除去淋巴细胞,获得原代胸腺基质细胞,利用慢病毒将小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒(LV-T6-shRNA)导入原代胸腺基质细胞中,重新聚集这些胸腺基质细胞得到LV-T6-shRNA重塑胸腺,将此重塑胸腺移植入无胸腺的雌性小鼠肾脏荚膜下,饲养8周。结果慢病毒可有效转导LV-T6-shRNA慢病毒质粒入原代胸腺髓质上皮细胞中;移植LV-T6-shRNA重塑胸腺的小鼠饲养8周后,胸腺明显较小,成熟的胸腺髓质上皮细胞减少,脾脏肿大,脾脏中活化的T淋巴细胞增多,肺脏中出现淋巴细胞浸润等现象,这些表现型与TRAF6-/-小鼠的表现型相似。结论中枢免疫耐受缺损模型构建成功。
- 谢琪璇叶绍恩蒋启荣秋山泰身井上纯一郎秦俊文
- 关键词:TRAF6慢病毒SHRNA
- 人工中枢免疫耐受缺损模型的构建
- 研究背景:中枢免疫耐受对于免疫系统识别自身和非自身,从而清除外来异物,维持对自身成分的不反应性是必不可少的。研究表明,NF-κB信号传导通路对于胸腺髓质微细构造的形成和维持特别是诱导胸腺髓质上皮细胞的分化和成熟,进而控制...
- 秦俊文谢琪璇秋山泰身井上纯一郎黄卉卉董少男万颖张坤
- 关键词:TRAF6慢病毒SHRNA
- shRNA慢病毒质粒的构建技巧被引量:3
- 2011年
- 携带shRNA慢病毒质粒的慢病毒宿主范围广,能感染分裂期与非分裂期细胞,转染效率高,shRNA在宿主细胞中能高效、长期稳定地表达,因此shRNA慢病毒载体正被越来越广泛地应用于RNAi研究和疾病治疗中。
- 秦俊文谢琪璇蔡冬青秋山泰身井上纯一郎
- 关键词:SHRNA慢病毒载体宿主细胞宿主范围转染效率RNAI
- 抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA及其应用。本发明所述抑制小鼠TRAF6基因表达的shRNA的脱氧核糖核酸序列为GAATCACTTGGCACGACACTT。本发明先设计含有抑制小鼠TRAF6基因的sh...
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- 文献传递
- 小鼠TRAF6特异性shRNA慢病毒质粒的构建及活性
- 2011年
- 目的:构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。方法:设计、合成小鼠TRAF6基因特异性shRNA核苷酸,将其链接入pENTR/U6载体,基因测序;通过LR克隆酶将pENTR/U6中的TRAF6特异性shRNA核苷酸插入CS-RfA-EG慢病毒载体,KpnⅠ限制酶切分析;通过慢病毒将TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒导入MEF13细胞中,FACS分析质粒导入率,同时利用Western blot技术检测MEF13细胞中TRAF6的表达以及磷酸化IκBα的表达。以LacZ基因特异性shRNA慢病毒质粒为对照。结果:构建的小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒与设计相符;MEF13细胞中慢病毒质粒的导入率为95%以上;与对照组比较,TRAF6基因特异性shRNA可长期、完全抑制MEF13细胞中TRAF6的表达及TRAF6介导的IκBα的磷酸化。结论:成功构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。
- 谢琪璇罗峰秋山泰身井上纯一郎秦俊文
- 关键词:TRAF6SHRNARNAI
- 可靶向激活RANK信号通路的融合蛋白及其重组质粒与应用
- 本发明公开了一种可靶向激活RANK信号通路的融合蛋白及其重组载体与应用。该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,为利用一段gyrase B序列代替小鼠RANK的C末端得到;编码该融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ...
- 秦俊文谢琪璇蔡冬青万颖黄卉卉秋山泰身井上纯一郎禹艳红齐绪峰武征
- 文献传递
- 人工胸腺、人工中枢免疫耐受缺损模型及制备方法与应用
- 本发明公开一种人工胸腺、人工中枢免疫耐受缺损模型及其制备方法与应用。本发明将除去淋巴细胞的胎鼠胸腺细胞分散成单个细胞,利用慢病毒将控制中枢免疫耐受的基因特异性shRNA质粒导入胸腺细胞,再将这些胸腺细胞重新构建成人工胸腺...
- 秦俊文谢琪璇黄军马清河秋山泰身井上纯一郎
- 文献传递
- 可靶向激活TRAF6信号通路的融合蛋白及其重组载体与应用
- 本发明公开了一种可靶向激活TRAF6信号通路的融合蛋白及其重组载体与应用。该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,为利用一段gyrase B序列代替小鼠TRAF6的C末端得到;编码该融合蛋白的核苷酸序列如SE...
- 秦俊文谢琪璇蔡冬青秋山泰身井上纯一郎禹艳红齐绪峰武征
- 文献传递