代敏
- 作品数:22 被引量:91H指数:5
- 供职机构:四川农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学经济管理更多>>
- PCR和核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究被引量:19
- 2005年
- 对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光生物素对PCR产物进行标记,制备核酸探针,采用菌落原位杂交的方法对沙门氏菌进行检测,结果表明13株阳性、3株阴性,杂交结果与PCR结果阳性符合率为93.75%,具有较高的特异性。通过条件的优化,建立的四环素耐药基因tetC的PCR和核酸探针检测技术,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。
- 代敏王红宁吴琦
- 关键词:TETC耐药基因核酸探针PCR流行病学监测PCR产物
- 猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析
- 四环素类抗生素作为一类广谱抗生素,现已产生严重的耐药性。作为人兽共患病原菌的沙门氏菌,也存在大量这样的耐药菌株,使得本病的发病率和死亡率都不断上升.本研究对规模化猪场分离的经动物试验和生化试验鉴定的致病性沙门氏菌16株、...
- 代敏王红宁吴琦李春于新芬
- 关键词:沙门氏菌PCR
- 文献传递
- PCR技术检测猪源沙门氏菌链霉素、卡那霉素耐药基因(aadA、aadB)的研究
- 氨基糖甙类作为一种广谱抗生素,在临床上常用来治疗G菌感染,由于链霉素、卡那霉素等氨基糖甙类抗生素的长期在临床上的应用,病原菌对链霉素、卡那霉素产生了广泛的耐药性,在沙门氏菌中,主要是由3-O腺苷酸转移酶对链霉素进行钝化灭...
- 张之文王红宁代敏李春
- 文献传递
- 新农人社会资本对创业质量的影响研究--知识基础的调节作用
- 代敏
- 禽传染性支气管炎病毒S_1基因玉米表达载体的构建被引量:7
- 2003年
- 禽传染性支气管炎病毒主要编码3种结构蛋白,其中S蛋白的S1蛋白是宿主的主要保护性抗原,能诱导机体产生中和抗体和血凝抑制抗体,并与病毒的组织嗜有关。本研究选取具有代表性的禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB14和SAIB4,以其S1基因克隆质粒pUCSAIB14和pUCSAIB4为模板,用具有高保真度的pfu酶分别扩增,得到含先导序列的S1基因片段。把扩增产物分别通过ClaI和BamHI酶切纯化,替换中间载体pUGFPocs的GFPm1基因,构建中间表达载体pUSAIB14和pUSAIB4。用KpnI和HindIII双酶切重组质粒pUSAIB14和pUSAIB4,回收Ubi-S1-Tocs片段,定向插入到pCAMBIA1300载体的多克隆位点。经酶切和PCR鉴定,证明获得了S1基因的玉米表达载体pCUSAIB14和pCUSAIB4。外源基因导入受体植物能否有效表达,表达载体构建是关键因素,构建时选用表达载体的类型、启动子和终止子、目的基因插入位点等都有影响。本研究用BamHI和ClaI双酶切载体pUGFPocs,用S1基因扩增片段替换GFPm1基因,将S1基因置于Ubi启动子和T-ocs终止子的控制之下,有助于S1蛋白的高效表达,最后将Ubi-S1-Tocs单元HindIII和KpnI双酶切下来,插入到pCAMBIA1300的多克隆位点,得到可用于农杆菌介导的转化或直接转化的植物表达载体pCUSAIB4和pCUSAIB14。Ubi启动子来自玉米,属组成型启动子,?
- 李春王红宁周生代敏杨帆
- 关键词:禽类传染性支气管炎病毒S1基因玉米基因构建
- PCR技术检测沙门氏菌链霉素、卡那霉素耐药基因(aadA、aadB)的研究
- 本研究以不同规模化猪场分离的16株猪源致病性沙门氏菌为材料,根据GenBank中注册的沙门氏菌aadA(3'-O腺苷酸转移酶,编码链霉素耐药)和aadB(2'-0腺苷酸转移酶,编码卡那霉素耐药)的基因序列,分别设计aad...
- 张之文王红宁代敏李春
- 关键词:沙门氏菌链霉素卡那霉素耐药基因广谱抗生素
- 文献传递
- 猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析被引量:2
- 2003年
- 四环素类抗生素作为一类广谱抗生素,现已产生严重的耐药性。作为人兽共患病原菌的沙门氏菌,也存在大量这样的耐药菌株,使得本病的发病率和死亡率都不断上升。本研究对规模化猪场分离的经动物试验和生化试验鉴定的致病性沙门氏菌16株、药敏质控菌ATCC25922和沙门氏菌标准株C79-13对进行了四环素、金霉素、土霉素的药敏试验,结果表明:16株致病性沙门氏菌对四环素类抗生素表现出普遍耐受性,耐药率达100%。其中MIC值>128μg/mL的高耐药菌株13株,高耐药率81.25%;MIC值为32μg/mL的低耐药菌株3株,低耐药率18.75%。设计沙门氏菌四环素抗性基因tetC的引物,对16株致病性沙门氏菌的tetC基因做PCR扩增,结果12株菌获得以质粒为模板长约400bp的特异性扩增产物,未能从染色体扩增到产物。分别对临床分离的1株低耐药菌株(DY1)和1株高耐药菌株(SL1-3)的tetC基因扩增产物进行序列分析,结果表明:菌株DY1和SL1-3的tetC的核苷酸同源率为97.7%;菌株DY1与质粒pBR322中tetC的核苷酸同源率为98.7%;菌株SL1-3与质粒pBR322中tetC的核苷酸同源率为98.4%,说明对于耐药程度和地方来源各不相同的菌株,在核苷酸序列上同源率很高。本文用PCR技术对规模化猪场分离的致病性沙门氏菌的四环素耐药基因进行了研究。
- 代敏王红宁吴琦李春于新芬
- 关键词:耐药基因TETCPCR扩增广谱抗生素规模化猪场
- 禽传染性支气管炎病毒S1基因玉米表达载体的构建
- 禽传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)是冠状病毒科冠状病毒属的代表种之一,可感染所有日龄的鸡,主要侵害呼吸系统和泌尿生殖系统,部分毒株还可引起消化道组织和腺胃的损伤等,导致...
- 李春王红宁周生代敏杨帆
- 文献传递
- 仔猪腹泻的病因及综合防治进展被引量:52
- 2002年
- 在规模化养猪生产中 ,仔猪腹泻十分普遍 ,导致仔猪成活率下降、生长发育受阻、饲料报酬率降低 ,严重威胁着养猪业的健康发展。引起仔猪腹泻的病因十分复杂 ,主要包括病毒、细菌、日粮抗原过敏、营养因子缺乏、断奶应激等。
- 王红宁代敏吴祥辉张之文李春柳萍
- 关键词:仔猪腹泻病因
- 成年似鲇高原鳅外周血细胞及血细胞发生的观察被引量:1
- 2018年
- 通过对成年似鲇高原鳅(Triplophysa siluroides)外周血细胞涂片及中肾、肝脏和脾脏组织的印片进行瑞氏(Wright’s)、过碘酸雪夫氏(PAS)和苏丹黑B(SBB)染色,观察各类血细胞形态、大小、分布及细胞化学特征。结果表明:似鲇高原鳅血细胞可分为红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞,各类血细胞的发生(除血栓细胞)均可分为原始、幼稚和成熟三个阶段。外周血中红细胞比例最多,为97.56%,白细胞中血栓细胞数量最多占52.86%,居白细胞的首位;三种粒细胞中嗜中性粒细胞数量最多占30.25%。粒细胞的主要发生场所在中肾占45.18%,红细胞的主要发生场所在脾脏,占71.62%,肝脏中未见原始血细胞。在中肾中同时可见嗜酸性、嗜碱性和嗜中性三种粒细胞的发生。各阶段的白细胞PAS染色均显示阳性,但只有各阶段的粒细胞SBB染色显示阳性。
- 赵柳兰代敏杨淞吴应斌汤巨平杨世勇杜宗君
- 关键词:外周血细胞造血组织细胞化学