刘传暄
- 作品数：59 被引量：212H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 产生霍乱毒素B亚单位的工程菌在LB培养基中的振荡培养被引量：1
- 1992年
- 表达霍乱毒素B亚单位的工程菌MM2菌株在LB培养基中能高效合成B亚单位。观察了在培养过程中吸光度、pH及B亚单位产生的动态变化。3L摇瓶振荡培养,B亚单位产量可达16μg/ml。
- 于秀琴马清钧刘传暄
- 关键词：霍乱毒素发酵培养
- rBS-WC(0139)霍乱疫苗的小鼠免疫试验被引量：2
- 1997年
- ｒＢＳ┐ＷＣ（０１３９）霍乱疫苗的小鼠免疫试验＊刘传暄张艳红马清钧军事医学科学院生物工程研究所北京１００８５０１９９２年起在印度和孟加拉国相继发生的０１３９霍乱，目前已迅速传播到其周边国家，对我国亦已构成严重威胁。当前全世界霍乱预防工作更加复杂，除了...
- 刘传暄张艳红马清钧
- 关键词：霍乱菌苗免疫学
- CT－B信号肽基因的化学合成及克隆
- 1994年
- 利用固相化学合成的方法合成了霍乱毒素Ｂ亚单位信号肽基因，并将该基因插入到ｐＢＲ３２２载体上，构建成一个可在不同相位插入异源基因的分泌表达载体。经菌落原位杂交和酶切等方法筛选出正确的克隆，为进一步研究异源表达蛋白的分泌提供了条件。
- 施维马清钧刘传暄张京生
- 关键词：信号肽化学合成克隆
- 泛素-蛋白酶体降解途径在细胞周期调控中的作用被引量：8
- 2004年
- 细胞周期的进程由一系列细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和CDK活性调节因子驱动。泛素-蛋白酶体对细胞周期调节因子的降解是细胞调控分裂进程的重要手段。CDK活性抑制因子的降解是细胞分裂所必需的,而细胞周期正调控因子的降解则对维持细胞稳态至关重要。本文从参与调控的2类泛素连接酶SCF复合物、APC/C复合物的结构和功能的角度阐述了泛素-蛋白酶体降解途径在整个细胞周期调控中的作用和意义。
- 刘萱曹诚刘传暄
- 关键词：泛素-蛋白酶体降解细胞周期
- phoA基因的克隆和一种原核分泌表达筛选载体的构建被引量：2
- 1999年
- 张用书赵志虎于秀琴刘传暄马清钧
- 关键词：PHOA分泌表达
- SARS冠状病毒核壳蛋白对蛋白翻译的影响
- 2007年
- 目的:研究SARS冠状病毒核壳蛋白(N蛋白)对蛋白翻译的影响。方法:构建N蛋白表达载体FLAG-pcDNA3-N,分别与FLAG-pcDNA3和表达荧光素酶的质粒共转染293T人胚肾细胞,通过检测荧光素酶的活性来判断N蛋白对细胞内蛋白翻译的影响;在体外翻译体系中检测N蛋白对体外翻译的影响。结果:构建了载体FLAG-pcDNA3-N,在293T人胚肾细胞内表达后,荧光素酶活性被抑制;在体外翻译体系中加入N蛋白,体外翻译被抑制。结论:SARS冠状病毒N蛋白抑制蛋白翻译。
- 周冰曹诚刘传暄
- 关键词：SARS冠状病毒核壳蛋白荧光素酶
- 用辐射免疫扩散法定量检测工程菌产霍乱毒素B亚单位产量
- 1989年
- 单向琼脂免疫扩散法或辐射免疫扩散法（radial immunodiffusion,即RD法）是目前定量检测抗原的良好方法之一,已被广泛应用.Finkelstein等用此法检测霍乱毒素或其B亚单位,最小检出量为4×10-8g.目前遗传工程下游工作中急需简易定量检测方法,以便监视生产过程及进行产品质量管理.我们采用优质琼脂糖结合考马斯亮蓝染色、在放大机下读取着色沉淀环的方法,建立了改良RD法.在改良法试验中,浓度在0.78～50μg/ml的CT-B与沉淀环直径有良好正相关关系（r=0.99）,最小检出量为7.8ng.
- 刘传暄马清均
- 关键词：霍乱毒素免疫扩散法工程菌琼脂免疫扩散考马斯亮蓝染色
- 核孔复合物的结构、组装及功能被引量：1
- 2005年
- 核孔复合物(NPC)是一个巨型分子复合物,相对分子质量约125×106。脊椎动物的NPC由大约30种蛋白质组成,这些蛋白质的序列大多具有FG(苯丙氨酸-甘氨酸)重复序列。NPC锚定于双层核膜上,并且是物质跨核膜运输的惟一通道,它可快速介导小分子物质的被动运输以及大分子物质的主动运输过程。虽然NPC具有较大的相对分子质量和复杂的结构,但它可在细胞分裂过程中分离并重新组装。生物大分子经NPC的跨核膜运输直接影响真核细胞的生长、增殖、分化、发育等多种生命活动。本文重点介绍NPC的结构、组装及其功能特点。
- 黄维曹诚刘传暄
- 径向离子交换色谱分离纯化分泌表达的重组霍乱毒素B亚单位被引量：1
- 1998年
- 离子交换色谱作为常用的制备色谱技术，已广泛应用于生物工程产品的分离纯化。但传统的色谱技术处理量小、流速低，柱体设计对大规模纯化实用性差，不利于工业化生产。近年来发展的径向色谱柱，具有容量和负荷量大、操作方便、可原位再生并可高压消毒的特点，同时由于柱体...
- 刘传暄张艳红马清钧
- 关键词：离子交换色谱径向
- 纯化重组霍乱毒素B亚单位与天然霍乱毒素B亚单位性质的对比研究被引量：3
- 1999年
- 霍乱毒素Ｂ亚单位（ＢＳ）已用于新型口服霍乱疫苗、佐剂及蛋白质载体，但成本高，来源困难．用重组霍乱毒素Ｂ亚单位（ｒＢＳ）代替ＢＳ可克服上述缺点．ｒＢＳ用于上述目的前必须证实其在物理、化学及免疫学性质方面与天然同类产品的一致性．用亲和层析法从各批次大罐发酵所获工程菌Ｅ．ｃｏｌｉＭＭ２（ｐＭＭ－ＣＴＢ）培养物上清中制备得到了小批量ｒＢＳ纯品，在同等条件下与ＢＳ（Ｓｉｇ－ｍａ公司产品）进行理化、免疫学性质的对比研究，证实二者在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中电泳带位置一致、分子量相同，纯度达９９％；在反相ＨＰＬＣ中出峰行为一致，纯度达１００％；在半干式聚焦电泳分析中电泳带分布相同，等电点为７．９１．ｒＢＳＮ端起的２０个氨基酸序列为ＴＰＱＮＩＴＤＬＣＡＥＹＨＮＴＱＩＨＴＬ，与克隆基因来源株的毒素Ｂ亚单位同一段序列完全一致．氨基酸组成分析证实ｒＢＳ与ＢＳ相近．在免疫学性质分析中，ｒＢＳ与ＢＳ在免疫双扩散试验中与抗ＣＴ均出一条沉淀线且相互吻合；在免疫电泳试验中二者与抗ＣＴ在相应位置上产生一条沉淀弧；二者均能与神经节苷脂ＧＭ１结合且这种结合均可通过二者与抗ＣＴ的预保温处理而被阻断．对比研究结果揭示ｒＢＳ与ＢＳ性质完全一致，可代替ＢＳ用于?
- 刘传暄马清钧张艳红施维熊凌霜
- 关键词：亚单位
