刘沫言
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 抗Tim-3单抗通过调控单核／巨噬细胞功能减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤被引量：1
- 2018年
- 目的观察Tim-3对小鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响，并探讨单核/巨噬细胞在此过程中的作用。方法取72只C57BL/6小鼠，采用随机数字表法将小鼠分为四组，每组18只。（1）IR＋Tim-3 mAb组（实验组）：每只小鼠腹腔注射抗Tim-3 mAb 200 μg，并于1 d后建立小鼠肾脏IR模型；（2）IR＋IgG单抗组（阴性对照组）：每只小鼠腹腔注射抗IgG mAb 200 μg，并于1 d后建立小鼠肾脏IR模型；（3）IR组：仅建立小鼠肾脏IR模型；（4）对照组：不建立小鼠肾脏IR模型。分别于IR后6、24和48 h时，取每组6只小鼠的内眦静脉血，采用酶促动力学法检测血清肌酐水平；然后处死小鼠，收集各组小鼠肾组织标本，观察肾组织病理学改变并评分，采用免疫组织化学法检测肾组织Tim-3、F4/80表达，采用原位末端标记法（TUNEL）进行检测肾组织细胞凋亡，采用流式细胞术检测外周血单核细胞Tim-3蛋白的表达，采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白。结果IR组肾组织和单核细胞中Tim-3表达较对照组明显增多（P〈0.05）；而实验组Tim-3表达量较IR组明显下调（P〈0.05）。对照组小鼠肾组织结构基本正常，其余三组小鼠肾组织损伤明显加重，且血清肌酐水平明显升高（P〈0.05），而实验组血清肌酐水平较IR明显下降（P〈0.05）。对照组小鼠肾组织凋亡指数较低；与对照组相比，其他三组肾组织凋亡指数明显升高（P〈0.05），而实验组肾组织凋亡指数较IR组明显下降（P〈0.05），凋亡相关蛋白的表达有同样的变化。对照组肾小管间质有少量F4/80＋阳性巨噬细胞浸润；其他三组较对照组巨噬细胞表达明显增多，且主要分布于肾小管间质；实验组F4/80＋表达较IR组明显减少。并且F4/80＋与Tim-3表达部位一致。IR组肾组织肿瘤坏死因子-α（TNF-a）、白细胞介素18（IL-18）、CXCL-1、CXCL-2表达较对照组明显升高（P
- 郭云珊丁尧海张颖玮姜晓宇李宏栋李震刘沫言刘毅
- 关键词：TIM-3缺血再灌注
- 罗格列酮对多囊肾囊肿衬里上皮细胞中β-catenin表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:分析多囊肾组织和正常肾组织中β-catenin表达分布差异,并观察罗格列酮对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9～12)中β-catenin蛋白水平的干预作用。方法:免疫组织化学方法检测人多囊肾组织及多囊肾动物模型PKDV/V小鼠肾组织与其相应正常肾组织中β-catenin表达分布差异;MTT法检测不同浓度罗格列酮对WT9～12增殖抑制情况;RT-PCR技术检测罗格列酮干预后β-catenin mRNA水平;Western blot技术检测β-catenin的表达。结果:正常肾小管上皮细胞β-catenin主要在胞膜分布,胞核及胞浆少见;囊肿衬里上皮细胞中β-catenin蛋白表达水平明显增加,且存在核转位;PKDV/V小鼠囊肿衬里上皮细胞胞核β-catenin呈强阳性分布。罗格列酮对WT9～12有增殖抑制作用,其作用72h后,对β-catenin mRNA水平无影响,但可明显下调β-catenin蛋白水平,且加入PPAR-γ阻断剂后不能阻断罗格列酮的下调作用。结论:多囊肾组织中存在Wnt/β-catenin通路异常,罗格列酮可抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖,其作用机制可能与下调β-catenin表达从而抑制Wnt/β-catenin通路有关,并且这种下调作用通过非PPAR-γ依赖性途径实现。
- 刘沫言刘春艳付莉莉王清佾梅长林
- 关键词：罗格列酮WNT/Β-CATENINPPAR-Γ多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖
- Tim-3调控巨噬细胞TLR4/NLRC4信号通路促进缺血再灌注肾损伤
- 探讨Tim-3通过调控巨噬细胞调节缺血再灌注肾损伤的作用及其机制.Tim3促进缺血再灌注肾损伤，这一作用通过调控巨噬细胞TLR4/NLRC4信号通路实现。
- 郭云珊丁尧海张颖玮姜晓宇李宏栋李震刘沫言
- 关键词：缺血再灌注肾损伤巨噬细胞信号通路
- Wnt信号通路在肾病发病中的作用被引量：2
- 2009年
- Wnt信号通路早先发现时被认为其主要与细胞增殖旺盛的胚胎发育和肿瘤发生相关。目前研究发现，在肾脏发育及急性肾小管损伤中，Wnt信号通路发挥了积极的促进其发育和修复损伤的作用；但却又是多囊肾病及肾癌的关键发病机制之一。由此表明，肾脏的发育、形态以及功能的维持均有赖于Wnt信号通路正常“开启”和及时“关闭”。本文就近年来Wnt信号通路在肾脏疾病发生、发展中的作用作一综述。
- 刘沫言梅长林
- 关键词：WNT信号通路多囊肾病急性肾小管损伤肾脏发育肿瘤发生
- 新型过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞Wnt-β连环素信号通路的影响
- 2012年
- 目的观察新型过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）激动剂DH9对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞（WT9—12）中Wnt-β连环素（catenin）信号通路的影响。方法予以不同浓度的DH9作用WT9—12细胞72h，MTF法检测细胞增殖情况；RT—PCR技术检测DH9干预后β—cateninmRNA水平。予GSK3β抑制剂（SB216763）或PPARγ抑制剂GW9662预处理WT9-12细胞后，再予以60μmol／LDH9或单给DH9干预，Western印迹分别分析β—catenin、磷酸化β-catenin、GSK3β、磷酸化GSK3β蛋白水平。结果DH9对WT9—12细胞增殖有抑制作用，60μmol／LDH9干预72h对细胞的增殖抑制达50％，并随着干预时间延长，抑制率增高。60μmol／LDH9可下调p—catenin的蛋白表达（P〈0．01），上调磷酸化β-catenin的蛋白表达（P〈0．01），具有剂量依赖性。而DH9对Bcatenin的mRNA水平无明显改变。DH9可上调磷酸化GSK3β的蛋白表达（P〈0．01），但对GSK3β的表达无明显影响。在SB216763预处理WT9—12细胞与DH9共处理72h后，发现可逆转DH9对β—catenin的下调作用（P〈0．01），但GW9662对DH9下调β—catenin的作用无明显改变。结论DH9抑制WT9—12细胞的增殖具有时间和剂量依赖性，并且这种增殖抑制作用可通过GSK313依赖的方式下调β—catenin的蛋白表达从而抑制Wnt-β-catenin信号通路实现，与PPARγ途径无关。
- 付莉莉刘沫言刘春艳胡惠民梅长林
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体细胞增殖多囊肾囊肿衬里上皮细胞
- 一种新型嘧啶基取代芳基苯酸衍生物对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖抑制的实验研究
- 2012年
- 目的:观察新型PPARγ激动剂DH9对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响。方法:予以不同浓度的DH9及罗格列酮作用WT9-12细胞24、48、72、96 h,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术观察细胞周期的改变;AnnexinV+PI双染色流式细胞术测定细胞凋亡率;Western blotting分析cyclinA、P21CIP/WAF1、Bax和Bcl-2的表达。结果:DH9抑制细胞增殖作用明显优于罗格列酮(P<0.05),并呈量-效和时-效关系。比较加入PPAR-γ抑制剂GW9662前后细胞增殖抑制作用差异无统计学意义(P>0.05)。DH9可增加P21CIP/WAF1蛋白合成,减少CyclinA蛋白合成,使细胞阻滞在S期。DH9作用72 h后Bcl-2/Bax的比值分别为较对照组(2.19±0.08)显著减少(P<0.05),具有促进细胞凋亡的作用。结论:DH9抑制WT9-12细胞增殖活性明显优于罗格列酮,且这种增殖抑制作用与DH9作用在细胞周期的不同调节点,促进WT9-12细胞凋亡有关。
- 刘沫言付莉莉刘春艳王雪琦高翔胡惠民梅长林
- 关键词：多囊肾囊肿衬里上皮细胞细胞周期
