周乔丹
- 作品数：12 被引量：15H指数：2
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- α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化的变化
- 2011年
- 目的分析α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化谱的变化。方法分别提取α粒子诱发永生化人支气管上皮恶性转化细胞BERP35T4和对照细胞BEP2D的基因组DNA，用非甲基化敏感酶MseI对基因组DNA进行酶切，然后在酶解后的片段两端连接上连接臂，再用甲基化敏感内切酶进行消化，最终消化产物进行PCR扩增和荧光标记，最后与甲基化芯片进行杂交。杂交结果进行扫描，并对芯片图像进行分析，对芯片上的数据进行归一化处理，最后以差异倍数为1．5的标准来确定差异表达基因。结果α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化后，有16个基因发生了甲基化的改变，其中，甲基化上调基因有9个，下调基因7个。鞘氨酸激酶SKIP，蛋白质磷酸酶PPP3CC，蛋白激酶MAP2K6，杀伤细胞免疫球蛋白受体KIR2DLl、KIR2DL4、KIR3DPI，锌指蛋白ZNF493、ZNFl00，转录因子NKX2—5、TFAP2D、DR1，钾离子通道KCNJl6，肉瘤抗原CCDCl8，以及甘油甲酸酯结合蛋白FNBPlL、同源异形蛋白IRX4、HSF蛋白片段EPB41L3、TCPl0蛋白等都发生了甲基化改变。结论证实了电离辐射能够通过改变细胞的表观遗传修饰而在肿瘤发生中发挥一定的作用。
- 胡迎春陈忠民周乔丹宋博强李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：Α粒子恶性转化BEP2D细胞
- α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化的变化
- 目的：应用甲基化芯片技术,分析α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化谱的变化.方法：选用北京博奥生物有限公司的晶芯⑧人DNA甲基化谱检测cDNA芯片,分别提取α粒子诱发永生化人支气管上皮恶性转化细...
- 胡迎春周乔丹张博杨柳宋博强李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：Α粒子恶性转化BEP2D细胞
- 基因芯片技术分析siRNA抑制多效生长因子表达后Pten-/-MEF241细胞基因表达谱的变化
- 目的:应用基因芯片技术,分析 siRNA 抑制 Pleiotrophin 基因表达后,PtenMEF241 细胞(PtenMEF241细胞由本室自建,该细胞为永生化 Pten小鼠胚胎成纤维细胞经体外条件敲除 Pten 基...
- 胡迎春周乔丹张博杨柳宋博强李刚吴德昌霍艳英
- 文献传递
- Schlafen2基因在细胞中的表达及其生物学特性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:建立Schlafen2(Slfn2)基因稳定表达的细胞系以进一步研究其生物学功能。方法:构建pEGFP-Slfn2真核表达载体;瞬时转染pEGFP-Slfn2载体及其对照载体于NIH/3T3细胞,观察细胞中Slfn2基因的表达及分布;稳定转染pEGFP-Slfn2及其对照空载体于NIH/3T3细胞,G418筛选获得抵制的细胞株,用Northern印迹进一步鉴定Slfn2在各细胞株中的表达情况;利用细胞生长曲线和Transwell细胞侵袭实验检测Slfn2对细胞增殖及迁移能力的影响。结果:本研究获得了稳定表达Slfn2的细胞株,该基因表达的蛋白在细胞核及细胞浆均有分布;稳定表达该基因的细胞株的增殖及迁移能力均显著降低。结论:Slfn2基因可能是一个潜在的肿瘤抑制基因。
- 刘梦伊周乔丹胡迎春方玲于雷张煦刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词：细胞增殖迁移转染基因表达
- α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化的变化
- 目的:应用甲基化芯片技术,分析α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化谱的变化。方法:选用北京博奥生物有限公司的晶芯(?)人DNA甲基化谱检测cDNA芯片,分别提取α粒子诱发永生化人支气管上皮恶性转...
- 胡迎春周乔丹张博杨柳宋博强李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：Α粒子恶性转化BEP2D细胞
- 文献传递
- PTEN对抗氧化蛋白调控机制及效应研究
- 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（phosphatase and tensinhomology deleted on chromosome ten，PTEN），是第一个被发现具有磷酸酶功能的抑癌基因，在多种肿瘤中...
- 周乔丹
- 关键词：PTENPI3K/AKT活性氧蛋白表达
- 文献传递
- 基因芯片技术分析siRNA抑制多效生长因子表达后Pten^(-/-)MEF241细胞基因表达谱的变化被引量：2
- 2007年
- 目的:应用基因芯片技术,分析siRNA抑制Pleiotrophin基因表达后,Pten-/-MEF241细胞基因表达谱的变化。方法:选用Agilent公司的小鼠oligo芯片,分别提取siRNA抑制Pleiotrophin基因表达前后Pten-/-MEF241细胞的RNA,反转成cDNA,进一步荧光标记后进行芯片杂交,杂交结果经扫描及软件分析,最后Ration值为cy3/cy5(即实验组/对照组)。差异基因筛选标准为正标Ratio(Cy3/Cy5)≥2同时反标Ratio(Cy3/Cy5)≤0.5。部分上调及下调基因的表达水平用RT-PCR及Northern杂交进行了验证。结果:siRNA介导Pleiotrophin基因沉默后,表达上调2倍以上的基因有240个,下调0.5倍以上的基因有129个。其中,上调10倍以上的基因有与DDK综合征相关的Schlafen家族成员Slfn2、3、4,基质蛋白金属酶Mmp3、10、13,白介素IL-1a、IL-f6等;下调5倍以上的基因有钙结合蛋白S100a8、视黄醇结合蛋白Rbp4、二肽酶Dpep1等。RT-PCR及Northern杂交验证结果与芯片结果吻合。结论:应用基因表达谱芯片成功分析了RNAi抑制Pleiotrophin基因表达后Pten-/-MEF241细胞基因表达谱的变化,挑选并鉴定出一批有意义的基因,为后续的深入研究提供了基础。
- 胡迎春周乔丹张博杨柳宋博强李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：寡核苷酸序列分析基因表达逆转录聚合酶链反应
- PTEN再表达对细胞内抗氧化蛋白表达和DNA氧化损伤的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源体(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)再表达对细胞内抗氧化蛋白Prdx1,2,5,6和Cu/Zn SOD的表达、活性氧(ROS)和DNA氧化损伤水平及细胞抗氧化能力的影响。方法采用Western blot法比较Pten-/-MEFs细胞(对照细胞)与PTEN再表达的Pten-/-MEFs细胞内抗氧化蛋白Prdx1,2,5,6和Cu/Zn SOD的表达差异;采用化学/荧光发光法分析对照细胞与PTEN再表达细胞内基础ROS水平差异;采用中性单细胞凝胶电泳比较不同浓度(0、0.01、0.05、0.10mmol/L)H2O2处理后,对照细胞与PTEN再表达细胞内DNA双链断裂(DSBs)的变化。结果与对照细胞相比,PTEN再表达细胞中Prdx1,2,5,6和Cu/Zn SOD蛋白的表达水平增高,细胞内基础ROS水平降低,DSBs减少,细胞抵抗外源性H2O2的能力增强。结论 PTEN可能通过对Prdx1,2,5,6和Cu/Zn SOD等抗氧化蛋白的表达调控,增强细胞抗氧化能力,清除细胞内过量的ROS,从而保护细胞免受氧化压力导致的DNA氧化损伤,维持基因组稳定性。
- 周乔丹米粲胡迎春李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：再表达活性氧DNA氧化损伤
- 白细胞介素-1通过JNK信号通路调控Schlafen2基因的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:在多效生长因子(Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素-1(IL-1)调控Schlafen2(Slfn2)基因表达的机制。方法:应用Northernblot检测Ptn沉默细胞Ptn-siRNAB/MEF241处于不同生长密度时Slfn2基因的表达变化,以确定Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达是否受到某种分泌性细胞因子的调控;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞,通过Northern blot检测细胞内Slfn2表达的抑制情况;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞不同时间,通过Western blot检测细胞中JNK磷酸化水平;Northern blot检测SP600125(JNK/MAPK通路抑制剂)对Ptn沉默细胞中Slfn2基因表达的影响。结果:Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达水平同细胞密度相关;用中和抗体和受体拮抗剂阻断IL-1通路,Slfn2表达受到显著抑制;IL-1受到抑制会影响JNK通路的活化;阻断JNK通路,Slfn2的表达受到显著抑制。结论:IL-1可以通过JNK通路诱导Slfn2的表达。
- 胡迎春方玲周乔丹陈忠民李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：多效生长因子白细胞介素-1JNK通路基因表达
- 多效生长因子对Schlafen3和Schlafen4基因表达的负调控作用
- 2010年
- 目的研究多效生长因子(Pleiotrophin,PTN)对Schlafen3(Slfn3)和Schlafen4(Slfn4)基因表达的负调控作用。方法采用RT-PCR和Northern blot法检测对照细胞(表达Ptn的Pten-/-小鼠胚胎成纤维细胞)与Ptn-/-细胞(Ptn表达沉默的Pten-/-小鼠胚胎成纤维细胞)中Slfn3/Slfn4基因的表达;分析人脑胶质瘤U87MG细胞和人乳腺癌MDA-MB-231细胞中Ptn与Slfn3/Slfn4基因表达水平的关系;在Ptn-/-细胞培养液中加入50ng/mlPTN,检测Slfn3/Slfn4基因的表达;用Ptn-/-细胞培养液作用对照细胞后,检测Slf3/Slf4基因的表达。结果 Ptn-/-细胞中Slfn3/Slfn4基因高表达;在U87MG和MDA-MB-231细胞中,Ptn与Slfn3/Slfn4基因的表达呈负相关;在Ptn-/-细胞培养液中加入PTN后,Slfn3/Slfn4基因的表达受到抑制;Ptn-/-细胞培养液对Slfn3/Slfn4基因的表达具有诱导作用。结论 PTN对Slfn3/Slfn4基因的表达具有负调控作用。
- 周乔丹米粲胡迎春李刚吴德昌霍艳英
- 关键词：多效生长因子基因表达调控
