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周静: 作品数：22 被引量：57H指数：4; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省科技厅中药现代化重点项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>

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青霉素G亚砜酸的制备工艺研究被引量：4: 2009年; 以青霉素G钾为原料,采用过氧乙酸作氧化剂合成青霉素G亚砜酸,收率可达97.3%。实验证实,将青霉素G钾干粉加入18%过氧乙酸溶液可得最佳收率。反应结束后,用稀硫酸调pH值至1.5时,青霉素G亚砜酸从反应液中直接结晶析出。; 张晓丰周静关英慧; 关键词：过氧乙酸

农杆菌介导CBF1基因转化安祖花的研究被引量：10: 2008年; [目的]为获得耐低温安祖花奠定基础。[方法]利用农杆菌介导CBF1基因侵染安祖花,并研究不同浓度乙酰丁香酮(AS)和侵染时间对转化后安祖花抗性愈伤组织的存活率和抗性芽分化率的影响。[结果]以重组质粒pBI121-CBF1为模板,利用CBF1cDNA全长的引物序列进行PCR扩增,获得约650bp的片段,表明重组质粒构建成功。在抗性培养基上筛选12周后,部分愈伤组织褐化死亡。用100μmol/LAS作为诱导物质时,抗性愈伤组织存活率和抗性芽的分化率较高。农杆菌侵染时间对转化后愈伤组织存活率和抗性芽分化率有一定影响。[结论]当AS浓度为100μmol/L、侵染时间为10min时,抗性愈伤组织的存活率及分化率最高,分别为48.6%和11.46%。; 周静张晓丰马吉春赵小霞台桂香; 关键词：安祖花 CBF1基因转录因子农杆菌侵染

ARIP2蛋白在小鼠肝细胞中的表达及其生物学作用: 2008年; 目的:探讨激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)在肝细胞内的表达形式及其介导的生物学作用.方法:采用免疫组织化学及细胞化学染色、Western blot检测ARIP2蛋白在小鼠肝组织及肝癌细胞系Hepal-6细胞内的表达;采用激活素特异应答的CAGA-lux报告基因质粒分析ARIP2对激活素诱导的特异基因转录的影响;MTT法检测ARIP2过表达对Hepal-6细胞增殖的彰响.结果:ARIP2蛋白可在小鼠肝组织及Hepal-6细胞表达.激活素A刺激Hepal-6细胞ARIP2蛋白表达呈时间依赖性升高,于24 h达到高峰;12 h、24 h测定值与对照组相比有显著性意义(1.01±0.16,1.62±0.26 vs 0.82±0.11.P<0.05).pcDNA3-ARIP2转染Hepal-6细胞.可以明显抑制激活素诱导的特异基因转录;MTT检测显示激活素A(5μg/L、10μg/L)可以明显抑制Hepal-6细胞增殖,其570 nm吸光度值与对照组相比有显著差异(1.59±0.03、1.49±0.04 vs 1.79±0.07,P<0.05,P<0.01).在Hepal-6细胞内过表达ARIP2可以阻断激活素A对Hepal-6细胞的增殖抑制作用.结论:ARIP2有望成为治疗激活素诱导的肝脏损伤性疾病的基因调控靶点.; 张红军柳忠辉陈芳芳马迪周静台桂香; 关键词：激活素细胞增殖

黏蛋白1多肽对T淋巴瘤Jurkat细胞生长的抑制及其机制被引量：4: 2009年; 目的:探讨黏蛋白1(mucin 1,MUC1)多肽对人T淋巴瘤Jurkat细胞生长的抑制作用及其机制。方法:将MUC1多肽与Jurkat细胞共同培养,锥虫蓝染色法观察MUC1多肽对该细胞生长的影响;流式细胞术检测Jurkat细胞生长周期及其细胞表面MUC1的表达;Annexin V/PI双标记法检测Jurkat细胞的凋亡;应用抗体封闭实验检测MUC1多肽在Jurkat细胞表面作用的位点。结果:10、20、40μg/ml MUC1多肽作用使Jurkat细胞生长抑制分别达(32±4)%、(37±2)%、(46±5)%,未见凋亡细胞。流式细胞术检测结果表明MUC1多肽可诱导Jurkat细胞周期阻滞在G0/G1期,在Jurkat细胞表面有MUC1蛋白的表达。采用5μg/ml和25μg/ml抗MUC1抗体封闭Jurkat细胞表面MUC1表位后,MUC1多肽对细胞生长的抑制效应几乎全部消失。结论:MUC1多肽能明显抑制Jurkat细胞生长,其机制与该多肽通过和Jurkat细胞表面MUC1蛋白相互作用导致细胞周期阻滞在G0/G1期有关。; 马吉春赵小霞高航方芳周静宋献美柳忠辉台桂香; 关键词：JURKAT细胞细胞周期

农杆菌介导低温诱导转录因子CBF1基因转化安祖花的研究: 低温诱导基因转录因子CBF1 ( C-repeat/dehydration- responsive element binding factor 1)是一种转录激活因子,它在植物体内的过量表达能诱导一组低温应答基因cor...; 周静; 关键词：安祖花 CBF1 转录因子农杆菌侵染; 文献传递

高压下A~(2+)Nb_2O_6（A~(2+)=Ca、Zn、Mg）的结构转变研究: 高压研究可以发现物质在常压和室温下不能表现出来的一些现象，进而揭示新规律、新性质，乃至发现新物质。随着静高压原位技术的迅猛发展，金刚石对顶砧（DAC）已被广泛应用于各种物质的高压物性研究。压力诱导相变，化学反应及新结构的...; 周静; 关键词：金刚石对顶砧拉曼铌酸盐; 文献传递

构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C与质粒PQE-4．0的重组质粒: 2008年; 背景:研究表明柯萨奇B4病毒感染与1型糖尿病发病有关,但目前尚未明确其关系的确切机制。目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C与质粒PQE-4.0的重组质粒,转入大肠杆菌中表达,并对表达产物进行功能鉴定。设计、时间及地点:随机对照实验,于2007-03/08在吉林大学免疫学教研室完成。材料:CVB4、HeLa细胞病毒均为吉林大学病原生物教研室保存;菌株E.coli DH5α与M15为东北师范大学遗传所保存;质粒PUCm-T载体、PQE4.0载体由东北师范大学曾宪录教授惠赠。方法:提取柯萨奇B4病毒总RNA,经反转录-聚合酶链反应扩增非结构蛋白P2C基因,与PUCm-T载体连接,将PUCm-T-P2C质粒进行BamHⅠ和HindⅢ双酶切,回收目的片断并定向克隆到PQE4.0表达载体中酶切鉴定。将PQE4.0-P2C阳性重组质粒转化大肠杆菌M15,在IPTG诱导下表达。主要观察指标:①以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C的表达。②采用淋巴细胞转化实验和酶联免疫吸附实验检测大肠杆菌M15细胞重组蛋白粗提物。结果:①反转录-聚合酶链反应扩增得到的987bp的cDNA片段,克隆入PUCm-T载体,酶切释放出长度约2773bp和987bp的两条片段,其中一条与非结构蛋白P2C的聚合酶链反应扩增产物片段大小基本一致,序列分析与Genbank报道的序列一致。目的片段克隆入PQE4.0载体,酶切释放出长度约3400bp和987bp的两条片段,其中一条与非结构蛋白P2C的聚合酶链反应扩增产物片段大小基本一致,获得PQE4.0-P2C重组表达质粒。②十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示未诱导组无明显蛋白带,而诱导组在31000位置均出现较明显的蛋白带,且随着诱导时间延长蛋白表达量也随之增加。③淋巴细胞转化实验与酶联接免疫吸附试验测定结果表明,表达产物具有良好的抗原性与特异性。结论:柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C在大肠杆菌中高效�; 张宸豪张扬周静马爱新; 关键词：柯萨奇病毒感染病毒非结构蛋白质类

基因工程鼠Muc1-MBP融合蛋白的制备及其免疫活性测定被引量：3: 2009年; 目的：制备鼠Muc1-MBP融合蛋白,探讨其免疫活性。方法：将pMAL-Muc1转化大肠杆菌,通过IPTG诱导、SDS-PAGE和Western blot鉴定Muc1的表达,Amylose resin亲和层析纯化Muc1-MBP。将Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清Muc1特异性抗体的水平;MTT法测定小鼠抗Muc1特异的CTL活性;ELISPOT法测定脾脏淋巴细胞IFN-γ的分泌。结果：获得稳定表达Muc1的菌株,制备了分子量67 kD较纯的Muc1-MBP融合蛋白。Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠产生高效价Muc1特异抗体,效价在8 000~16 000之间,Muc1-MBP融合蛋白可诱导CTL杀伤活性,对人乳腺癌MCF-7和小鼠Lewis肺癌LLC1靶细胞的杀伤率分别为（74.5±5.9）%和（60.5±10.4）%,与对照组比P〈0.05,差异显著;Muc1-MBP融合蛋白免疫可诱导脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,特异性活化Th1细胞。结论：成功制备重组鼠Muc1-MBP融合蛋白,其不仅能诱导特异体液免疫应答,而且可诱导细胞免疫应答,尤其能诱导对人类MCF-7细胞较小鼠Lewis肺癌LLC1细胞更加强烈的CTL杀伤活性,提示异种同源蛋白疫苗具有比同源蛋白疫苗更好的抗肿瘤作用。; 方芳马吉春高航赵小霞周静宋献美柳忠辉台桂香; 关键词：CTL活性肿瘤疫苗

重组人IL2-MUC1融合蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定: 2008年; 目的:构建表达人IL2-MUC1融合蛋白的工程菌,为制备新型MUC1疫苗提供实验依据。方法:通过PCR方法钓取人IL-2基因片段,将其克隆入pBS-SK-MUC1重组载体中,再将人IL2-MUC1串联基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1。将重组的pGEX-IL2-MUC1转化大肠杆菌BL-21,通过IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果:经酶切及基因测序证实获得的IL-2基因片段402bp及IL2-MUC1基因片段852bp基因序列正确;构建的pGEX-IL2-MUC1表达载体在BL21大肠杆菌中成功表达GST-IL2-MUC1蛋白,经SDS-PAGE证实其相对分子质量为64000,与理论预期值相符。Western blotting分析表明该表达产物与抗人MUC1多克隆抗体及抗人IL-2单克隆抗体均具有特异性结合能力。结论:成功构建表达人IL2-MUC1融合蛋白的工程菌,为进一步研究以人MUC1为靶点的新型抗肿瘤疫苗奠定基础。; 周静马吉春赵小霞方芳宋献美柳忠辉台桂香; 关键词：黏蛋白1 白细胞介素2 原核表达

大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)诱导小鼠Th1细胞的活化作用被引量：9: 2009年; 目的:探讨MBP对小鼠T细胞的调节作用。方法:采用淋巴细胞分层液分离小鼠脾脏淋巴细胞,在体外用MBP刺激淋巴细胞,通过MTT法测定淋巴细胞增殖反应;ELISA检测脾细胞培养上清中细胞因子的分泌水平;MBP免疫小鼠后,ELSPOT检测MBP刺激脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞频数;免疫组化检测MBP与T细胞的结合作用。结果:MBP以剂量依赖关系促进小鼠淋巴细胞的增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,轻微抑制IL-4的分泌;ELSPOT检测细胞分泌IFN-γ结果显示,MBP可诱导特异性Th1活化,也可刺激非特异性Th1活化;免疫组化结果显示,抗MBP抗体可与经MBP刺激的淋巴细胞发生反应,阳性细胞占总淋巴细胞的37.7%,当MBP采用1∶2 000抗MBP抗体中和后,再与淋巴细胞反应,结果未见阳性细胞。结论:MBP可作用于淋巴细胞诱导非特异性Th1活化,也可通过免疫诱导大量特异性Th1活化;MBP可作为新的免疫增强剂开发利用。; 赵小霞马吉春方芳周静宋献美柳忠辉台桂香; 关键词：麦芽糖结合蛋白 TH1细胞细胞免疫应答

周静

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