唐世刚
- 作品数：11 被引量：43H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤坏死因子受体相关因子2基因缺失小鼠引起暴发性肝功能衰竭及其机制
- 2007年
- 目的探讨TNF受体相关因子基因缺失导致肝功能衰竭的可能性及其可能原因。方法实验鼠分为TNF受体相关因子2(TRAF2)基因缺陷鼠TRAF2^(lox/lox)/Cre^+组、对照鼠TRAF2^(lox/lox)/Cre^-组、敲除TNF基因的TRAF2基因缺陷鼠TRAF2^(lox/lox)/Cre^+/TNF^(-/-)组和对照鼠TRAF2^(lox/lox)/Cre^-/TNF(-/-)组,用PolyI:PolyC诱导敲除TRAF2基因,动态观察血清ALT的变化,观察肝组织病理学改变。胶原酶分离肝细胞,流式细胞术(FACS)检测Fas和CD40的表达,肝细胞加TNF培养后计算存活肝细胞的比率。结果TRAF2^(lox/lox)/Cre^+组鼠于注药后第2天ALT开始升高,第4天达高峰,为(234.80±12.34)U/L,TRAF2^(lox/lox)/Cre^+/TNP(-/-)组鼠ALT亦有升高,为(90.30±15.63)U/L,但病理组织学显示前者有明显的肝细胞坏死和炎性细胞浸润。培养的TRAF2^(lox/lox)/Cre^+/TNF^(-/-)组鼠肝细胞在加入TNF后存活细胞明显低于对照鼠TRAF2^(lox/lox)/Cre^-/ TNF^(-/-)组,且前者Fas表达高于后者,而CD40表达低于后者。结论TRAF2基冈的缺失可导致肝细胞坏死,从而引起暴发性肝功能衰竭。
- 唐世刚
- 关键词：受体肿瘤坏死因子小鼠基因敲除肝功能衰竭
- 重组人源性肝细胞生长因子的纯化及其生物学活性的初步研究
- 2003年
- 目的获取高纯度的重组人源性肝细胞生长因子(rhHDSSF),并探讨rhHDSSF在体外的生物学活性。方法收获大量培养的表达细胞,以冻融法提取蛋白质;以IMAC pH递减非变性法纯化表达的rhHDSSF;以MTT法测定其对HepG2,T24,Fibroblast和Hela细胞的增殖效应。结果从细胞裂解物中纯化得到20 kD左右的单一蛋白条带,其纯度达89％。细胞增殖实验证实这一蛋白产物对HepG2,Hela细胞有显著的增殖作用,并表现出良好的量效和时效关系,而对T24,Fibroblast细胞则增殖效果不明显。结论 本研究证实,人源性肝细胞生长因子(HDSSF)转染细胞株中有20 kD左右HDSSF相应蛋白表达,与HDSSF、598 bp开放读码框理论值相一致,且纯度达89％,并发现其有良好的细胞增殖作用。rhHDSSF是一种非特异性促细胞增长物质,但它也有一定的选择性,这可能与不同细胞表达的细胞受体差异而导致蛋白信号传导不同有关。
- 唐世刚苏先狮
- 关键词：纯化生物学活性蛋白质
- 乙型肝炎病毒X基因克隆及其表达
- 2005年
- 目的:构建乙型肝炎病毒X基因原核表达载体,并诱导其表达。方法:从乙肝病人血清中提取HBVDNA;以带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物,用PCR方法扩增X基因;而后定向克隆到原核表达载体pMAL-C2X上,经酶切鉴定和序列分析;以IPTG诱导X融合蛋白的表达。结果:PCR扩增显示有类似HBVX基因片断大小的条带;构建的原核表达重组体PMAL-C2X-HBV-X经酶切有相应大小的的基因插入片断,序列分析证实为正确的有完整读码框的X基因;这一重组体在IPTG诱导下有相应大小的X融合蛋白表达。结论:成功构建了HBVX基因原核表达重组体pMAL-C2X-HBVX;在IPTG的诱导下,该重组体在大肠杆菌中可表达X融合蛋白,为进一步纯化HBVX蛋白和研究其生物学作用奠定了基础。
- 唐世刚杨兵厂
- 关键词：乙型肝炎病毒克隆乙型肝炎病毒X蛋白
- 肿瘤坏死因子在重型肝炎发病机制中的作用被引量：8
- 1994年
- 肿瘤坏死因子在重型肝炎发病机制中的作用唐世刚，董克礼重型肝炎发病机制迄今尚未完全阐明，近年来一些研究认为肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在其发病中起重要作用，现就我们在这方面的部分工作总结报告如下。材料与方法一、病例选择所选病例全部符合１９９０年（上海）第六次...
- 唐世刚董克礼
- 关键词：肿瘤坏死因子肝炎病因学
- 浅谈多种教学方法和手段在传染病学见习中的应用被引量：3
- 2003年
- 本文介绍了多种教学方法和手段在传染病学见习课中的应用情况 。
- 张文坚万克青唐世刚
- 关键词：教学方法传染病学见习
- 血清-腹水清蛋白浓度梯度与腹水胆固醇在腹水鉴别诊断中的意义被引量：1
- 2006年
- 目的研究血清-腹水清蛋白浓度梯度(SAAG)及腹水胆固醇在肝性腹水和非肝性腹水鉴别诊断中的价值。方法选择腹水患者86例,其中肝性腹水52例,非肝性腹水34例。采用全自动生化分析仪测定血清和腹水清蛋白及胆固醇,SAAG值为血清清蛋白与腹水清蛋白值之差。结果肝性腹水组SAAG为(18.46±8.67)g/L,非肝性腹水组为(8.33±3.61)g/L,两者比较,差异有显著性(P<0.01);92.31%的肝性腹水患者SAAG>11g/L,而非肝性腹水患者均<11 g/L。肝性腹水组腹水胆固醇为(0.34±0.23)g/L,非肝性腹水组为(0.82±0.31)g/L,两者比较,差异有显著性(P<0.01);肝性腹水组腹水胆固醇<0.55 g/L者占88.46%,而非肝性腹水组均>0.55 g/L。结论SAAG及腹水胆固醇检测在肝性和非肝性腹水鉴别诊断中有重要价值。
- 唐世刚杨兵厂刘莉
- 关键词：腹水胆固醇清蛋白
- 稳定表达HBVC蛋白羧基端siRNA抑制HBV cccDNA的实验研究被引量：10
- 2005年
- 目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)C蛋白羧基端短小的干扰RNA(siRNA)对HBV超螺旋双链闭环DNA(cccDNA)水平的影响。方法 设计合成1对能稳定表达针对HBVC基因羧基端(2 389nt - 2 4 10nt)序列的2 2 -mersiRNA寡核苷酸,其两端带有限制性酶切位点,表达后可形成发夹结构,退火后形成双链;然后将这一双链寡核苷酸与重组腺相关病毒载体(rAAV)连接,构建重组体rAAV siRNA。将重组体rAAV siRNA加入培养增殖良好的2 2 .1.5细胞中孵育,72h后用实时聚合酶链反应(RealtimePCR)法检测经处理过的2 2 .1.5细胞和培养上清中HBVcccDNA的表达水平和HBVDNA的复制水平。结果 重组体rAAV siRNA实验组HBVcccDNA水平较空白对照组显著降低(P <0 .0 1) ,HBVDNA的复制水平在实验组亦明显下降;在无关序列对照组未发现对HBVcccD NA水平影响和HBVDNA复制的抑制作用。结论 HBV羧基端siRNA能显著降低HBVcccDNA的水平和HBVDNA的复制。
- 唐世刚杨兵厂刘莉
- 前列腺素E_1对慢性乙型肝炎肝功能和肝纤维化指标的影响被引量：15
- 2001年
- 本文应用前列腺素E1治疗慢性乙肝患者 2 8例 ,分别于治疗前和治疗结束时抽血查血清谷丙转氨酶(GPT)、血清总胆红素 (TBIL)、血清总胆汁酸 (TBA)、透明质酸 (HA)和前Ⅲ型胶原 (PCⅢ )。治疗 1个月后 ,观察组GPT ,TBIL ,TBA ,HA及PCⅢ治疗前后相比差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,和对照组相比差异也具有显著性 (P <0 .0 5 )。提示PGE1能明显改善慢性乙肝患者肝功能 ,并具有一定的抗肝纤维化作用。
- 龚环宇万克青唐世刚张文坚
- 关键词：慢性乙型肝炎肝纤维化肝功能
- 人源性肝细胞生长因子稳定转染细胞株的建立(英文)被引量：3
- 2004年
- 目的通过实验获得人源性肝细胞生长因子(hHDSSF)稳定转染细胞株,为重组产品的获得奠定基础。方法通过脂质体包裹重组质粒pcDNA3。1hisB-HDSSF转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞;进而通过RT-PCR和NorthernBlot鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。结果重组质粒pcDNA3.1hisB-HDSSF转染Hela细胞后,第20天可见G418单克隆抗性细胞株的形成。G418抗性Hela细胞株RT-PCR扩增出600bp左右的目的条带;NorthernBlot获得了明显的阳性杂交影。结论我们的实验证实HDSSF表达重组体被成功转入Hela细胞,并稳定表达;从而获得了HDSSF稳定表达细胞株,为进一步研究HDSSF表达、蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础。
- 唐世刚覃琼华罗育林苏先狮
- 关键词：人源性肝细胞生长因子细胞转染细胞株克隆
- 人源性肝细胞生长因子高效真核表达载体的构建
- 2003年
- 目的 :通过基因克隆构建人源性肝细胞生长因子 (hHDSSF)真核高效表达重组体。方法 :通过T A克隆构建hHDSSF中间重组体pGEM hHDSSF ;酶切鉴定后构建真核表达重组体pcDNA3.1hisB hHDSSF ;末端终止法测定插入片断基因序列。结果 :酶切证实hHDSSF完整插入pGEM中 ;酶切筛选得到正向插入的真核表达重组体pcDNA3.1hisB hHDSSF ,并经序列分析证明。结论 :成功构建了真核表达重组体pcDNA3.1hisB hHDSSF ,为进一步转染真核细胞建立稳定的转染表达细胞株和高效表达hHDSSF奠定了坚实的基础。
- 唐世刚苏先狮
- 关键词：肝细胞生长因子
