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孙砚辉

作品数：14 被引量：66H指数：4
供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 12篇期刊文章
  • 1篇学位论文
  • 1篇会议论文

领域

  • 10篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 2篇文化科学

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇教学
  • 2篇蛋白
  • 2篇抵抗素
  • 2篇幼鼠
  • 2篇原核
  • 2篇生物化学
  • 2篇湿热
  • 2篇湿热证
  • 2篇缺血
  • 2篇热证
  • 2篇细胞培养
  • 2篇巨噬细胞
  • 2篇克隆
  • 2篇苦参
  • 2篇苦参碱
  • 2篇黄芩
  • 2篇黄芩苷
  • 2篇基因
  • 2篇基因表达

机构

  • 14篇广州中医药大...
  • 1篇广东药学院
  • 1篇武汉市中西医...
  • 1篇深圳市宝安区...

作者

  • 14篇孙砚辉
  • 7篇邝枣园
  • 6篇张韧
  • 3篇张广献
  • 3篇张晓圆
  • 2篇万幸
  • 2篇马嫚
  • 2篇孙冬梅
  • 2篇王琴玉
  • 2篇李岩
  • 1篇王萧
  • 1篇练美莲
  • 1篇靳瑞
  • 1篇刘思颖
  • 1篇陈苑
  • 1篇宋梦微
  • 1篇周瑞珍
  • 1篇吴映雅
  • 1篇张苗苗
  • 1篇谭宇蕙

传媒

  • 5篇广州中医药大...
  • 2篇中药新药与临...
  • 1篇中国实验诊断...
  • 1篇西北医学教育
  • 1篇卫生职业教育
  • 1篇中国康复
  • 1篇基础医学教育
  • 1篇国际心脏研究...

年份

  • 1篇2019
  • 2篇2016
  • 1篇2015
  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 4篇2012
  • 2篇2006
  • 1篇2005
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
黄芩苷对脂多糖诱导的巨噬细胞抵抗素和IL-1β表达的影响
目的:研究黄芩苷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞抵抗素和IL-1β表达的影响,从抗炎角度探讨黄芩苷抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,分为对照...
邝枣园孙砚辉孙冬梅马嫚宋梦薇万幸李明李岩
关键词：抵抗素巨噬细胞黄芩苷
基于Blackboard平台的生物化学网络课程建设及应用被引量：4
2012年
建立基于Blackboard平台的生物化学网络课程,使得生物化学课程更加形象化、生动化,并随时能得到学生的反馈,从而有利于生物化学课堂教学的改进以及生物化学网络课程的随时更新。
张广献孙砚辉张韧吴映雅谭宇蕙
关键词：生物化学教学方法网络课程
人ApoC-Ⅰ基因的克隆、原核表达与纯化
2015年
【目的】进行含信号肽ApoC-Ⅰ(signal-ApoC-Ⅰ)和ApoC-Ⅰ成熟肽(mature-ApoC-Ⅰ)的基因克隆、原核表达和纯化。【方法】取肝癌切除手术患者的癌旁组织,提取总RNA后,逆转录成c DNA,并设计带酶切位点的特异引物分别扩增出signal-Apo C-Ⅰ、mature-Apo C-Ⅰ基因;将扩增出的基因通过T克隆入PMDTM19-T载体;T克隆经测序验证后,双酶切出目的基因,连入同样双酶切后的PET28a载体,构建原核表达质粒;再次测序验证后,将质粒转入BL21Star(DE3)中,表达条件优化后进行融合表达;将表达后产物用Ni-NTA树脂亲和层析进行重组蛋白纯化;纯化产物采用Western blot进行验证。【结果】构建了PET28a-signal-ApoC-Ⅰ、PET28a-mature-Apo C-Ⅰ表达质粒,重组质粒都经过测序鉴定正确;PET28a-signalApoC-Ⅰ诱导表达后能抑制宿主菌生长,但经过条件优化2个表达质粒都在BL21Star(DE3)菌中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大量表达和纯化,Western blot证实了表达的结果。【结论】含信号肽ApoC-Ⅰ、ApoC-Ⅰ成熟肽的基因克隆、原核表达和纯化成功,为进一步研究重组人Apo C-Ⅰ的作用奠定了基础。
谢伟群邝枣园孙砚辉张晓圆陈健刘思颖张韧
关键词：基因克隆基因表达蛋白纯化
基于氧化苦参碱相似化合物的UQCRB抑制剂的虚拟筛选被引量：3
2019年
目的通过构建辅酶Q-细胞色素C还原酶结合蛋白(UQCRB)小分子抑制剂的药效团模型,对相似的氧化苦参碱化合物库进行虚拟筛选,寻找出UQCRB小分子抑制剂,为抗肿瘤药物的筛选奠定基础。方法使用Discovery Studio 2.5软件进行药效团模型的构建。首先使用具有活性预测能力的Hypogen算法构建出UQCRB小分子抑制剂药效团模型,再运用Ligand Profiler模块验证药效团模型,应用筛选出来的最佳药效团模型对氧化苦参碱相似化合物数据库进行虚拟筛选,再进行分子对接验证以及ADMET预测。结果应用Hypogen算法成功构建了具有最佳的活性和非活性分子识别能力的药效团模型,并筛选出了9个具有潜在活性的氧化苦参碱相似化合物。结论本研究为发现UQCRB小分子抑制剂提供了新思路。
郑丹娜孙砚辉伍志学张韧吴绍锋
关键词：药效团分子对接氧化苦参碱
UQCRB基因的原核表达和纯化
2016年
目的为研究UQCRB(ubiquinol-cytochrome c reductase binding protein)与中药的作用机制,本实验室进行了UQCRB基因的克隆、原核表达和纯化。方法提取人肝癌SMMC-7721细胞总RNA,反转录后采用特异引物进行PCR扩增获取UQCRB基因全长,产物纯化后连入T载体测定正确,克隆经NheI、XhoI双酶切后连入PET28a(+)载体,构建PET28a(+)-UQCRB原核表达质粒。在BL21(DE3)宿主菌中表达超声处理后,应用Amicon○R Pro Affinity Concentration Kit-Ni-NTA纯化,表达及纯化产物用westernblot验证。结果构建了PET28a(+)-UQCRB表达质粒,经过酶切鉴定和测序鉴定正确。重组UQCRB在BL21(DE3)中的最优表达条件为IPTG 1mM诱导5h。Westernblot证实了表达和纯化结果。结论重组UQCRB的原核表达和纯化成功,为进一步研究UQCRB的作用奠定了基础。
孙砚辉张广献邝枣园张晓圆张韧
关键词：克隆纯化
开启生物化学大门的钥匙——浅谈生物化学绪论教学被引量：2
2013年
重视绪论教学,用这把钥匙为初学者开启一扇生物化学大门,为生物化学的学习建立良好开端,使学生学好生物化学,不断迎接生物化学的发展和挑战。
孙砚辉邝枣园
关键词：生物化学绪论教学方法
人参皂苷Rh2对LoVo细胞迁移和转移能力的影响及机制研究被引量：2
2016年
【目的】探讨人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力的影响。【方法】通过四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定不同浓度Rh2对Lo Vo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制Lo Vo细胞迁移和转移功能作用的Rh2浓度和作用时间。设置空白对照组及Rh2实验组（5、10、20、40、60μmol/L）,通过划痕试验,对Lo Vo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rh2对细胞迁移的影响。采用Transwell法观察不同浓度Rh2对细胞转移的影响。采用Western blot检测不同浓度Rh2对CD44、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶抑制剂2（TIMP2）、E-Cadherin和β-catenin表达水平的影响。【结果】MTT结果显示：0～40μmol/L Rh2处理Lo Vo细胞24 h对其生长无明显影响。随Rh2作用时间的延长和浓度的增加,Rh2对Lo Vo细胞抑制作用逐步增强。划痕试验和Transwell结果表明：随着Rh2浓度增加,其对Lo Vo细胞迁移和转移能力的抑制作用增强,20μmol/L以上浓度的Rh2处理Lo Vo细胞24 h与空白对照组比较具显著抑制作用。Western blot结果表明：随着Rh2浓度的升高,CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2、E-Cadherin和β-catenin蛋白表达水平上升。【结论】人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性。
张晓圆李荣江孙继贤孙砚辉张苗苗伍志学张韧邝枣园
关键词：人参皂苷RH2LOVO细胞细胞迁移细胞转移细胞培养
黄芩苷对巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β的影响被引量：8
2012年
【目的】观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。【方法】体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,取生长良好的细胞进行接种。模型组加入LPS(终浓度为0.1μg/mL或5μg/mL)或重组抵抗素(终浓度为100 ng/mL);中药组加入不同浓度黄芩苷(终浓度为50、100μmol/L),预处理1 h,后加入LPS或抵抗素。24 h后吸取上清,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组IL-1β和抵抗素浓度,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测抵抗素mRNA表达。【结果】与正常组比较,LPS组促进了巨噬细胞分泌抵抗素,抵抗素mRNA表达上调,LPS和重组抵抗素均促进了巨噬细胞产生IL-1β(P<0.05或P<0.01)。黄芩苷高、低剂量组均可显著抑制IL-1β和抵抗素的浓度,且抑制抵抗素mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芩苷可明显降低促炎因子产生的炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。
邝枣园孙砚辉孙冬梅马嫚万幸李明李岩
关键词：黄芩苷巨噬细胞抵抗素白细胞介素-1Β细胞培养基因表达调控
高等中医院校双语教学的必要性思考被引量：6
2006年
中医药学与中华传统文化关系紧密.由于双语教学的实施有可能会造成的文化遗失问题而使人们对高等中医院校的双语教学产生了质疑.本文就双语教学对传统文化的传承,对中医药发展以及中医药人才培养所具有的重要意义进行了阐释,肯定了只要合理认识与开展双语教学,实现时代创新与秉承传统的有机结合将更有利于我国传统医学的发展.
周瑞珍孙砚辉
关键词：双语教学高等中医院校传统文化
针刀疗法对缺血缺氧性脑损伤幼鼠胶质纤维酸性蛋白表达的影响
2012年
【目的】观察针刀疗法对缺血缺氧性脑损伤幼鼠胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。【方法】选用7日龄新生SD大鼠随机分为针刀组、模型组、假手术组,针刀组于造模后2、9、16 d各治疗1次,造模后第17天通过悬吊试验观察缺血缺氧性幼鼠随意运动,并采用苏木精—伊红(HE)及免疫组织化学染色观察缺血缺氧性幼鼠脑组织的病理变化和GFAP表达。【结果】(1)悬吊试验评分结果显示:模型组评分显著降低,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明模型组随意运动有异常;针刀组与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),表明针刀组随意运动接近正常。(2)HE染色显示:模型组病侧脑组织神经细胞水肿、变性、坏死显著,针刀组上述病理变化有所减轻。GFAP免疫组织化学染色显示:模型组出现GFAP阳性细胞增生,染色较深,染色范围较广;针刀组GFAP阳性细胞增生减轻,染色变浅,染色范围亦变小;假手术组未见GFAP阳性细胞增生,染色浅,染色范围分布稀疏。定量分析结果显示:模型组阳性细胞面密度显著升高,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05);针刀组阳性细胞面密度显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明针刀组GFAP表达较模型组显著减少。【结论】针刀疗法能够改善幼鼠缺血缺氧性脑损伤引起的随意运动障碍,减轻中枢神经细胞损伤和GFAP阳性细胞增生,下调GFAP表达。
孙砚辉邱云辉王琴玉
关键词：疾病模型
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