孙等军
- 作品数：25 被引量：88H指数：5
- 供职机构：烟台毓璜顶医院更多>>
- 发文基金：贵州省省长基金贵州省卫生厅科研项目烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ICE对肝癌患者免疫功能的影响被引量：1
- 2007年
- 将146例肝癌患者随机分为三组,单纯手术者为(A组50例),术后1个月行肝动脉化疗栓塞术(TA-CE)者为B组(48例),术后1个月行免疫化疗栓塞术(ICE)者为C组(48例)。流式细胞仪测三组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。结果显示A组患者术前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较低,而术后4周各项指标升高;B组患者术后1周CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均降低,CD8+升高,而4周后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均升高,CD8+降低(P<0.05);C组患者术后1周CD3+、CD4+、CD4+/CD8+略有增高,至4周后显著高于术前(P<0.05)。认为免疫化疗栓塞术不仅不损害患者的免疫功能,还呈现持续改善的趋势。
- 孙萍张良明孙等军耿冬梅李军霞
- 关键词：介入疗法肝肿瘤T淋巴细胞亚群
- 沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体内外肿瘤血管的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体内外肿瘤血管的影响。方法体外实验：将不同浓度的沙利度胺作用于人肝癌细胞株SMMC-7721，采用ELISA方法测定细胞株VEGF分泌量变化。体内实验：首先建立肝癌细胞株SMMC-7721的荷瘤小鼠模型，应用免疫组化测定瘤体组织中微血管密度，ELISA法测定小鼠外周血VEGF表达。结果体外实验中随着沙利度胺药物浓度增加，VEGF含量逐渐下降：沙利度胺浓度从0μg／ml升至400μg／ml，VEGF值由（83．21±8．32）pg／ml降至（33．59±10．98）pg／ml；体内实验：成功建立了肝癌细胞株SMMC-7721的荷瘤小鼠模型，沙利度胺组小鼠外周血VEGF含量为（32．17±12．11）pg／ml，对照组为（69．35±17．56）pg／ml，在沙利度胺瘤体中微血管密度值为13．17±3．15，对照组为18．34±2．25，均有显著性差异（P〈0．01）。结论沙利度胺能抑制SMMC-7721细胞株及荷瘤鼠肿瘤血管的形成。
- 孙萍张良明孙等军董亮亮
- 关键词：沙利度胺人肝癌细胞株SMMC-7721MVD
- p53基因245位点突变对非小细胞肺癌细胞H1299的影响被引量：2
- 2011年
- 背景与目的:p53基因突变是肺腺癌发生中的常见的分子生物学事件,第245位点突变为其突变热点之一,因此研究p53基因第245位点突变可能为肺腺癌的诊断、治疗提供一定的理论基础。本研究旨在研究肺癌常见的245位点突变对p53缺失的人肺腺癌细胞系H1299的影响。方法:应用流式细胞术观察脂质体瞬时转染p53基因第245突变体(G245V)对细胞凋亡的影响,同时用稳定转染观察克隆形成率和生长曲线的不同。结果:转染G245V突变体的H1299细胞凋亡平均数低于转染野生型p53基因的细胞,差异有统计学意义(P<0.001);大中克隆形成数量比导入野生型p53基因的细胞大中克隆形成数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);细胞的生长速度也明显加快。结论:p53基因第245位点发生突变后基本丧失了野生型p53的功能,是肿瘤细胞增殖的原因之一。
- 王蕊宫兆华姜立新孙等军矫爱红陈剑张良明
- 关键词：P53H1299基因突变
- 逆转录病毒载体介导MGMT和MDR1基因增强人脐血CD34+细胞对联合化疗抗性的研究被引量：1
- 2001年
- 为探讨转染六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因(MGMT)和多药耐药基因(MDR1)的人脐血CD34^+细胞能否同时增强对卡氮芥(BCNU)和MDR1基因靶药的抗性,应用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)从人肝组织中获得编码六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)cDNA,构建双顺反子逆转录病毒载体G1Na-MGMT-IRES-MDR1,以电穿孔介导的基因转移法导入GP+E86和PA317病毒包装细胞,采用含BCNU和长春新碱(VCR)的培养基克隆选择后收集重组病毒上清于单向型GP+E86与双嗜型PA317包装细胞行乒乓交互感染,将含MGMT和MDR1双耐药基因重组病毒的上清在细胞生长因子刺激下重复感染经免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化后的人脐血CD34^+细胞,用PCR,RT-PCR,Southern blot,Northern blot,FACS和MTT等方法检测外源MGMT与MDR1基因在CD34^+细胞中的转移和表达。结果显示,DNA测序及酶切鉴定证实MGMTcDNA克隆和双顺反子逆转录病毒载体构建的正确性,MACS分离纯化后的人脐血CD34^+细胞纯度平均达92%,回收率为75%,含双耐药基因重组病毒的上清最高滴度为5.8×10~5cfu/ml,逆转录病毒载体介导的双耐药基因已整合入转染靶细胞中基因组并获得有效表达,同时传递不同的耐药表型,应用集落计数、PCR方法测定基因转导效率分别为18%和20%,巢式PCR及补救分析均未检测到辅助病毒存在,经双耐药基因修饰的脐血CD34^+细胞对BCNU的IC_(50)较对照组提高4.5倍,对VCR,柔红霉素(DNR)和秋水仙碱(COL)的IC_(50)较未转染细胞分别高7.8,6.6和5.5倍。本研究对降低联合化疗骨髓毒性作用的肿瘤临床研究奠定了实验基础。
- 王季石孙等军林果为费俭
- 关键词：逆转录病毒载体MGMTMDR1基因CD34+细胞
- 人类cyclophilin A基因cDNA的克隆和序列测定被引量：5
- 2003年
- 目的:克隆人类环孢霉素A受体亚型cyclophilinA(CypA)基因,对该基因进行序列测定。方法:利用EST重叠序列拼排技术,设计特异性CypA引物,以人外周血白细胞总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,纯化PCR产物,装pGEM-T载体,进行DNA序列测定。结果:成功克隆了人类Cyp A基因cDNA序列的开放阅读框,经DNA序列测定证实序列正确。结论:通过克隆人CypA基因,并克隆人pGEM-T载体,为下一步的基因表达和功能研究奠定了实验基础。
- 任志娟王季石肖芸张维陈剑孙等军张旭吴镇宇方琴
- 关键词：CDNA克隆环孢霉素受体
- 培美曲塞治疗晚期食管鳞癌2例
- 2012年
- 目的探讨培美曲塞在晚期食管鳞癌治疗中的疗效。方法回顾分析培美曲塞治疗2例食管鳞癌过程,结合近年国内外文献复习,总结其疗效及安全性。结果 2例晚期食管鳞癌患者经化疗2～3个周期化疗后,颈部淋巴结转移均消失,一般状况好转,TTP≥6个月。结论培美曲塞治疗晚期食管鳞癌疗效高,安全性好,但仍需进一步研究。
- 黄晓娟陈剑孙等军宫兆华矫爱红初丽妍张良明
- 关键词：食管癌培美曲塞化疗
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备
- 2003年
- 目的 获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRARAIL)抗体。方法 利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPre-TMHTb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导其在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过DotBlot及 Western Blot检测抗 TRAIL抗体的产生。结果 成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8％,经Dot Blot及 WesternBlot捡测证实获得了抗TRAIL抗体。结论 成功制备抗TRAIL抗体,从而为TRAIL在真核细胞水平的深入研究奠定了实验基础。
- 张旭孙等军方琴任志娟陈剑肖芸王季石
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体大肠杆菌聚合酶链反应基因重组技术
- 沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用被引量：7
- 2009年
- 目的研究沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用及其可能的机制。方法将不同浓度的沙利度胺作用于人肝癌细胞株SMMC-7721，采用四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测沙利度胺对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。将SMMC07721细胞培养至对数生长期，采用DNA琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜观察、流式细胞仪检测等方法观察沙利度胺处理后SMMC-7721细胞的凋亡梯度、形态学变化和凋亡率，并对凋亡调控蛋白caspase-3的表达进行测定。采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定不同浓度的沙利度胺处理后SMMC-7721细胞表达血管内皮生长因子（VEGF）的变化。结果沙利度胺的浓度从3．125μg／ml增至200μg／ml时，其对SMMC-7721细胞的增殖抑制率从11．7％增至34．2％；当沙利度胺的浓度〉25μg／ml时，其对SMMC07721细胞的增殖抑制作用明显强于空白对照组（P〈0．05）。200μg／ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞24h后，行琼脂糖凝胶电泳，可见到DNA梯形条带；48h后梯形条带更明显，并且在荧光显微镜下可见SMMC-7721细胞出现核固缩和核裂解现象。200μg／ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞12、24、48和72h时，碘化丙啶（e1）法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为3．1％±0．5％、8．4％±1．3％、19．4％±3．5％和25．8％±2．1％，24h起的凋亡率均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48h的自然凋亡率（1．6％±0．6％，均P〈O．05）。50、100和200μg／ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞48h时，AnnexinV—FITC／PI双标法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为8．7％±1．2％、16．8％±2．5％和25．4％±4．5％，均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48h的自然凋亡率（2．1％±0．5％，均P〈0．05）。随着沙利度胺浓度的增加，表达caspase-3蛋白的SMMC-7721细胞数量不断增加，而SMMC-7721细胞中VEGF的含量却逐渐下降。结论沙利度胺可能通过诱导肝癌
- 孙萍张良明孙等军董亮亮
- 关键词：沙利度胺SMMC-7721细胞凋亡血管内皮生长因子
- 沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721荷瘤鼠移植瘤作用被引量：4
- 2011年
- 目的研究沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721荷瘤鼠移植瘤的生长抑制作用及可能机制。方法建立肝癌细胞株SMMC-7721的荷瘤鼠模型,观察沙利度胺组与对照组瘤体变化,应用免疫组化方法测定瘤体组织中微血管密度,ELISA法测定荷瘤鼠外周血血管内皮生长因子(VEGF)表达,并采用流式细胞仪测定瘤体组织细胞凋亡指数及瘤体细胞中Caspase-3的表达。结果成功建立肝癌细胞株SMMC-7721的荷瘤鼠模型,随着皮下移植瘤的生长,在第7天以后,对照组瘤体体积渐大于沙利度胺组,且随时间延长差值增大。实验结束时沙利度胺组抑瘤率为24.6%。沙利度胺组荷瘤鼠外周血VEGF含量及瘤体组织微血管密度均显著低于对照组(t=6.563、3.586,P<0.01),瘤体组织细胞凋亡指数及Caspase-3阳性表达均显著高于对照组(t=7.356、5.147,P<0.01)。结论沙利度胺能抑制人肝癌细胞株SMMC-7721荷瘤鼠移植瘤的生长,诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管形成可能为其机制,Caspase-3参与细胞的凋亡过程。
- 李军霞孙萍孙等军董亮亮夏玉军
- 关键词：沙利度胺肝肿瘤血管内皮生长因子A
- 改良FOLFOX4方案联合氟尿苷腹腔灌注治疗胃印戒细胞癌伴腹腔转移被引量：1
- 2009年
- 目的:观察改良FOLFOX4方案联合氟尿苷(FUDR)腹腔灌注化疗治疗胃印戒细胞癌伴腹腔转移的疗效。方法:回顾性分析8例胃印戒细胞癌伴腹腔转移患者采用改良FDLFOX4方案静脉化疗联合氟尿苷腹腔灌注化疗的临床资料。结果:8例患者均完成3次腹腔灌注化疗,静脉化疗6～10周期;7例患者完成全部治疗,获CR 1例,PR 6例;另1例患者在完成4周期化疗后出现病情进展改用其他治疗方案。结论:改良FOLFOX4方案联合氟尿苷腹腔灌注化疗治疗胃印戒细胞癌伴腹腔转移患者安全有效,值得进一步研究。
- 孙等军于荣张良明
- 关键词：印戒细胞氟尿苷
