孟民杰
- 作品数：24 被引量：57H指数：5
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答被引量：3
- 2002年
- 将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 。
- 孟民杰高荣沈斌魏竹波唐漫书沈翼王克非刘世贵
- 关键词：囊虫病抗原基因免疫应答DNA疫苗小鼠
- 猪囊尾蚴抗原基因Ts11的克隆及其在大肠杆菌的表达被引量：5
- 2001年
- PCR扩增重组噬菌体λTs11克隆的cDNA片段 ,与pUC18连接 ,得到的重组子用以测序 ,并进行同源性比较分析 ;将该片段克隆到原核表达载体pGEX 1λT中 ,免疫印迹筛选得到能正确表达该片段的重组子 ;制备该重组子在大肠杆菌中的表达产物 ,进行浓度梯度SDS PAGE和West ernblotting分析。结果表明Ts11cDNA片段为 52 2bp ,编码含 139个氨基酸残基的多肽 ,在Gen Bank和EMBL数据库均未发现同源序列。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 4 1KD ,能与兔抗猪囊尾蚴囊液血清产生很强的免疫反应。这些结果证实分离到一个新的编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的cDNA克隆。
- 沈斌高荣孟民杰王克非魏竹波刘世贵
- 关键词：囊尾蚴克隆核酸疫苗
- 猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究被引量：2
- 2003年
- 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。
- 沈翼高荣沈斌武梅孟民杰唐漫书李江凌郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：猪囊尾蚴抗原基因真核表达人畜共患病
- 猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究被引量：11
- 2002年
- 用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0
- 唐漫书高荣孟民杰武梅李江凌龙章富沈翼沈斌刘世贵
- 关键词：原核表达DNA重组基因表达融合蛋白
- 成华猪γ-干扰素基因分子克隆与序列分析被引量：11
- 2003年
- 为研究猪γ-干扰素在抗御传染性疾病和肿瘤生物治疗中的免疫增强作用,本实验以ConA刺激成华猪外周血淋巴细胞提取激活淋细胞的mRNA,设计合成特异的引物序列,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增和克隆成华猪IFN-γ基因并进行序列测定。成华猪IFN-γcDNA约长500bp,从第68位核苷酸开始编码其信号肽,到569位核苷酸为终止子。IFN-γ基因的开放框架(ORF)由498bp构成,编码166个氨基酸。成华猪IFN-γ与猪IFN-γ基因核苷酸间同源性为98％,在261-269存在点突变,在氨基酸水平完全一致。IFN-γ氨基酸与鼠同源性为30％,与人同源性为40％。
- 李江凌高荣武梅孟民杰唐漫书沈翼王丽焕刘世贵
- 关键词：成华猪分子克隆生物治疗
- 猪带绦虫不同阶段及羊囊尾蚴蛋白质分析
- 2001年
- 利用浓度梯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对猪囊尾蚴的囊液和虫体 ,猪带绦虫成虫的头颈节、成节、孕节 ,猪带绦虫的虫卵以及羊囊尾蚴的蛋白成分进行了对比分析。结果发现 :囊液、虫体、头颈节、成节、孕节、虫卵、羊囊尾蚴分别有35条 (15 .0～ 15 0 .4kd)、44条 (15 .0～ 133.7kd)、2 2条 (13.3～ 163.9kd)、19条 (13.3～ 90 .1kd)、19条 (13.3～ 90 .1kd)、30条 (13.3～ 99.4)和 38条 (15 .0～ 133.4kd)蛋白带 ;其中 15 .0 kd和 35 .5 kd两条共同抗原蛋白带 ,在猪带绦虫各阶段和羊囊尾蚴中含量最大的蛋白带同时也是阶段性的共同抗原蛋白带。这些结果为下一步的保护性抗原筛选奠定了基础。
- 魏竹波高荣沈斌孟民杰王克非付玉梅卓麟朱锦刘世贵
- 关键词：SDS-PAGE猪带绦虫蛋白质
- 猪囊虫抗原基因TS21的真核表达被引量：2
- 2002年
- 构建了猪囊虫抗原基因TS2 1的VR10 2 0真核表达载体 ,以菌落原位杂交法筛选获得正确插入的重组质粒 ,用RNA印迹 (Northernblotting)和ELISA检测插入片段的转录及其翻译表达产物。结果 ,VTS2 1在真核细胞中能够转录TS2 1基因的mRNA ;兔抗猪囊虫超免疫血清可识别其蛋白表达产物 ,表明VTS2
- 谢鸿观高荣沈斌孟民杰唐漫书沈翼王丽焕刘昆郑勇武梅李江凌刘世贵
- 关键词：猪囊虫真核表达
- 脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响被引量：9
- 2003年
- 比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性以及免疫细胞数量 ,均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76+VPIL 6在减少质粒用量 80 %时 ,免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76,且明显高于VTS76+VPIL 6,证明VPIL 6能显著增强基因疫苗 (VTS76)免疫小鼠的免疫应答。
- 龙章富高荣孟民杰武梅郑勇刘昆刘世贵
- 关键词：阳离子脂质体免疫应答免疫增强剂疫苗
- 猪囊虫TS21抗原DNA接种小鼠的免疫应答被引量：1
- 2003年
- 将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的诱生活性 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 ,VTS2 1免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠 ;免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强 ,表明VTS2 1具有很强的免疫激活作用 。
- 巫雪艳高荣沈斌孟民杰沈翼李江凌武梅唐漫书郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：小鼠免疫应答MTT比色法猪带绦虫囊虫
- CMA3／DA／DAPI染色和C带技术表达的达西门塔尔牛结构异染色质
- 采用外周血培养,气干法制片,制备了西门塔尔牛的染色体标本。应用CMA3／DA／ DAPI荧光染色并结合C带技术,研究了染色体着丝粒区结构异染色质的性质。结果表明:(1)经CMA3／DA／DAPI三重
- 易林孟民杰王喜忠王子淑陈文元
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