庄旻 作品数:9 被引量:12 H指数:3 供职机构: 学研究院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 南京医科大学科研基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
Ribozyme和靶RNA的相互作用对于切割反应的影响 被引量:5 1994年 锤头结构Ribozyme(Rz)通过与靶RNA上切卢、二狈帕5核普酸序列的碱基配对识别和切割靶RNA。通过改变Ribozyme与靶RNA之间碱基配对的长度以及性质,研究了Ribozyme与靶RNA相互作用对于它的切割反应的影响。结果表明:(1)缩短碱基配对长度和改变碱基配对的性质,使Ritiozyme与底物的熔卢、(Tm)降低,同时反应最适温度(Topt)也降低。(2)动力学分析表明,反应的Km值随温度升高而增加,当温度接近或高于Ribozyme与底物的熔点时,Km值增加大大加快。(3)反应的Kcat也随温度升高而增加,但Kcat增加的速度继而逐渐变慢,最后Kcat下降。 陆长德 庄旻 祁国荣关键词:RIBOZYME RNA 分子 胰岛素受体基因17外显子点突变的测得 被引量:4 2000年 目的 阐述胰岛素受体基因缺陷与胰岛素抵抗发生机制间的关系。方法 运用PCR 单链构型多态性技术 ,对 9个黑棘皮病家系 (计 9例患者 ,2 3例他们的一级亲属 )进行了该基因 17外显子筛查工作 ,对其中带型异常者进行了DNA直接测序确认。结果 发现了 3个既往未报道过的错义突变和 5个沉默多态性 (slientpolymorphism) ,即杂合子突变Val983 →Met,纯合突变Gln10 0 4 →Lys、纯合突变Gly10 2 2 →Lys、Pro980 (CCA→CCC)、Leu10 0 2 (CTG→CTT)、Gln10 0 4 (CAA→CAG)、Gly10 0 8(GGC→GGT)、Glu10 3 4(GAG→GAA)。结论 上述突变可能是造成黑棘皮病患者胰岛素抵抗的主要原因。 沈捷 丁国宪 陈家伟 庄旻 魏勇 王华 柴建华关键词:基因突变 胰岛素抵抗 胰岛素受体 糖尿病家系及群体胰岛素受体基因变异的对照研究 被引量:3 2000年 目的 进一步了解 2型糖尿病胰岛素抵抗的发生机理。方法 运用聚合酶链反应及单链构型多态性 (PCR- SS-CP)技术 ,分析 4个 2型糖尿病家系、5 2例 2型糖尿病患者及 5 4例正常对照者的胰岛素受体基因第 17及 2 0外显子的变异。结果 17外显子 10 0 8位甘氨基 (Gly)的 GGC→ GGT多态性频率在 2型糖尿病家系及群体分别为 18%和 2 9.4% ,而正常对照组为 9.3% (χ2 =12 .7133,P<0 .0 0 0 5 )。与正常对照组比较 ,2型糖尿病家系、群体的相对危险性分别为 RR=1.944 ,RR=3.738。家系连锁分析显示 L OD最大值为 0 .46 5 736 (θ=0 .0 0 0 0 )。 2 0外显子 Gly的 116 9位 GGT→ GGC多态性频率在 2型糖尿病家系、群体及正常对照组分别为 10 .0 %、15 .4%和 3.7% (χ2 =3.2 36 ,P>0 .0 5 ) ,该位点在 2型糖尿病家系、群体的相对危险性分别为 RR=2 .70 0 ,RR=3.92 7。家系连锁分析显示 L OD最大值为 1.80 334 (θ=0 .0 0 0 0 )。结论 Gly1 0 0 8和 Gly1 1 6 9位点多态性可能是 2型糖尿病的遗传标志。 马向华 沈捷 马立隽 丁国宪 庄旻 陈家伟关键词:受体 胰岛素 基因 NIDDM 2’-O-甲基化修饰对Ribozyme活性的影响 1995年 锤头结构Ribozyme切割底物时的催化结构包括3个螺旋区和中间10核苷酸的单链区(编号为3~9,12~14,在我们过去文章中称3个双链区为茎区,现根据一些科学家的建议改称为螺旋区.我们原称的茎Ⅰ现称螺旋Ⅲ,原茎Ⅲ现称螺旋Ⅰ,原茎Ⅱ称螺旋Ⅱ).在我们实验室进行的机制研究表明3个螺旋区碱基配对的强弱以及螺旋的构象可影响反应的最适温度和切割效率.将螺旋Ⅰ和/或螺旋Ⅲ的RNA·RNA配对改为RNA·DNA(或DNA·DNA)配对既减弱了Ribozyme与底物的相互作用又改变了螺旋的构象,使反应的最适温度与切割效率都降低很多,有的甚至几乎看不到切割活性.将螺旋Ⅱ的RNA·RNA配对改为DNA·RNA配对只影响螺旋Ⅱ的构象而不影响Ribozyme与底物的相互作用,结果也使反应的最适温度和切割效率降低,但影响较小.为提高Ribozyme稳定性又不影响或少影响它的切割效率,我们研究了2’-O-甲基化对Ribozyme活性的影响. 庄旻 陆长德 祁国荣关键词:RIBOZYME 甲基化 DNA RNA 3′-单磷酸化寡核苷酸 本发明提供3′-单磷酸化寡核苷酸,体内研究证明了其在血清和细胞内的稳定性明显高于未修饰的寡核苷酸的稳定性并且略高于硫磷酸修饰的寡核苷酸,细胞实验证明了其被细胞摄取的能力高于未修饰的寡核苷酸和硫磷酸修改的寡该苷酸的能力。其... 陆长德 庄旻 夏宇蕾文献传递 A Study on Exon 17 and 20 of the Insulin Receptor Gene Variations in Patients with Acanthosis Nigricans and Their Close Relatives 2003年 Objective: To explore the relationship between the insulin resistance and thedefects or mutations or mutations in insulin receptor (InsR)gene. Methods: Using the single-strandconformation polymorphism(SSCP), mutations and polymorphisms were detected in nine patients withacan-thosis nigricans (AN) and their first degree relatives in exon 17 and 20 of InsR gene. Thepolymorphisms and mutations were confirmed by DNA direct sequencing. Results: Fourteen variant SSCPpat-terns were detected. Direct sequencing revealed seven point mutations and six silentpolymorphisms. Five of the mutations appeared not to be mentioned in the previous literature. Thesemutations were all located within the domain of tyrokinase in InsR. Conclusion: It seem to us thatalmost all the AN patients with severe insulin resistance in this study have mutations in InsRtyrokinase domain. 沈捷 丁国宪 陈家伟 庄旻 王华 夏红 马向华 马立隽关键词:GENETICS 3′-单磷酸化寡核苷酸 一种3′-单磷酸化寡核苷酸,经体外和细胞研究证明其在血清中和细胞内的稳定性明显高于不修饰的寡核苷酸,略高于硫磷酸修饰的寡核苷酸,3′-单磷酸化寡核苷酸被细胞摄取的能力高于不修饰的寡核苷酸及硫磷酸修饰的寡核苷酸。由于其不带... 陆长德 陈锦辉 庄旻 邵华武 夏宇蕾文献传递 锤头结构Ribozyme中3个茎区的双链配对性质对其催化活性的影响 被引量:2 1994年 锤头结构Ribozyme是已知一类链长较短并易于设计的Ribozyme.我们针对苜蓿夜蛾核多角体病毒(AcNPV)多角体蛋白mRNA片段而设计的Ribozyme经体外切割试验证明是有效的.利用这一模型我们研究了Ribozyme与底物的相互作用对于切割反应的影响.结果指出Ribozyme与底物的相互作用越强则反应的最适温度(T_(opt))越高,反之亦然;将Ribozyme与底物的配对由RNA·RNA配对改为RNA·DNA配对能使它们的相互作用减弱.同时,我们观察到某些反应的T_(opt)的降低比T_m降低大得多.从动力学分析看,T_(opt) 陆长德 庄旻 祁国荣关键词:RIBOZYME 茎区 3′-单磷酸化寡核苷酸 一种3′-单磷酸化寡核苷酸,经体外和细胞研究证明其在血清中和细胞内的稳定性明显高于不修饰的寡核苷酸,略高于硫磷酸修饰的寡核苷酸,3′单磷酸化寡核苷酸被细胞摄取的能力高于不修饰的寡核苷酸及硫磷酸修饰的寡核苷酸。由于其不带非... 陆长德 陈锦辉 庄旻 邵华武 夏宇蕾文献传递