张仕杰
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 供职机构：南京农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ‘南通小方柿’DkGA2ox1 基因及其表达载体和应用
- 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟...
- 渠慎春屠煦童蒋振莹蔡斌华张仕杰陈小云李宁宁章镇
- 文献传递
- ‘湖北海棠’MhWRKY40a 基因及其应用
- 本发明公开了‘湖北海棠’MhWRKY40a基因及其应用。‘湖北海棠’MhWRKY40a基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1。所述的MhWRKY40a基因在创制耐盐和抗低温新种质和/或植物品种改良中的应用。本发明首次从...
- 渠慎春罗昌国章镇乔玉山蔡斌华张仕杰辛璐
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- MhRAR1和MhSGT1基因转化苹果提高轮纹病菌诱导的抗氧化酶活性被引量：4
- 2013年
- RAR1和SGT1是植物R基因(抗病基因,resistance genes)介导的抗病防卫途径中的两个重要信号元件,在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用。为了研究湖北海棠MhRAR1和MhSGT1基因在感病苹果品种植株内的表达特性及其抗病功能,利用农杆菌介导法将两种基因分别转入富士苹果。对Hyg阳性植株进行PCR和RT-PCR检测,6个转MhRAR1株系和3个转MhSGT1株系呈阳性;两种转基因苹果株系被苹果轮纹病病原菌侵染后,与对照相比都表现出抗氧化酶(SOD/POD/CAT)活性迅速升高、MDA含量变化较平缓的趋势,进一步说明RAR1和SGT1基因能够作用于苹果体内的活性氧反应和细胞膜活动进程,对植株受到外部侵害后的抗性反应有促进作用。
- 屠煦童张仕杰吕东陈小云章镇渠慎春
- 关键词：苹果湖北海棠轮纹病抗氧化酶活性
- ‘苏帅’苹果三个农艺性状的遗传变异分析
- 苹果（Malus×domestica Borkh.）属于木本落叶果树，为全球栽培面积最大的果树之一。‘苏帅’苹果是以‘印度’为母本，‘金帅’为父本杂交选育而成的苹果新品种。与其父母本相比，具有植株生长健壮，树冠紧凑，枝条...
- 张仕杰
- 关键词：苹果农艺性状基因变异SSR分子标记
- ‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用
- 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟...
- 渠慎春屠煦童蒋振莹蔡斌华张仕杰陈小云李宁宁章镇
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- ‘南通小方柿’乙醇脱氢酶基因DkADH1的克隆及表达分析被引量：1
- 2014年
- 以‘南通小方柿’果实为材料,采用同源克隆的方法,获得了柿乙醇脱氢酶基因DkADH1,其全长为1 377 bp,开放阅读框为1 137个核苷酸,编码379个氨基酸,具有ADH基因典型的结构域和功能域,与番茄、苹果等双子叶植物亲缘性较近。以‘南通小方柿’不同组织为材料,采用qRT-PCR方法对DkADH1及单宁生物合成途径中的相关基因的表达进行分析,同时测定了不同时期果实的单宁含量,结果表明在果实发育过程中,可溶性单宁含量逐渐降低,而不溶性单宁含量不断升高;DkADH1基因在茎、叶、花、果实等器官中均有表达,在果皮中表达量最高。随着果实的成熟,DkADH1表达量总体呈上升趋势。柿果实中单宁合成途径中的相关基因DkF3′5′H和DkMYB4随着乙醇处理果实时间的延长表达量呈下降趋势,推测‘南通小方柿’DkADH1能够抑制单宁合成相关基因的表达,从而降低果实可溶性单宁含量。
- 陈小云张仕杰屠煦童李宁宁章镇渠慎春
- 关键词：克隆基因表达
- ‘南通小方柿’GA2ox基因的克隆、亚细胞定位及表达分析被引量：6
- 2015年
- 【目的】从地方矮化品种‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.cv.Nantongxiaofangshi)中分离赤霉素合成关键酶基因GA2ox,并进行亚细胞定位及表达分析,为进一步探索其矮生性状形成机理及选育新型矮生品种奠定基础。【方法】以‘南通小方柿’幼嫩叶片为材料,通过改良的CTAB法提取总RNA,利用简并引物克隆GA2ox家族中2个基因的片段,采用3′和5′RACE方法得到基因的全长c DNA序列,分别命名为Dk GA2ox1和Dk GA2ox2。通过生物信息学方法分析结构特征,利用GFP进行亚细胞定位,实时荧光定量RT-PCR技术研究其在发芽期、展叶期、枯顶期、开花期、生理落果期、果实着色期、果实成熟期中的表达特性。【结果】生物信息学分析Dk GA2ox1和Dk GA2ox2全长c DNA序列分别为1 318 bp和1 267 bp,分别含有198 bp和61 bp的5′非翻译区及97 bp和172 bp的3′非翻译区。编码332个和334个氨基酸,与毛白杨(JX102472.1)、夹竹桃(AY594292.1)、烟草(AB125232.1)、矮牵牛(GU059939.1)、苹果(FJ571521.1)、梨(JF441168.1)、葡萄(JQ608472.1)的相似度达73%—77%。含有保守20G-Fe(Ⅱ)-Oxy蛋白结构域,高度保守的2-酮戊二酸结合位点(Dk GA2ox1:Arg-272、Ser-274;Dk GA2ox2:Arg-271、Ser-273)和Fe2+结合位点(Dk GA2ox1:His-205、Asp-207、His-262;Dk GA2ox2:His-204、Asp-206、His-261),有赤霉素2-氧化酶蛋白家族共同的结构特点。Dk GA2ox1和Dk GA2ox2编码蛋白分子量分别为36 596.1 Da和37 544.2 Da,均为稳定蛋白,无信号肽,无跨膜结构域,无明显疏水区,属于C19-GAoxs。瞬时表达载体的构建及洋葱表皮细胞转化后,洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,Dk GA2ox1编码蛋白定位于细胞核和细胞质中。Dk GA2ox1和Dk GA2ox2在开花期表达最丰富,并在7个典型物候期中均高于乔化品种‘大方柿’。【结论】南通小方柿中赤霉素2-氧化酶基因的表达与其矮生性状有关。
- 屠煦童张仕杰陈小云李宁宁辛璐薛晓晖章镇渠慎春
- 关键词：基因克隆亚细胞定位
- 拉枝对苹果幼树生长发育的影响被引量：8
- 2012年
- 研究了刻芽和拉枝处理对苹果幼树生长发育的影响。结果表明:当刻芽伤口到芽体的距离为6 mm时,萌芽率达到最高(90.5%)。当拉枝角度为45°时,枝条的加长生长量最大;在70°时加粗生长量最大;在90°时萌芽率最高(74.0%)。当拉枝角度为110°时叶片含水量最高(63.9%)。叶片总叶绿素含量在拉枝角度为70°时达到最高(3.190 mg/g)。拉枝角度为45°时,叶片含氮量极显著高于其它处理;在110°时叶片中磷、钾、铜、锰的含量均最高;当拉枝角度为70°时,叶片中镁、铁、锌含量均达到最高。叶片中总碳含量随着拉枝角度的增大而减少。新梢中碳和氮含量均在90°时最高,但C/N在110°时最大。
- 张仕杰屠煦童戴强渠慎春
- 关键词：苹果刻芽拉枝叶绿素生长发育
- 转MhGlu基因烟草灰霉病抗性及光合特性研究(英文)
- 2014年
- 以湖北海棠盆栽及组培苗叶片为材料,经NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理后,通过RT-PCR技术克隆了湖北海棠β-1,3-葡聚糖酶基因MhGlu;构建MhGlu基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法将MhGlu基因转入烟草中,并通过PCR和RT-PCR检测,成功获得了4个转基因株系T6、T8、T11和T18;以转基因烟草株系T6及T8和非转基因对照植株为材料,对MhGlu基因的功能进行了进一步分析。结果显示:(1)半定量qRT-PCR显示,NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理均可以诱导湖北海棠盆栽及组培苗叶片MhGlu基因的表达;NaCl和PEG-6000处理48h内MhGlu基因的表达随处理时间延长逐渐增强,4℃下ABA处理的MhGlu基因表达量在4h时开始上调,12h时略降低,48h时又达到最大。(2)半定量RT-PCR检测转基因烟草植株几个病程相关基因PRs的表达量,表明过表达的MhGlu基因诱导并增强了烟草病程相关基因NtPR1、NtPR3和NtPR5的表达。(3)用灰霉病侵染烟草叶片,转基因烟草株系T6、T8均表现出较强的抗灰霉病特性。(4)测定烟草植株光合特性参数,转MhGlu基因烟草株系的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)较对照组均显著提高,且T8的净光合速率和蒸腾速率均显著高于T6,而T8与T6的气孔导度差异不显著。MhGlu基因在烟草中的过量表达能诱导病程相关基因PRs的表达,激活了烟草的光合特性保护机制,提高了转MhGlu基因烟草植株的灰霉病抗性。
- 余心怡陈秀孔张仕杰章镇渠慎春
- 关键词：灰霉病抗性光合特性烟草
- ‘湖北海棠’MhWRKY40a 基因及其应用
- 本发明公开了‘湖北海棠’MhWRKY40a基因及其应用。‘湖北海棠’MhWRKY40a基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1。所述的MhWRKY40a基因在创制耐盐和抗低温新种质和/或植物品种改良中的应用。本发明首次从...
- 渠慎春罗昌国章镇乔玉山蔡斌华张仕杰辛璐
