张志新 作品数:5 被引量:19 H指数:1 供职机构: 浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所 更多>> 发文基金: 霍英东基金 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
光系统Ⅱ的抑制增强N基因介导的抗性但减弱烟草非寄主抗性 被引量:1 2006年 以除草剂敌草隆为光合作用电子传递系统中光系统Ⅱ的抑制物,携带抗病基因/无毒基因互补基因对N/P50的杂交一代烟草为植物基因对基因抗病性研究材料,以及炭疽菌薏苡分离物及其非寄主植物烟草为非寄主抗病性研究系统,研究了光照通过光合作用途径对植物基因对基因抗病性和非寄主抗病性的影响.结果显示,23.3 mg?L-1敌草隆处理加速N/P50烟草苗中过敏性反应的产生.原本为烟草非病原的炭疽菌薏苡分离物成功侵染经23.3 mg?L-1敌草隆处理的非寄主植物的烟草,形成细小炭疽病病斑.但病斑扩大受到明显限制,不产生大量分生孢子.因此,光系统Ⅱ介导的途径减弱N介导的抗性,但增强烟草对炭疽菌薏苡分离物的非寄主抗性.这些结果表明,光系统Ⅱ介导的途径影响多种形式的抗病性,并且对不同形式抗病性的影响作用不同. 何伟华 蔡新忠 张志新关键词:N基因 1个Avr/Cf介导的差异表达基因在番茄抗叶霉病中作用的基因沉默分析 2008年 Avr/Cf介导产生过敏性反应时特异表达的cDNA-AFLP片段,称为ACE(Avr/Cf-elicited)片段,从中挑选1个未知功能的基因(记为ACE5)(GeneBank登录号为CK348288),利用VIGS技术对该片段相应基因进行基因沉默分析,分析该基因在植株生长和发育以及番茄抗叶霉病中的作用。结果表明该差异表达片段相应基因对本氏烟的生长发育以及Avr/Cf介导的HR反应均无影响。 郑璐平 张志新 徐秋芳 蔡新忠病毒诱导的基因沉默 被引量:16 2008年 病毒诱导的基因沉默"(virus-induced gene silencing,VIGS)一词最早用于描述被病毒侵染的植物的恢复"现象,是一种植物抗病毒侵染的自然机制,现在已被开发成通过插入目的基因片段的重组病毒抑制植物内源基因表达的遗传技术,用于基因功能分析.VIGS由小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)驱动,siRNA单链与RNA诱导的沉默复合物(RNA induced silencing complex,RISC)结合后,特异性地和与siRNA同源的靶标RNA结合,并降解RNA模板.已有源于15种不同类型病毒的VIGS载体得到开发和应用.在VIGS载体中插入的目的片段、重组VIGS病毒载体的植物导入方法、沉默处理时的寄主生育期、沉默处理后的植物培育条件等均显著影响VIGS的效率.作为一种新型的基因鉴定和功能研究技术工具,VIGS具有无需事先知道目的基因全长序列、获取表型迅速、无需构建转基因植株等诸多优点,已越来越广泛地被应用于植物基因功能研究. 徐幼平 徐秋芳 宋晓毅 张志新 蔡新忠关键词:功能基因组学 一个编码推定的钙依赖磷酸酶催化亚基的番茄全长cDNA序列的克隆及其表达分析 被引量:1 2008年 钙依赖磷酸酶(Calcineurin)作为Ca2+信号传感器中继因子对受Ca2+调节的生物学过程起重要调控作用。本研究克隆了一个番茄全长cDNA序列,该序列与钙依赖磷酸酶催化亚基(Calcineurin A,CNA)序列同源。推定的蛋白产物由315个氨基酸组成,明显短于非植物来源的该类蛋白。该蛋白含有钙依赖磷酸酶类金属磷酸酶中保守的催化作用活性位点基序,以及两个潜在的钙调蛋白结合位点,故暂时命名为LeCAL1(Lycopersicon esculentum calcineurin A like 1)。对CNA序列的分析结果表明,植物与非植物CNA差异明显,在系统进化树中形成距离很远的两大分支。植物CNA中,LeCAL1与拟南芥CNA同源性较高,而与水稻CNA较低。对LeCAL1在番茄中的表达分析结果显示,Cf/Avr介导的过敏性反应的产生诱导LeCAL1基因的表达,表明钙依赖磷酸酶可能在番茄抗叶霉病中起调节作用。 张志新 徐幼平 曹文渊 蔡新忠关键词:番茄 CLADOSPORIUM 8个番茄ACE全长cDNA序列的克隆和分析 被引量:1 2009年 本实验室以前已经克隆了278个Avr/Cf介导的过敏性反应产生与不产生时差异表达的番茄ACEcDNA片段.为了进一步分析这些ACE基因在植物抗病中的功能,本研究通过RACE等方法克隆了其中8个番茄ACE片段的全长cDNA序列,即ACE13,ACE14,ACE19,ACE25,ACE29,ACE36,ACE39和ACE112.其中ACE14,ACE25,ACE29,ACE36和ACE39分别与信号传导,防卫反应,蛋白合成,代谢等相关,而另外3个则功能未知.与番茄EST数据库中相关序列的比对分析后发现,ACE13,ACE25,ACE29,ACE39和ACE112与数据库中对应序列高度相似,但ACE14,ACE19和ACE36则与数据库中对应序列有显著差异,ACE143端有322bp片段延伸,ACE19有不同的3端200bp序列,而ACE36则在5端有132bp的插入序列.这些结果表明运用EST库序列资源时应充分考虑到EST序列的不准确性或者可变剪接产生多种产物的可能性. 宋晓毅 徐幼平 张志新 徐秋芳 蔡新忠关键词:番茄 CLADOSPORIUM ACE 防卫反应 基因克隆