方爱平
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人白细胞介素-10融合表达载体的构建及其在BL21(DE3)pLysE细菌细胞中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论 已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)
- 方爱平杨国成YEShui-qing夏腊菊孙凌聪刘少平
- 关键词：RHIL-10包涵体大肠杆菌
- 重组人白细胞介素10的融合表达及鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 研究重组人白细胞介素10(rhIL-10)载体在大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞中的表达,为进一步研究IL—10在动脉粥样硬化中的作用机制奠定基础。方法 用构建成功的IL-10-PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞,并通过SDS-PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒载体成功载入rhIL-10基因;在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达的蛋白质主要以包涵体形式存在。结论 在IPTG诱导下,重组的IL-10-PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒载体在大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞内成功表达。
- 方爱平杨国成夏腊菊朱汉明
- 关键词：白细胞介素10基因重组大肠杆菌基因表达包涵体
