施海霞
- 作品数：21 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 布氏田鼠封闭群建立及繁殖特性研究被引量：10
- 2009年
- 目的:本研究通过药物净化与随机交配在实验室内建立清洁级布氏田鼠封闭群。方法:采用最大限度避免近交系统同时结合随机交配系统等方法对布氏田鼠进行了封闭群培育,巴氏染色法观察阴道涂片测定动情周期。结果:连续繁殖6代得到清洁级布氏田鼠封闭群。布氏田鼠的发情周期为5天,而布氏田鼠的精子形态具有显著的种属特异性。结论:本实验所建立的布氏田鼠封闭群可作为一种中国特有的实验动物。
- 梁虹潘思丹施海霞高珊张建军宋铭晶
- 关键词：布氏田鼠封闭群动情周期精子
- 心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠的建立和表型分析被引量：2
- 2008年
- 目的建立心脏特异表达小鼠24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠,研究该基因在心脏中表达对小鼠心脏发育,形态和功能维持中的作用。方法RT-PCR法克隆小鼠24-脱氢胆固醇还原酶基因,把Dhcr24基因插入-αMHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24 C57BL/6J转基因小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR和Western Blotting检测基因表达水平,光学显微镜和超声检测不同月龄Dhcr24转基因小鼠心脏的组织结构改变。结果建立了2个品系的心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠。转入的Dhcr24基因在心脏组织的表达水平超过内源性Dhcr24的3倍。心脏组织学和超声检查证实:Dhcr24转基因小鼠的心室壁变厚,心腔变小,但心脏功能保持正常。结论成功建立了心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠,Dhcr24基因在心脏组织的过度表达对小鼠心脏发育和功能维持中的作用需要进一步探讨。
- 宋铭晶董伟全雄志施海霞黄澜张连峰
- 关键词：转基因小鼠心脏超声
- 哺乳类动物二级抗体库的初步建立
- 目的纯化与人类关系密切的32种豢养或野生哺乳动物的一级抗体(IgG),并制备抗32种哺乳动物一级抗体的酶标抗体(HRP-IgG)。方法收集7种食用类动物血清(猪、狗、马、牛、驴、山羊、绵羊、梅花鹿),12种观赏类野生动物...
- 刘先菊林树柱杨帆宋铭晶施海霞全雄志秦川张连峰
- 关键词：哺乳动物IGG
- 文献传递
- 布氏田鼠催产素基因的克隆及通过慢病毒载体转染细胞后的过表达检测
- 2013年
- 目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测。方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1A启动子下游,通过这两个载体转染细胞,分别利用生物发光标记与荧光标记这两种技术示踪OT基因的表达;再通过提取RNA逆转录以及实时荧光定量PCR检测OT基因不同模板转录的拷贝数。结果:成功构建LUC标记和EGFP标记的表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体,进行了真核表达检测,并建立了实时荧光定量PCR的方法。结论:催产素(oxytocin,OT)基因是哺乳动物特有的神经垂体激素,与社会认知行为和社会适应行为有关,为研究该基因的功能奠定基础。
- 周文君施海霞宋铭晶
- 关键词：布氏田鼠催产素荧光素酶绿色荧光蛋白
- 广泛表达人载脂蛋白E3转基因小鼠的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立人载脂蛋白E3(apolipoprotein E3,ApoE3)转基因小鼠,研究该基因在多种组织中表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法RT-PCR法克隆人ApoE3基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转ApoE3基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。通过生化指标分析初步鉴定ApoE3基因的功能。结果建立了2个系的高表达人ApoE3转基因小鼠。结论成功建立了CMV启动子启动的高表达人ApoE3基因转基因小鼠,为进一步探索该基因的功能奠定了基础。
- 宋铭晶全雄志施海霞潘思丹张连峰
- 关键词：转基因小鼠
- 微卫星标记在布氏田鼠封闭群遗传结构研究中的应用被引量：3
- 2015年
- 目的使用微卫星标记分析连续三代布氏田鼠封闭群遗传结构的稳定性。方法使用高盐沉淀法从鼠尾中提取布氏田鼠基因组DNA,将筛选出7对微卫星引物并用荧光标记(Fam),然后对布氏田鼠封闭群连续三代的基因组DNA进行PCR扩增,测序仪检测PCR产物,整理原始数据并对布氏田鼠基因组DNA进行微卫星分析。结果由平均有效杂合度和多态信息含量的分析得出该布氏田鼠种群传代过程中保持着较高而且稳定的杂合度。结论该实验结果说明本实验室布氏田鼠封闭群的遗传结构比较稳定。
- 张曼施海霞宋铭晶
- 关键词：布氏田鼠封闭群微卫星DNA标记
- 不同月龄SPF级布氏田鼠血液学指标与生化指标的比较被引量：1
- 2013年
- 目的:本实验分别对4和12月龄SPF级布氏田鼠进行了血常规和血生化指标的检测,比较不同月龄布氏田鼠间的差异。方法:检测12项血常规指标,24项血生化指标。结果:12月龄布氏田鼠的平均血红细胞体积、红细胞分布宽度、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、血清总蛋白、肌酸激酶、胆固醇、免疫球蛋白、Ca、Na、Cl、K、P以及谷氨酰基转移酶高于4月龄田鼠,而血红蛋白、血小板数、平均血小板比积、平均血红蛋白浓度、血清白蛋白、血糖、肌酐、A/G以及尿素氮低于4月龄田鼠。部分指标在性别间有显著差异。结论:布氏田鼠的血液和生化指标随着月龄增长有显著变化,而且该变化存在性别差异。
- 潘思丹施海霞宋铭晶
- 关键词：SPF级布氏田鼠生化
- 蝙蝠血清IgG的纯化及兔抗蝙蝠IgG酶标抗体的制备被引量：5
- 2008年
- 目的纯化蝙蝠血清IgG,制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体。方法采用亲和层析纯化法纯化蝙蝠血清IgG,SDS-PAGE电泳鉴定蝙蝠IgG纯度。免疫大白兔制备兔抗蝙蝠IgG抗血清,免疫双扩散法测定抗血清效价,亲和层析纯化法纯化抗血清IgG。用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,直接ELISA和Western blot法对兔抗蝙蝠IgG酶标抗体进行工作浓度测定。结果纯化的蝙蝠血清IgG,其SDS-PAGE测定纯度大于95%;免疫大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价为1∶64;用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,其直接ELISA和Western blot工作浓度分别为1∶12800和大于1∶2000。结论制备了蝙蝠血清IgG的抗血清和酶标抗体,为蝙蝠的血清学检测体系提供了技术和资源储备。
- 刘先菊林树柱杨帆宋铭晶施海霞全雄志秦川张连峰
- 关键词：蝙蝠IGGHRP
- 布氏田鼠的实验动物化饲育和主要脏器系数测定被引量：2
- 2010年
- 目的:建立布氏田鼠实验动物化的饲育方法。方法:我们引入布氏田鼠后,采用药物净化法控制其体内外的微生物和寄生虫进行实验动物化,确定了在屏障环境中针对该动物的饲养、配种、麻醉以及输精管结扎的技术流程;并检测了布氏田鼠的主要脏器系数指标。结果:初步建立了布氏田鼠人工饲养的清洁级封闭群。群体内成年雄性布氏田鼠的肝脏、肾脏和脾脏的器官系数与雌性的差异达到显著性水平(P<0.05)。结论:本实验确定的饲育方法为同类鼠种的实验动物化工作提供了参考。
- 潘思丹施海霞梁虹宋铭晶
- 关键词：布氏田鼠实验动物化清洁级脏器系数
- 人造血干细胞人源化小鼠的疝气表型分析
- 2012年
- 目的研究成年雄性人源化小鼠个体出现疝气症状的原因和对人源化小鼠的影响。方法利用显微注射法构建人造血干细胞人源化小鼠,对疝气表型特征、小鼠行为、生理和病理变化进行了研究。结果 2月龄雄性人源化小鼠出现直接性疝气症状,腹股沟区致密结缔组织结构减少可能是疝气形成的主要原因。疝气小鼠同时伴有耐力和运动协调性下降,但疝气对小鼠的繁殖系统无显著影响。结论雄性人造血干细胞人源化小鼠具有显著的疝气症状,其发生机理有待进一步研究。
- 施海霞陈炜邓巍梁虹
- 关键词：造血干细胞疝气
