朱力
- 作品数：69 被引量：120H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 贝氏柯克斯体抑制宿主单核细胞的碳源代谢
- 2010年
- 贝氏柯克斯体是一种专性细胞内寄生的革兰阴性小球杆菌，为Q热的病原体。本文通过比较贝氏柯克斯体感染单核细胞和非感染单核细胞的蛋白表达谱，研究该病原体感染引发宿主细胞表达差异的蛋白。用贝氏柯克斯体I相毒株感染人单核细胞（THP一1），采用等电聚焦和SDS-PAGE双向电泳对感染单核细胞和非感染单核细胞进行比较蛋白质组学研究，用电泳图谱分析软件发现它们之间的差异表达蛋白，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定差异表达蛋白。结果发现，电泳图谱分析发现137个差异蛋白，质谱分析鉴定到15种差异蛋白与细胞生理代谢有关。这些蛋白的表达变化说明贝氏柯克斯体感染单核细胞使宿主细胞碳源代谢受到抑制，由此可能影响单核细胞正常杀菌功能，而有利于贝氏柯克斯体在细胞内的生存。
- 李丽莉朱力温博海高尚先王恒樑陈梅玲
- 关键词：贝氏柯克斯体单核细胞蛋白质组
- 志贺菌rfbA基因突变体的构建
- 2012年
- 目的构建弗氏2a志贺菌301 rfbA基因缺失突变株,初步探究志贺菌脂多糖合成与糖蛋白合成通路是否相关。方法首先用PCR扩增出rfbA基因上下游同源臂,构建含有kan基因的打靶片段,采用λ-Red重组系统对rfbA基因进行缺失,用PCR进行初步验证,然后通过LPS的银染方法进行进一步验证。随后,制备野生株、rfbA缺失突变株的全菌蛋白样品,进行双向电泳后比较野生株301和rfbA缺失株的蛋白表达谱。结果成功构建了301 rfbA缺失突变株。在LPS的银染实验中,rfbA突变株在凝胶中未形成一长串的梯状条带。在双向电泳实验中,野生株和突变株没有明显的蛋白差异点。结论获得了301 rfbA基因缺失突变体,初步认为志贺菌中不存在与脂多糖O-抗原合成相关的蛋白糖基化途径。
- 宋丽牛畅白国旺冯尔玲刘先凯魏华王恒樑熊勇华朱力
- 关键词：志贺菌属脂多糖类基因缺失突变
- 一株脂多糖合成缺陷的无毒福氏志贺氏菌及其构建方法
- 本发明公开了一株脂多糖合成缺陷的无毒福氏志贺氏菌及其构建方法。本发明提供重组菌A，为去除福氏2a志贺氏菌中的毒力大质粒和所述福氏2a志贺氏菌基因组中的O-抗原连接酶编码基因得到的重组菌。本发明的实验证明，本发明首先依据质...
- 王恒樑朱力宋丽冯尔玲刘先凯
- 文献传递
- 一种O抗原糖链延长的甲型副伤寒沙门氏菌及其应用
- 本发明公开了一种O抗原糖链延长的甲型副伤寒沙门氏菌及其应用。该方法包括如下步骤：灭活甲型副伤寒沙门氏菌的O抗原链长控制酶基因cld，得到O‑抗原链长控制酶基因cld缺陷的甲型副伤寒沙门氏菌；使鼠伤寒沙门氏菌O抗原链长控制...
- 吴军孙鹏刘波唱韶红巩新王恒樑朱力潘超冯尔玲
- 文献传递
- 炭疽芽胞杆菌A16R株FtsE蛋白的可溶性表达和纯化
- 2014年
- 目的:构建炭疽芽胞杆菌FtsE蛋白的原核表达载体,实现其在原核表达系统中的可溶性表达,并纯化融合蛋白。方法:用PCR方法从炭疽芽胞杆菌A16R株扩增得到ftsE基因片段,酶切后连接到pET28a原核表达载体,构建重组表达质粒pET28a-ftsE,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,筛选可溶性诱导表达与纯化融合蛋白的条件,以获得高纯度融合蛋白。结果:构建了FtsE蛋白的融合表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;在20℃下,经0.1 mmol/L IPTG诱导3 h表达的产物主要是可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化获得了高纯度的FtsE融合蛋白,经Western印迹检测,目的蛋白表达正确。结论:实现了炭疽芽胞杆菌FtsE蛋白原核表达系统的可溶性表达并获得了高纯度融合蛋白,为后续研究奠定了基础。
- 李强刘先凯冯尔玲朱力王沛王红杨新华赵美玲姜永强王恒樑
- 关键词：炭疽芽胞杆菌
- 弗氏2a志贺菌htrA基因突变体的构建
- 2011年
- 目的:构建弗氏2a志贺菌2457T的htrA基因缺失突变株及HtrA酶失活突变株,以便进一步研究HtrA蛋白的功能。方法:用PCR扩增htrA基因上下游同源臂,构建含有kan基因的打靶片段,采用λ-Red重组系统对htrA基因进行缺失,用PCR进行验证;通过定点突变的方法构建HtrA酶失活突变株,并测序验证。结果与结论:构建了2457T htrA缺失突变株和2457T/htrAFSA酶失活突变株。
- 马姗姗朱力古月华刘先凯冯尔玲王恒樑
- 关键词：缺失突变体定点突变
- 双向BN/SDS-PAGE分离鉴定痢疾杆菌福氏5型M90T株毒力相关膜蛋白复合物被引量：5
- 2011年
- 通过蓝色非变性凝胶电泳(BN-PAGE)比较痢疾杆菌福氏5型野生株M90T和大质粒缺失株M90TΔT的膜蛋白复合物,发现一个野生株特有的复合物,其分子量约为290 kD,命名为M90T-290。通过第二向SDS-PAGE分离M90T-290得到6个蛋白亚基,质谱鉴定为:一个由大质粒编码的毒力蛋白Apyrase(ATP-二磷酸水解酶)和5个染色体编码的蛋白,这些蛋白可能以膜复合物的形式影响毒力蛋白IcsA的单极性分布和痢疾杆菌在细胞间的扩散。这个新发现的毒力相关膜复合物在痢疾杆菌的致病过程中可能发挥重要作用。
- 龚益熊廖翔朱力吴兰周晓巍梁龙黄培堂
- 关键词：痢疾杆菌膜蛋白复合物毒力
- 志贺氏菌Ⅲ型分泌系统及其致病机理被引量：6
- 2010年
- 志贺氏菌的侵袭能力归功于其具有的特殊武器——Ⅲ型分泌系统,这方面的研究一直以来都是病原微生物领域关注的焦点,本文将对近年来志贺氏菌Ⅲ型分泌系统的研究进展进行简要综述。
- 朱力王恒樑
- 关键词：志贺氏菌致病机理
- 一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法，是将重组融合蛋白和脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表达，脑膜炎奈瑟球...
- 吴军潘超孙鹏王恒樑刘波彭哲慧朱力唱韶红巩新冯尔玲王斌曾明
- 文献传递
- 生物法合成伤寒O-糖蛋白结合疫苗及其免疫原性评估被引量：3
- 2015年
- 伤寒由伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)引发,至今在发展中国家仍是备受关注的重要公共卫生问题。文章通过敲除伤寒菌脂多糖合成途径中O-抗原连接酶基因,转入含脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)蛋白糖基化途径中糖基转移酶的表达载体,以及改构的重组铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)外毒素A(r EPAN29)的表达载体,使细胞内能够诱导合成以伤寒O特异性多糖(O-specific polysaccharides,OPS)为目标抗原、以r EPAN29为载体蛋白的伤寒OPS-r EPAN29糖蛋白复合物,并对纯化所得复合物进行了免疫原性评价。ELISA测定血清抗体滴度表明,r EPAN29作为载体蛋白能有效增加糖链的免疫原性,糖蛋白比单独的多糖能诱导产生更好的免疫应答;3次免疫、间隔3周比间隔2周Ig G滴度稍有提高;而免疫过量的糖蛋白,抗O-多糖的血清抗体效价并无提升。文章为生物法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了新思路,理论上也适用于其他革兰氏阴性菌的疫苗研发。
- 彭哲慧潘超孙鹏冯尔玲吴军朱力彭清忠王恒樑
- 关键词：结合疫苗伤寒沙门氏菌合成生物学
