李剑
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省科技攻关计划军队“十一五”科技攻关课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 溶液法豚鼠最大剂量试验方法学探讨
- 目的 探讨溶液法豚鼠最大剂量试验具体方法。方法 应用两次实验比较我们所用方法进行实验的可靠性，根据《刺激与迟发型超敏反应试验》指导，通过改良的弗氏完全佐剂混合方法、皮内注射方法、去毛方法和贴附物固定方法进行实验。
- 陈旭琼尹庆水张余李剑李超赵华福周建华
- 顺铂-自制珊瑚人工骨缓释体系的制备及体外实验被引量：4
- 2007年
- 目的研制顺铂珊瑚羟基磷灰石缓释体,并分析其体外药物缓释对人U-2OS骨肉瘤细胞、骨转移乳腺癌细胞及骨转移前列腺癌细胞的抑制能力。方法通过水热反应合成珊瑚羟基磷灰石人工骨,再通过真空冷冻干燥等处理将顺铂载入形成复合抗肿瘤人工骨缓释体,将复合人工骨浸入模拟体液取得不同时间浸提液。采用四甲基偶氮唑蓝法检测其体外抑瘤作用。结果顺铂分布均匀于复合人工骨孔隙内,除8周浸提液对前列腺癌细胞的抑制率为29.92%外,其余浸提液在体外对肿瘤细胞的抑制率均大于50%。结论该缓释体具有良好的缓释功能,在8周内对骨肿瘤细胞有良好的抑制杀伤作用。
- 杨进城尹庆水林骏黄华扬丁焕文张余李剑
- 关键词：顺铂珊瑚羟基磷灰石药物缓释系统前列腺肿瘤
- 载银珊瑚羟基磷灰石的载银量及其细胞相容性的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的测定载银珊瑚羟基磷灰石(Ag+-CHA)人工骨材料的载银量并观察其与成骨细胞的相容性。方法将自制的珊瑚羟基磷灰石浸泡于相应浓度硝酸银溶液中制得不同浓度的载银人工骨材料,用等离子体质谱分析方法检测各载银材料的载银量;并将小鼠胚胎成骨细胞株(MC3T3-E1)种植于人工骨材料上,用MTT法、倒置相差显微镜、激光共聚焦等观察细胞在材料中的生长情况及其生物相容性。结果 10-2、10-3、5×10-4、10-4、8×10-5、5×10-5 mol/L浓度载银珊瑚羟基磷灰石材料的载银量分别为(4127.67±47.35)、(167.90±11.00)、(83.42±4.51)、(30.20±2.32)、(22.39±4.09)、(15.11±0.55)μg/g;MTT结果表明8×10-5、10-5 mol/LAg+-CHA及其他非载银材料对细胞无明显毒性,可诱导细胞迅速增长。镜下观察发现上述材料上的细胞形态正常,贴壁生长良好。结论低浓度载银珊瑚羟基磷灰石在诱导MC3T3-E1细胞的增殖方面性能优越,有良好的生物相容性,可作为抗感染骨替代材料。
- 张宇尹庆水张余李剑陈旭琼傅栋
- 关键词：珊瑚羟基磷灰石生物相容性MTT比色法银
- 载银珊瑚羟基磷灰石的生物相容性评价被引量：2
- 2011年
- 目的评价负载8×10-5 mol/L银离子后珊瑚羟基磷灰石(CHA)的生物相容性。方法采用珊瑚羟基磷灰石材料与AgNO3及NaCl复合,经真空冷冻干燥后制备成8×10-5 mol/L Ag+浓度的载银珊瑚羟基磷灰石(Ag-CHA),并对健康成年昆明小白鼠、新西兰大白兔、白化豚鼠进行了全身急性毒性实验、热原实验、溶血实验和致敏实验。结果全身急性毒性实验中,负载8×10-5 mol/L银离子的Ag-CHA材料对小鼠无全身急性毒性作用,72 h内小鼠无毒性表现,体重无下降;热原实验中,家兔体温升高数最高分别为0.2、0.2、0.4℃,材料无热原反应;材料的急性溶血率为0.64%,无溶血作用;致敏实验中,实验组豚鼠皮肤无红斑无水肿。结论载银浓度为8×10-5 mol/L的Ag-CHA有良好的生物相容性,无全身急性毒性作用和溶血作用,无热原和致敏原。
- 赵华福张余李剑王捷尹庆水
- 关键词：生物相容性热原实验溶血实验
- 载银珊瑚羟基磷灰石的物性鉴定及抑菌实验被引量：2
- 2007年
- 目的:鉴定自制载银珊瑚羟基磷灰石(Ag-coral hydroxyapatite,Ag-CHA)并评价其抑菌效果。方法:实验于2005-09/2006-05在解放军广州军区广州总医院医学实验室完成。①自制0.01,0.001,0.0001mol/L Ag-CHA。②采用平板扩散法观察0.01,0.001,0.0001mol/L Ag-CHA对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的临床株型的抗菌效果。另将单纯CHA设为对照。每个培养皿4个方位同时放入0.01,0.001,0.0001mol/L Ag-CHA和单纯CHA,培养第3天测量抑菌圈直径。实验评估:①利用扫描电镜和能谱仪观察自制Ag-CHA的微观结构及成分。②观察抑菌圈直径。结果:①Ag-CHA的微观结构及成分:银离子均匀吸附于珊瑚羟基磷灰石的孔隙表面,浓度越高相关银离子吸附的含量越高。②抑菌圈直径:单纯CHA对3种细菌均无抑菌作用。3种浓度Ag-CHA对培养皿中金黄色葡萄球菌(临床株)、绿脓杆菌(临床株)、大肠杆菌(临床株)的抑菌圈直径均大于单纯CHA[0.01mol/L Ag-CHA的抑菌圈直径分别为(1.55±0.03),(2.28±0.08),(2.42±0.03)cm;0.001mol/L Ag-CHA分别为(1.05±0.07),(1.78±0.07),(1.35±0.04)cm;0.0001mol/L Ag-CHA分别为(0.68±0.06),(1.47±0.02),(0.58±0.03)cm],3种浓度间比较差异有显著性意义(F=1250.50,2223.40,8285.66,P<0.001)。不同浓度Ag-CHA间的主效应差异有显著性意义(F=2323.445,P<0.001);金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌间差异有显著性意义(F=422.952,289.693,3461.754,P均<0.001)。结论:初步验证了自制Ag-CHA可以明显抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的临床株型的生长。
- 李剑尹庆水张余杨进城周洪武
- 关键词：抑菌银珊瑚羟基磷灰石生物材料
- 自制复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨体外抗肿瘤实验被引量：5
- 2007年
- 目的:评价自制复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨体外抗肿瘤活性。方法:实验于2006-01/12在解放军广州军区广州总医院骨科及南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室实验室进行。①将南海澄黄海珊瑚礁块制成的珊瑚碳酸钙通过水热反应转变成珊瑚羟基磷灰石人工骨后,再通过真空冷冻干燥等处理将顺铂载入形成复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨,将复合人工骨一部分切开后行电镜扫描及能谱分析,以了解顺铂在人工骨孔隙中的分布及比例。②另精确称取复合人工骨1g浸入避光模拟体液50mL中,37℃,30r/min恒温振荡器中浸泡后,取得不同时间浸提液各10mL,将浸提液过滤除菌分装后再真空冷冻干燥制成粉剂低温保存。③以乳腺癌骨转移原代培养细胞(标本取自广州军区广州总医院手术切除标本)、高转移性肺癌SPCA-1细胞株及前列腺癌骨转移pc-3细胞株(购自中国生命科学院上海细胞所)为实验对象,利用MTT法分别检测对照组(单纯羟基磷灰石浸提液)、复合人工骨2,4,6及8周浸提液的体外抑制肿瘤细胞作用(计算肿瘤细胞的抑制率)。结果:①复合人工骨孔隙内顺铂分布均匀,能谱分析示复合顺铂占人工骨的体质量的10.05%。②复合人工骨2,4,6及8周浸提液体外对乳腺癌细胞的抑制率分别为71.83%,68.34%,63.74%及62.35%;对肺癌细胞的抑制率分别为81.59%,80.14%、74.81%及62.89%;对前列腺癌细胞的抑制率分别为85.04%,84.34%,65.66%及29.92%。除8周浸提液对前列腺癌的抑制率为29.92%为低度敏感外,复合人工骨8周内的浸提液在体外对肿瘤细胞的抑制率均>50%,为高度敏感。结论:自制顺铂珊瑚羟基磷灰石复合人工骨具有良好的缓释功能,其缓释液在8周内可抑制及杀伤肿瘤细胞。
- 杨进城尹庆水林骏李剑黄华扬张余
- 关键词：复合人工骨抗肿瘤生物材料
- 载银珊瑚羟基磷灰石的抑菌活性与细胞毒性研究被引量：2
- 2010年
- 目的 评价负载不同浓度银离子后的珊瑚羟基磷灰石（CHA）对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果与细胞毒性.方法 采用真空冷冻干燥法制备1×10^-2～1×10^-5 mol/L Ag＋浓度的载银CHA（Ag-CHA）,然后采用琼脂平板抑菌法评价Ag-CHA对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,并测量24 h后的抑菌圈直径.采用甲基噻唑基四唑（MTT）法评价8×10^-5mol/L的Ag-CHA在2、4、7d对L929小鼠成纤维细胞的毒性作用. 结果 载银浓度为1×10^-2～8×10^-5mol/L的Ag-CHA对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径均大于12 mm,有明显的抑菌作用;而载银浓度低于8×10^-5mol/L的Ag-CHA无抑菌作用.载银浓度低于8×10^-5mol/L的Ag-CHA对L929细胞无毒性作用;8×10^-5mol/LAg-CHA浸提液作用细胞2、4、7 d后,细胞生长状态良好,相对增殖率均大于90%,毒性等级为0或1级.结论 最佳载银浓度为8×10^-5mol/L,该条件下的Ag-CHA有良好的抑菌作用,且无细胞毒性.
- 赵华福张余李剑张宏斌王捷尹庆水
- 关键词：羟基磷灰石类微生物敏感性试验大肠杆菌
- 载银珊瑚羟基磷灰石的制备及其对小鼠前成骨细胞的体外毒性研究
- 2011年
- 目的探讨负载不同浓度银离子的珊瑚羟基磷灰石(CHA)对小鼠前成骨细胞株体外毒性的影响。方法本实验采用CHA与AgNO3及NaC l复合,经真空冷冻干燥后制备载银CHA,通过扫描电镜和背散射电子探针研究了材料的显微结构,分析了银在材料表面的分布情况。采用能谱分析和X射线衍射鉴定了材料表面上的元素成分和物相组成,并采用MTT法评价了材料对小鼠前成骨细胞株MC3T3-E1的体外细胞毒性。结果载银CHA表面上的银颗粒呈散点分布。材料表面上的元素组成主要为Ca、P、Ag、C、O,且随着AgNO3浓度的升高,材料表明上的银颗粒晶体数量和Ag含量随之增加。载银材料的物相组分主要有CaCO3和羟基磷灰石,并含有少量的Ag2O、AgO和Ag3PO4。当AgNO3浓度≤1×10-4mol/L时,材料对小鼠前成骨细胞无毒性作用。结论负载银离子后的CHA的表面形貌和成分发生变化,且载银浓度小于1×10-4mol/L的材料对小鼠前成骨细胞无毒性作用。
- 赵华福张余李剑王捷尹庆水
- 关键词：羟基磷灰石类成骨细胞细胞毒性
- 载银珊瑚羟基磷灰石的抑菌活性和生物相容性研究
- 赵华福李剑尹庆水王捷张宏斌张余
