李巧霞 作品数:105 被引量:752 H指数:13 供职机构: 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 河北省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
CtBP1基因siRNA真核表达载体的构建及其干扰效果的初步鉴定 目的构建CtBP1基因RNA干扰(RNAi)的真核表达载体,转染人子宫内膜癌耐药细胞株B-MD-C1(ADR+/+),初步鉴定其干扰效果。方法以人CtBP1基因为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,根据GenBan... 艾军 杨红霞 李巧霞关键词:RNA干扰 真核表达载体 转染 文献传递 Th17细胞及其相关细胞因子在胃癌中的表达及临床意义 被引量:13 2015年 [目的]检测Th17细胞及其相关细胞因子在胃癌中的表达,探讨其与胃癌临床病理因素之间的关系。[方法]收集45例胃癌患者和20例健康体检者外周血,分离单个核细胞(PBMC),采用流式细胞分析技术检测Th17细胞比例;收集30例手术切除胃癌组织标本,包括癌组织和非癌对照组织,采用免疫组化法检测胃癌组织内Th17细胞浸润情况;采用荧光定量RT-PCR法检测Th17细胞相关因子维甲酸相关孤核受体C(RORc)、IL-17、IL-23、IL-21、IL-22、IL-1β、TGF-β、IL-6 m RNA表达。[结果 ]与健康对照组相比,胃癌患者外周血中Th17细胞比例显著增多;胃癌组织内可见大量CD4+/IL-17+细胞浸润,而非癌对照组织内极少见CD4+/IL-17+细胞;与非癌对照组织相比,胃癌组织内RORc、IL-17、IL-21、TGF-β、IL-6 m RNA表达水平明显增高,但两组间IL-22、IL-23和IL-1βm RNA表达无显著差异。胃癌组织内RORc m RNA表达水平与IL-17、TGF-β、IL-6 m RNA表达水平呈正相关;并且,RORc m RNA表达水平与患者TNM分期有相关性。[结论]Th17细胞促进了胃癌的发生和进展。 李巧霞 李清靖 刘艳军 陈锦霞 李宏 苏景伟 张超 赵雪峰 单保恩关键词:胃肿瘤 TH17细胞 IL-17 转染4-1BBL基因的胃癌细胞在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用 被引量:2 2006年 目的:观察转染4-1BBL基因的小鼠胃癌细胞株MFC的体内致瘤性及其对小鼠免疫功能的影响。方法:通过脂质体介导以重组质粒pMKITneo和pMKITneo/4-1BBL转染小鼠胃癌细胞株MFC。用RT-PCR法检测目的基因的表达。计数法绘制体外培养细胞生长曲线。将转染前后肿瘤细胞,分别接种于615小鼠背部皮下观察其致瘤性。流式细胞仪测定荷瘤小鼠外周血NK、CD4+T和CD8+T细胞数,并测定荷瘤小鼠肿瘤结节内细胞凋亡率。结果:MFC/4-1BBL细胞中可检测到4-1BBLmRNA表达。转染前后肿瘤细胞的体外生长速度无明显变化。MFC/4-1BBL细胞在小鼠体内的致瘤性较MFC/pMKITneo细胞和野生型MFC细胞明显降低。接种MFC/4-1BBL细胞的小鼠外周血NK细胞及CD8+T细胞数明显增多;其肿瘤结节内细胞凋亡率亦明显增高。结论:转染4-1BBL基因后并未影响MFC细胞的体外生长,但其在小鼠体内的致瘤性明显降低。MFC/4-1BBL细胞可诱导荷瘤小鼠体内CD8+T和NK细胞增殖,而且能促进肿瘤细胞的凋亡。 李巧霞 宋振川 单保恩 付小梅 张静关键词:转染 T淋巴细胞 IL-27的抗肿瘤作用及对裸鼠肿瘤血管生成作用的影响 目的研究IL-27抗肿瘤作用及对裸鼠肿瘤血管生成作用的影响,探讨IL-27的抗肿瘤作用机理。方法IL-27基因转染的人食管癌细胞(Eca109/IL-27)接种于裸鼠腹腔,建立荷瘤裸鼠模型,观察裸鼠生存期。用免疫组化法检... 刘丽华 王士杰 单保恩 艾军 邵丽丽 李巧霞 张超关键词:IL-27 抗血管生成 抗肿瘤 文献传递 4-1BBL基因转染对小鼠体内胃癌细胞生长的影响 被引量:5 2006年 目的观察共刺激分子4-1BBL基因导入小鼠胃癌MFC细胞后在小鼠体内诱导的抗肿瘤效应以及对小鼠免疫状况的影响。方法用脂质体法把pMKITneo/4-1BBL和pMKITneo质粒导入615小鼠胃癌细胞MFC内,再用MFC、MFC/pMKITneo和MFC/4-1BBL细胞分别接种615小鼠,观察其成瘤情况,并测定肿瘤细胞的凋亡率及外周血的CD4^+、CD8^+T细胞和NK细胞的含量。结果4-1BBL基因转染后的胃癌MFC细胞在615小鼠体内成瘤所需的时间长、瘤体的重量轻;且MFC/4-IBBL组的癌细胞凋亡率(22.45±4.11)%明显高于MFC组(18.47±3.34)%及MFC/pMKITneo组(17.87±4.04)%(P<0.05);MFC、MFC/pMKITneo组小鼠外周血CD8^+T、NK细胞数明显低于正常对照组和MFC/4-1BBL组(P<0.05),且MFC、MFC/pMKITneo两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论4-1BBL基因导入胃癌MFC细胞后能够提高荷瘤机体的免疫能力、延缓肿瘤的发生、抑制肿瘤的发展、促进肿瘤细胞的凋亡。 宋振川 李勇 李巧霞 王贵英 赵群 焦志凯 张志栋关键词:胃癌 基因转染 肿瘤免疫 中药五加皮提取成分抗肿瘤活性作用机理研究 被引量:17 2005年 目的研究五加皮提取成分(Acanthopanaxgracilistylusextract,Age)对肿瘤细胞的作用机理。方法采用〔3H〕TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb(retinoblastoma)、Cdk(cyclindependentkinases)等酶类的影响。结果体外细胞活力试验证明,Age仅抑制肿瘤细胞增殖,并不导致细胞死亡。在Age的作用下,肿瘤细胞增殖停止在细胞周期的G0/G1期,而未见直接的细胞毒效应。Age可诱导Rb、Cdk2和Cdk4表达降低,使细胞停止增殖。结论Age对肿瘤细胞的作用机制是通过调节控制细胞周期的酶类而发挥作用的。 单保恩 付小梅 华正祥 李巧霞 梁文杰 刘冀琴 张华 刘刚叁关键词:细胞周期 RB CDK 抗肿瘤机制 抗肿瘤 五加皮 活性作用 T细胞与类风湿性关节炎 被引量:15 2011年 类风湿性关节炎(RA)是一种慢性、炎症性自身免疫性疾病,发病机制非常复杂,至今尚未阐明。尽管多种免疫细胞和分子被证实参与了。RA的关节炎症反应和组织破坏,但抗原特异性T细胞的激活始终被认为是RA发病起始和进展的中心环节。不同亚群T细胞在RA发病中发挥不同作用,以往认为,自身抗原诱导的促炎性Th1细胞活化是RA发病的主要因素。然而,有关具有特定功能的T细胞亚群,如调节性T细胞(Tr)和新发现的Th17细胞的新近研究结果提示T细胞在RA发病和进展过程中可能具有更广阔的作用。因而正确理解不同亚群T细胞在RA发病机制中的作用对探索治疗RA的新策略、研制新药物等具有十分重要的意义。 李巧霞 丛斌 单保恩关键词:类风湿性关节炎 T细胞 辅助性T细胞 调节性T细胞 白细胞介素27转染人食管鳞癌细胞在裸鼠体内诱导抗肿瘤免疫应答的研究 目的研究IL-27基因转染人食管鳞癌Eca109细胞后在裸鼠体内诱导机体产生免疫反应及抗肿瘤效应的能力。方法1.以逆转录病毒为载体采用基因转染的方法,经G418筛选后建立稳定表达IL-27基因的人食管鳞癌细胞株(Eca1... 刘丽华 王士杰 单保恩 艾军 邵丽丽 李巧霞 张超关键词:IL-27 基因转染 抗肿瘤 文献传递 CD4^+CD25^+FOXP3^+T细胞在人脑星形胶质瘤中的表达和意义 2011年 目的:观察调节性T细胞在星形胶质瘤患者体内的表达情况,观察其与星形胶质瘤发展的关系。方法:收集河北医科大学第四医院神经外科在2008年9月至2010年6月期间收治的星形胶质瘤患者,共92例,其中男性54例,女性38例,平均年龄51.4岁,均为初次发病。收集8例行颞叶切除术的癫痫患者为对照组。应用流式细胞术检测观察CD4^+CD25^+F0XP3^+调节性T细胞(Treg)在胶质瘤组织中及患者外周血中的浸润情况,应用免疫酶联反应方法(ELISA)测定转化生长因子β1(TGFβ1)在外周血中的表达,应用SPSSl3.0软件进行统计学分析处理。结果:星形胶质瘤患者外周血(9.34±2.13)%和肿瘤组织(24.17±2.54)%中的Treg细胞明显增多,均显著高于对照组(0.67%±0.12%,24.17%±2.54%,P<0.05),并且Treg细胞的含量随着肿瘤级别的升高而增加,WH0Ⅳ级患者外周血和肿瘤组织中的Treg细胞含量(8.34%±2.13%,35.45%±2.47%)明显高于WH0Ⅲ和WH0Ⅱ级(P<0.05)。ELISA结果显示:星形胶质瘤患者外周血中TGFβ1的含量明显增高,并与外周血中的Treg细胞的数量明显呈正相关(r=0.564,P=0.001)。结论:Treg细胞在星形胶质瘤患者的外周血和肿瘤组织的浸润明显增多,并与肿瘤的恶性程度有关,其数量的增长与TGFβ1的表达相关。Treg细胞的增多能够抑制机体抗肿瘤免疫,促进了星形胶质瘤的发展,其具有成为胶质瘤免疫治疗靶点的潜在价值。 刘英姿 单保恩 宋杨英 李巧霞 张磊 张学新关键词:胶质瘤 CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞 肿瘤浸润淋巴细胞 外周血单个核细胞 CtBP1特异性shRNA真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞多药耐药的影响 目的构建CtBP1特异性小发夹RNA(shRNA)真核表达载体并检测其对肿瘤细胞多药耐药的影响。方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其插入Pgenesil-1质粒,限制性酶切和基... 李巧霞 单保恩 艾军 张超关键词:多药耐药 多药耐药基因 文献传递