李金丫
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 表没食子儿茶素没食子酸酯对食管癌细胞生长的抑制作用及机制研究被引量：5
- 2014年
- 目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对食管癌细胞Eca109端粒酶活性及细胞凋亡的影响,探讨EGCG对食管癌细胞生长的抑制作用及其机制。方法 TRAP-PCR银染法检测30例不同食管组织标本(正常组织、癌旁组织、癌组织)的端粒酶活性。用不同浓度(0、25、50、100、200、400mg/L)EGCG作用于Eca109细胞,24、48、72h后采用MTT方法检测细胞增殖抑制率。用不同浓度(0、100、200、300mg/L)EGCG作用于Eca109细胞,24、48、72h后采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并采用TRAP-PCR银染法检测细胞端粒酶活性。结果 TRAP-PCR银染法检测显示,食管癌组端粒酶阳性率(86.67%,26/30)明显高于癌旁组(13.34%,4/30)和正常食管组(0.00%,0/30,P<0.05)。MTT检测结果显示,不同浓度EGCG作用于Eca109细胞后均表现出细胞生长抑制作用,且具有时间和剂量依赖性。EGCG作用于Eca109细胞后可导致细胞凋亡率增加及端粒酶活性降低,且具有时间和剂量依赖性。结论 EGCG可抑制Eca109细胞端粒酶活性,诱导细胞凋亡,从而起到抑制食管癌细胞生长的作用。
- 刘亮左静李金丫左连富
- 关键词：食管肿瘤端粒末端转移酶
- 青蒿琥酯逆转裸鼠种植食管癌耐药作用研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)与食管癌多药耐药的关系以及青蒿琥酯(Art)逆转食管癌多药耐药的作用机制。方法将食管癌多药耐药细胞Eca109/ABCG2接种于裸鼠皮下,建立荷瘤裸鼠动物模型。裸鼠皮下成瘤后用药,经腹腔给予Art和(或)阿霉素(ADM),分为Art高、低剂量组(50、25mg/kg Art),ADM组(1mg/kg ADM)和ADM+Art高、低剂量组(1mg/kg ADM+50、25mg/kg Art),对照组给予生理盐水。停药后第2天处死裸鼠,剥离瘤结节,网搓法制备单细胞悬液。采用流式细胞术检测皮下种植瘤细胞凋亡率,细胞ABCG2蛋白表达及细胞内ADM含量。结果成功建立Eca109/ABCG2种植瘤裸鼠模型,1周内成瘤率为100%。与对照组比较,ADM+Art高、低剂量组皮下种植瘤细胞凋亡率显著增加(P<0.05),细胞中ABCG2蛋白表达量显著降低(P<0.05),ADM含量显著增加(P<0.05)。结论 ABCG2参与了食管癌多药耐药的形成,Art可通过降低食管癌细胞中ABCG2的表达从而逆转食管癌耐药作用。
- 刘亮左连富李金丫郭建文王静
- 关键词：青蒿素类三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
- 食管癌耐药皮下移植瘤裸鼠模型的建立
- 2012年
- 目的建立食管癌耐药裸鼠模型及探讨食管癌耐药机制。方法 4周龄的BALB/c nu/nu裸小鼠36只,随机分为6组,左前肢肩胛下皮下分别接种食管癌细胞Eca109及食管癌耐药细胞Eca109/ABCG2,建立裸鼠皮下移植瘤模型。成瘤后腹腔注射阿霉素(ADM)1、4 mg/kg。RT-PCR方法检测移植瘤细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达,流式细胞术检测移植瘤细胞中ABCG2蛋白、凋亡及细胞中ADM含量。结果成功建立裸鼠食管癌耐药细胞移植瘤模型,皮下接种细胞1周后成瘤,成瘤率100%。注射ADM,接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤体积、质量和ABCG2表达量显著高于接种Eca109细胞移植瘤(P<0.05),但细胞凋亡率及细胞内ADM含量显著降低(P<0.05)。结论接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤模型是具有ABCG2耐药表型的食管癌耐药动物模型。
- 刘亮左静左连富郭建文李金丫
- 关键词：食管鳞状细胞癌流式细胞术多药耐药三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
- 青蒿琥酯逆转食管癌Eca109/ADM细胞对多柔比星的耐药被引量：6
- 2011年
- 目的:研究青蒿琥酯(artesunate,Art)逆转食管癌细胞Eca109/ADM对多柔比星(doxorubicin,ADM)的耐药作用及其机制。方法:实验分为生理盐水(normal saline,NS)对照组(NS组)、Art组(0.1μmol/L)、ADM组(0.2μg/ml)和Art+ADM联合组。Art、ADM、Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞内ADM的含量及细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2)蛋白的表达量,Western blotting检测细胞中ABCG2蛋白表达水平。结果:Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,细胞的凋亡率[(12.89±0.87)%]显著高于Art组[(1.58±0.12)%]、ADM组[(6.55±0.90)%]及NS组[(1.44±0.10)%](P<0.05),Art可提高Eca109/ADM细胞对ADM的敏感性。流式细胞术检测结果显示,Art+ADM组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白表达量(644.60±3.21)显著低于ADM组(659.15±4.59)及NS组(658.14±6.88)(P<0.05),但与Art组(644.31±3.96)相比无显著差异(P>0.05)。Western blotting检测结果与流式细胞术结果一致,Art组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白的表达水平为(0.70±0.02),与对照组的(0.80±0.03)相比显著降低(P<0.05),Art+ADM组的ABCG2蛋白(0.71±0.04)与单独应用ADM组的ABCG2蛋白(0.81±0.05)相比,ABCG2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。Art+ADM组Eca109/ADM细胞内ADM的含量(848.02±5.04)显著高于单独应用Art组(763.29±4.02)、ADM组(800.25±3.84)及NS组(763.88±2.03)(P<0.01)。结论:Art可以降低食管癌Eca109/ADM细胞内ABCG2蛋白表达,增加ADM的含量,逆转肿瘤细胞对ADM的耐药。
- 刘亮左静李金丫郭建文左连富王静刘江惠
- 关键词：青蒿琥酯多柔比星耐药逆转
- 食管癌高发区人群咬检组织中hTERT蛋白的表达及其临床意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨肿瘤相关基因端粒酶逆转录酶(hTERT)基因蛋白在食管癌高发区人群中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法观察122例咬检组织的端粒酶hTERT表达情况,其中正常36例,不典型增生50例,食管癌36例。结果正常的食管组织hTERT阳性表达率为11.1%,不典型增生组织的阳性表达率为44.0%,食管癌组织的阳性表达率为88.9%。结论端粒酶在食管癌组织中的阳性表达显著高于食管不典型增生组织和正常组织,提示端粒酶的异常表达与食管癌的发生与发展有关。
- 李金丫左静刘亮郭建文左连富王静刘江惠
- 关键词：食管癌端粒酶免疫组化
