杜东霞
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学医学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 噬菌体抗体库淘筛方法的比较研究被引量：1
- 2009年
- 目的:比较噬菌体抗体库的淘筛方法,从而为得到亲和力高、特异性强的抗体克隆打下基础。方法:在包被好抗原的2个细胞培养瓶中加入噬菌体抗体库,一个采用先直接加入宿主菌感染后,再将培养瓶内残留结合物洗脱中和后感染的方法,另一个则采用先洗脱并中和的噬菌体感染宿主菌,与抗原结合的剩余的噬菌体再行直接感染,将2种方法所得到的感染菌和援救所得的噬菌体进行CFU和PFU测定。结果:从实验的数据中可以发现,采用第一种方法所得次级库的容量要大于后一种方法所得的初级库。结论:噬菌体抗体库的淘筛方法必须按照实验的具体情况进行选择,如果要求严谨度适中,则可以采用直接感染的方法淘筛。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：噬菌体抗体库CFUPFU
- 抗体库构建中影响库容量的因素探讨被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨在噬菌体抗体库的构建过程中,提高转化效率的最优条件。方法:通过改变感受态细菌的浓度、电击时间的长短以及连接产物的纯化方法,从而找出最佳条件。结果:实验证明:在仪器的电压、电阻、电容等条件设定不变的情况下,感受态细菌的OD600在0.4左右,电击时间为2 s,转化效率最高。结论:连接产物进行酚-氯仿抽提后转化效率也会大大提高。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：电转化
- 辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展被引量：3
- 2009年
- 噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白相融合,展示于噬菌体表面来构建蛋白质或多肽文库,并从中筛选目的蛋白、多肽或抗体的基因工程高新技术。噬菌粒/辅助噬菌体系统是最常用的噬菌体展示系统,此系统中辅助噬菌体对噬菌粒的复制和组装发挥着至关重要的作用。本文结合当今该领域的最新研究动态,概述了噬菌粒和辅助噬菌体双基因组系统,着重介绍了不同辅助噬菌体的特点及其突变机制,并对其应用前景进行了展望,以期为该技术的进一步完善提供一定的借鉴作用。
- 杜东霞张冉
- 关键词：噬菌体展示辅助噬菌体
