江杰元
- 作品数：105 被引量：206H指数：9
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 裂谷热病毒N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量：1
- 2021年
- 裂谷热(RVF)是由裂谷热病毒(RVFV)引起的一种人兽共患传染病,主要由蚊媒传播。该病主要感染反刍动物,可引起流产和新生胎儿死亡,人类对该病也易感,严重者可导致死亡。对于无RVF的国家,建立相应的病原学与血清学检测方法对于防止该病传入至关重要。为了建立基于病毒N蛋白的诊断技术,本研究构建了裂谷热病毒N基因原核表达质粒pET-28a-N,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot检测蛋白的表达,重组蛋白分子量约为29 kDa,主要以上清液形式存在。大量表达并纯化重组蛋白,用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并对其进行鉴定。采用间接ELISA和ID Vet公司阻断ELISA试剂盒检测免疫小鼠抗体效价及特异性,并用Western blot检测多克隆抗体反应性。结果表明,免疫后的抗体效价迅速升高,最终可达51200以上;阻断ELISA和Western blot检测结果表明,制备的多克隆抗体具有良好的反应性与特异性。通过3次亚克隆最终获得2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分泌的单克隆抗体均可与重组蛋白反应,重链均为IgG2a型,轻链为κ型。本研究为RVF诊断方法的建立奠定了基础。
- 傅欣玲张聪张纹纹李文良杨蕾蕾毛立李基棕江杰元
- 关键词：N蛋白原核表达单克隆抗体
- 牛猪轮状病毒血清分型及其抗原性比较被引量：4
- 1992年
- 利用双向交叉中和试验对我国4株牛和4株猪轮状病毒做了血清分型,并比较了它们与国外参考毒株牛NCDV、猪OSU、猴SA-11和人Wa株轮状病毒之间的抗原相关性。结果,我国3株黄牛轮状病毒(HN-7、BRV007和BRV014),1株奶牛轮状状病毒(BRV6555)与牛参考毒株NCDV抗原性无差异,同属轮状病毒血清6型(牛轮状病毒血清1型或NCDV型)。4株猪轮状病毒则可分为两个型,溧99能被OSU抗血清高滴度中和,故划归轮状病毒血清5型(猪轮状病毒血清1型);而宁71、南86、和江150等3个毒株与溧99抗原性有明显差异,且与OSU抗血清无反应性,故暂列为猪轮状病毒血清2型。全部牛猪轮状病毒与猴SA-11、人Wa之间无抗原交叉。
- 何孔旺林继煌丁再棣何家惠江杰元侯继波
- 关键词：轮状病毒血清型
- 淮北地区幼犬腹泻症调查被引量：1
- 1992年
- 1988年以来,在安徽省滩溪、宿县等淮河以北地区流行的幼犬病毒性腹泻症,主要发生于2～5月龄幼犬(594/731),发病集中于秋冬季节。粪样犬细小病毒HA阳性检出率为58.33(21/36),9/16的粪样电镜观察到典型的细小病毒颗粒。
- 张德群唐兆新周振东张秀戴宏勤江杰元何孔旺
- 关键词：腹泻症细小病毒
- 山羊Viperin基因的表达及其抗病毒作用
- <正>引言干扰素是先天免疫的重要组成成分,其中I型干扰素可以诱导产生多达300种的干扰素刺激基因（ISGs）[1]。Viperin是近年来新发现的一种ISG,已有研究证明它对多种病毒具有抗病毒活性[2]。最近有对猪Vip...
- 李文良吴铖楠毛立李基棕郝飞杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 文献传递
- 山羊副流感病毒3型JS2013分离株对豚鼠致病性的研究
- 为了探究CPIV3 JS2013分离株的致病性,本试验采用豚鼠研究该病毒在动物体内的复制及机体组织病理损伤等情况。结果表明:攻毒后2天攻毒组的豚鼠开始出现临床症状。RT-PCR检测攻毒后第3天到第7天出现病毒血症,攻毒后...
- 王钟毓李文良郝飞毛立杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 文献传递
- Viperin对猪瘟病毒的抑制作用研究
- 引言 干扰素是先天免疫的重要组成成分,其中Ⅰ型干扰素与特异受体结合后可以诱导产生多达300种的干扰素刺激基因(ISGs).Viperin是近年来新发现的一种ISG,已有研究证明它对多种病毒具有抗病毒活性,如HCMV、流感...
- 李文良毛立杨蕾蕾郝飞张纹纹江杰元
- 1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析被引量：3
- 2014年
- 对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。
- 刘霞毛立李文良杨蕾蕾张纹纹魏建忠江杰元
- 一种山羊副流感病毒3型JS14-2株及其应用
- 本发明属于兽用生物制品领域，公开了一种山羊副流感病毒3型JS14‑2株及其在制备灭活疫苗中的应用。分离纯化获得山羊副流感病毒3型JS14‑2病毒株后，将病毒液经离心、甲醛灭活，加入佐剂乳化制备获得灭活疫苗。本发明提供了一...
- 李文良毛立郝飞李基棕杨蕾蕾张纹纹王钟毓孙敏刘茂军江杰元
- 文献传递
- 江苏部分地区羊群边界病流行情况调查被引量：7
- 2013年
- 本实验室从安徽某羊场发生腹泻的山羊病料中检测分离到边界病病毒（borderdiseasevirus，BDV），证明BDV在我国羊群中存在。为了进一步了解BDV在江苏羊群的流行情况，本研究收集江苏部分地区发生腹泻和健康羊群的血清和组织样品，采用RT—PCR方法进行检测，并对阳性样品进行病毒的分离鉴定，测定分离毒株5’-UTR基因片段，与其他已报道的毒株进行同源性比较并绘制进化树。结果表明有27．4％（29／106）样品呈阳性，不N羊场BDV阳性率为0～67％，共分离到4株不同的BDV毒株，它们之间的同源性为73．9％～95．6％，而与其他BDV毒株的同源性为66．2％～91．6％。进化分析表明AH12-02与其他各毒株均较远，形成单独的分支，另3个毒株与BDV3型毒株关系最近。采用ELISA试剂盒对血清样品BDV抗体进行检测发现不同羊场抗体阳性率存在较大差异（0～100%），还有抗体阴性持续感染个体的存在。以上结果丰富了我国BDV分子流行病学数据，为进一步探索BDV在我国羊群中的流行情况奠定了基础。
- 李文良毛立赵永前孙银华王清益丁永龙杨建泉王秋生缪忠明江杰元
- 关键词：山羊流行病学PCR抗体
- A组轮状病毒单克隆抗体特性鉴定及临床初步应用被引量：4
- 1990年
- 本文报道了A组RV McAb的特性鉴定及临床初步应用。用从河南省腹泻犊牛粪便中分离的HN-7毒株(RV)抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术获得2株分泌A组RV特异性McAb的杂交瘤细胞系。经鉴定,所获2个McAb(2C7.3C9)与A组RV第1血清型Wa株、第3血清型SA-11株,第6血清型NCDV株以及从国内猪、牛粪便中分离的4株未分型毒株的间接ELISA效价达10^(-5)～10^(-6),但与这7R-V毒株的血凝抑制滴度≤1:8,中和效价≤1:100,表明,这2个McAb是针对A组RV共同抗原的。琼脂糖双向扩散结果,2C7为小鼠IgG1亚类,3C9待鉴定。用RVMcAb建立的单夹心ELISA技术测定162例人,牛腹泻粪样,阴阳性总符合率与常规 ELISA相比较,为98.8％(160/162)。
- 杨毓华李保全何孔旺林继煌江杰元
- 关键词：轮状病毒腹泻单克隆抗体
