汤仁仙 作品数:125 被引量:316 H指数:9 供职机构: 徐州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
2种方法检测抗核抗体对系统性红斑狼疮诊断价值的比较 被引量:1 2009年 目的比较免疫金银法和免疫荧光法检测抗核抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值。方法对SLE和其余6种自身免疫性疾病患者及健康人血清采用免疫金银染色法和间接免疫荧光法检测抗核抗体,并比较分析两种方法检测抗核抗体对SLE诊断的敏感性、特异性、正确率、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数等指标。结果免疫金银法和免疫荧光法检测抗核抗体阳性率为:SLE患者100%和96%、类风湿关节炎患者10%和36%、强直性脊柱炎患者2%和13%、系统性硬皮病患者13%和73%、干燥综合征患者27%和82%、皮肌炎患者12.5%和37.5%、血管炎患者0%和17%、健康人0%和0%。统计分析显示免疫金银染色法检测抗核抗体对SLE诊断的特异性、正确率、阳性预测值及Youden指数较免疫荧光法高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论免疫金银法检测ANA对SLE具有高度的敏感性和特异性,因此临床上采用免疫金银法检测ANA用于对SLE的辅助诊断更有价值。 秦苏萍 杜文平 汤仁仙关键词:免疫金银法 荧光抗体技术 抗核抗体 免疫组织化学 红斑狼疮 CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定 被引量:12 2014年 目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。 秦苏萍 李慧 李小翠 王晓天 汤仁仙 孙德旭关键词:滑膜成纤维细胞 原代培养 关节炎 JNK磷酸化Bad在脑缺血神经元凋亡中的作用 被引量:1 2014年 目的探讨JNK磷酸化Bad在大鼠缺血性神经元凋亡中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SP600125组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测大鼠脑缺血复灌1 d海马CA1区神经元Bad与14-3-3及Bad与Bcl-Xl的结合、Bad丝氨酸128位磷酸化[p-Bad(S128)]水平、Caspase-3蛋白表达情况。结果与缺血复灌组相比,SP600125组海马CA1区神经元Bad与14-3-3的结合明显增高,Bad与Bcl-Xl的结合、p-Bad(S128)、Caspase-3表达显著减少(均P<0.05)。结论 JNK介导的Bad(S128)磷酸化在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。 王晓天 刘晓梅 尤红娟 李小翠 秦苏萍 汤仁仙 宋远见关键词:BAD JNK丝裂原活化蛋白激酶类 凋亡 脑缺血 201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎的保护机理 2006年 目的探讨201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的保护作用及机制。方法建立大鼠自相期抗GBM肾炎模型。实验分3组:201A处理组(0.42g/kg,灌胃)、未治疗肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射兔抗大鼠GBM抗血清后即刻给予201A中药合剂,对照组则给予等量的水。定期测定大鼠尿蛋白、血清IL-1,并观察肾组织病理学改变。结果肾炎对照组鼠注射抗血清后于第4天即出现异常蛋白尿,其后维持高水平;肾小球内可见细胞数明显增加和新月体形成,GBM呈不规则增厚,肾小管内大量蛋白管型;各时间点IL-1含量均高于正常对照组。而用201A中药合剂处理后大鼠尿蛋白水平、肾小球的细胞总数及新月体较肾炎对照组明显减少;GBM病变明显减轻;IL-1含量也均低于肾炎对照组鼠。结论201A中药合剂对大鼠GBM肾炎有保护作用,其机制可能与抑制免疫功能有关。 张芳 汤仁仙 孙伟 刘晓梅 周峰关键词:中草药 Experimental Study on Prevention and Treatment of Rat Passive Hermann Nephritis (PHN) with Ligustrazine 被引量:1 2003年 Objective: To explore the effects of ligustrazine on proteinuria, serumcreati-nine, urinary thromboxane A_2(TxA_2), metabolism of prostacyclinI_2(PGI_2)―6-keto-PGF_(1α), and renal pathological changes of SD rats with passive Hermannnephritis (PHN). Methods: The PHN model was induced by intravenous injection of rabbit anti-ratrenal tubular epithelial antigen (Tub―Ag) an-tiserum to SD rats. I. P. administration ofligustrazine to rats was given every 2 d for 1 to 5 weeks. The proteinuria, creatinine, TxA_2 and6-keto-PGF_(1α) were measured by sulfosaticylic acid, picric acid, and direct radioimmunoassayrespectively. The renal pathological changes were observed under light microscope, electronicmicroscope and by direct immunofluorescence staining rabbit and rat IgG. Results: The PHN ratstreated with ligustrazine had significantly less proteinuria, serum creatinine, urinary TxA_2 andpathological changes of kidney, and more urinary 6-keto-PGF_(1α) than those without administrationof ligustrazine. Conclusion: Ligustrazine decreases proteinuria, urinary TxA_2, and renal tissueinjury and increases urinary 6-keto-PGF_(1α). These data indicate that ligustrazine may modulatethe balance of TxA_2 and PG I_2 in rat PHN model and can be used for preventing and treatingmembranous glomerulonephritis. 王迎伟 汤仁仙 董红燕关键词:LIGUSTRAZINE THROMBOXANE PROSTACYCLIN CBL应用于医学微生物理论教学的初步探索 被引量:10 2014年 针对医学微生物学的课程特点,对五年制临床医学的部分学生采用CBL教学,并比较CBL与LBL的教学效果。结果表明,CBL组学生的表达能力、自主学习能力、创新思维能力、团队协作能力明显提高,可为医学微生物学教学改革提供借鉴。 尤红娟 刘晓梅 李小翠 孙伟 郑葵阳 刘莹 汤仁仙关键词:CBL 医学微生物学 教学改革 甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷大鼠足细胞损伤的保护作用 被引量:2 2015年 目的:研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)大鼠足细胞损伤的保护作用。方法:建立PAN肾病大鼠动物模型,给予他克莫司和SPE干预治疗,分别在第5、10、15、21天留取血尿标本,同时采用肾组织病理观察大鼠肾小球组织形态学改变,透射电镜观察肾小球足细胞超微结构改变,并分别从mRNA和蛋白水平分析足细胞裂孔膜蛋白的表达水平。结果:(1)除正常组外,各组大鼠尿蛋白定量第5天时已明显升高,第10天上升至高峰,而后开始下降,第15天时仍明显高于正常。给予药物干预后,可降低大鼠的尿蛋白排泄量,且阳性对照组与SPE高剂量组降低尿蛋白的程度较为接近。(2)光镜下未见肾小球形态异常。电镜结果显示第5天时已出现肾小球足细胞足突融合,第10天时足突融合最明显,随后开始恢复,第21天基本恢复正常;SPE高剂量组和阳性对照组的足突融合程度较轻。(3)阳性对照组和SPE组大鼠的nephrin、podocin蛋白表达水平高于模型对照组。第5天时各组大鼠蛋白表达低于正常,第10天时下降更为明显,第15天蛋白表达已开始回升,至第21天时恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组大鼠蛋白表达均明显高于其余三组。(4)大鼠nephrin、podocin的mRNA表达量在第5天时已下降,至第10天明显下降至最低水平,而后开始上升,直至第21天恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组的表达水平明显高于其他各组(P<0.05)。结论:SPE对PAN大鼠肾小球足细胞损伤有一定的保护作用,可降低PAN大鼠蛋白尿。 戴德淑 刘翔 杨阳 周璇 骆晓梅 袁飞 蔡青 赵勇 王增慧 李向阳 颜超 汤仁仙 任红旗关键词:嘌呤霉素氨基核苷 足细胞 乙型肝炎病毒X基因促TRAIL诱导Huh7细胞凋亡的机制 被引量:2 2012年 目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因(HBX)促肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducing ligand,TRAIL)蛋白诱导人肝癌细胞Huh7凋亡的机制。方法应用脂质体转染法将pcDNA3.1-HBX、pcDNA3.1分别转染Huh7细胞,建立稳定表达HBX的细胞模型Huh7-HBX和空载体对照细胞模型Huh7-3.1;运用TRAIL蛋白分别作用Huh7-HBX细胞、Huh7-3.1及Huh7细胞后,采用CCK8、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot检测死亡受体4(deathreceptor 4,DR4)和死亡受体5(death receptor 5,DR5)的表达情况;分光光度法检测细胞caspase8和caspase3活性。结果 RT-PCR及Western blot证实成功构建细胞株Huh7-HBX;CCK8和流式细胞术检测结果均显示Huh7-HBX细胞的凋亡率明显高于Huh7-3.1及Huh7(P<0.05);Western blot显示Huh7-HBX细胞的DR4、DR5的表达量明显高于Huh7-3.1及Huh7细胞(P<0.05);caspase活性检测结果显示,Huh7-HBX细胞caspase8及caspase3的活性明显高于Huh7-3.1及Huh7(P<0.05)。结论 HBX能够通过上调Huh-7细胞表面死亡受体DR4、DR5的表达,进而促进TRAIL蛋白诱导的细胞凋亡,为进一步研究HBX的促凋亡机制提供实验依据。 尤红娟 刘雯 赵金金 徐志辉 李向阳 刘转转 汤仁仙 郑葵阳关键词:乙型肝炎病毒X基因 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡 初步探讨乙型肝炎病毒X蛋白激活PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞增殖和迁移的影响 被引量:2 2012年 目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路对肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法利用稳定表达HBx基因的肝癌细胞模型HepG2-HBX、Huh-7-HBX,运用阻断剂LY294002阻断P13K/Akt信号通路后,采用Westernblot方法分析HepG2-HBX和Huh-7-HBX细胞中P~Akt蛋白的表达水平的情况;采用CCK~8增殖实验和划痕愈合实验观测HepG2-HBX和Huh-7~HBX细胞的增殖和迁移能力。结果与阴性对照肝癌细胞相比,稳定转染HBx基因的肝癌细胞中的P—Akt蛋白的表达增多(P〈0.05),运用阻断剂LY294002阻断P13K信号通路后,稳定转染HBx基因的肝癌细胞内的P~Akt蛋白表达降低(P〈0.05)。CCK-8增殖实验和划痕愈合实验结果均显示,与阴性对照肝癌细胞相比,稳定转染HBx基因的肝癌细胞的增殖能力和迁移能力增加(P〈0.05)。经阻断剂LY294002阻断P13K/Akt信号通路后,稳定转染HBX的肝癌细胞的增殖和迁移能力减弱(P〈0.05)。结论HBx可通过激活19/3K/Akt信号通路促进肝癌细胞增殖和迁移。 胡丽娜 孔凡运 尤红娟 李向阳 党景东 刘雯 汤仁仙 郑葵阳 陈明关键词:乙型肝炎病毒X蛋白 PI3K/AKT 肝癌细胞 增殖 迁移 华支睾吸虫感染FVB小鼠的试验研究 被引量:4 2016年 为了观察华支睾吸虫感染FVB小鼠肝脏组织病理变化,将12只健康雌性FVB小鼠随机分成2组,分别为正常组与感染组,每组6只。感染组小鼠经口灌饲45个华支睾吸虫囊蚴。于感染后25d用NaOH消化法检测粪便虫卵阳性率,感染后第112天收集肝脏组织,进行HE染色及Masson染色观察肝脏病理变化情况;收集外周血,ELISA检测血清中华支睾吸虫特异性IgG抗体。虫卵检查结果显示,感染组小鼠在感染后25d检查到虫卵,肉眼观察小鼠肝小叶边缘有白色结节样病变,肝脏表面有白色透明水泡。感染组小鼠血清中华支睾吸虫特异性IgG水平显著高于正常组(P<0.01)。HE染色观察小鼠肝脏组织,见到虫体,炎症细胞浸润严重,纤维化明显并伴有点状坏死。肝细胞肿胀,肝窦狭窄,胆管扩张增生显著,胆管上皮细胞水肿、坏死,部分胆管上皮细胞胞浆均质红染。Masson染色显示肝脏组织尤其是虫体周围出现大面积纤维化。试验结果表明,华支睾吸虫感染FVB小鼠肝脏病变严重,因此可利用该品系小鼠建立华支睾吸虫感染模型,为深入研究华支睾吸虫的致病机制奠定基础。 张蓓蓓 张波 沈莉萍 李波 颜超 汤仁仙 郑葵阳关键词:华支睾吸虫 肝脏 病理变化