潘夕春
- 作品数：10 被引量：39H指数：4
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 马铃薯腺苷酸激酶基因的克隆分析及其植物表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆马铃薯腺苷酸激酶基因(adk)并进行生物信息学分析,构建反义表达载体。方法:用RT-PCR方法从西南地区马铃薯主推品种“米拉”中克隆adk编码序列,进行生物信息学分析后,反向插入植物高效表达载体pCAMBIA1304+,构建其反义植物表达载体。结果:克隆到的adk编码序列(stadk)为867bp,编码由288个氨基酸残基构成的多肽。生物信息学分析表明,其亚细胞结构定位于质体,具有典型的腺苷酸激酶蛋白功能域ATP-AMP(Ap5A)结合位点和AMP结合位点,蛋白质三维模型具有典型的ADK蛋白立体结构。该蛋白与另一条来源于马铃薯的ADK2序列的遗传相似性最高,在进化树上与杏、苜蓿、水稻的距离最近,与拟南芥的距离最远。将构建好的反义表达载体pCAMBIA1304+-Astadk导入根癌农杆菌菌株LBA4404,获得了工程菌菌株。结论:克隆到stadk基因。生物信息学分析表明,在淀粉合成水平最高的植物中,腺苷酸激酶的分子进化水平和遗传相似性也最高。获得的工程菌菌株可用于遗传转化马铃薯、甘薯和木薯等重要的淀粉作物,为实现淀粉代谢工程奠定了基础。
- 曾令江陈敏潘夕春张启堂廖志华
- 关键词：马铃薯腺苷酸激酶生物信息学
- 喜树ipi基因的克隆鉴定及三分三托品烷类生物碱的代谢工程
- 本文对喜树ipi基因的克隆鉴定及三分三托品烷类生物碱的代谢进行了研究。文章选取TAs基源植物三分三作为植物材料，首先建立其无菌苗培养系统。用发根农杆菌 A4遗传转化三分三，建立了其遗传转化方法。对发根基因组进行rolB和...
- 潘夕春
- 关键词：植物化学生化药学
- 文献传递
- PMT和H6H双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数被引量：2
- 2014年
- 三分三是我国特有的托品烷类生物碱药源植物.采用基于发根的外源基因表达技术,农杆菌介导遗传转化三分三,获得转烟草PMT和莨菪H6 H基因的发根、基因组PCR鉴定转基因发根、液体摇床培养后,HPLC检测发根中莨菪碱和东莨菪碱质量分数.结果发现:在三分三转基因发根中,能够同时检测到1 177bp的莨菪H6 H基因片段和451bp的烟草PMT基因片段,而非转基因发根没有检测到这2个基因,表明外源PMT和H6 H这2个基因整合进了三分三基因组.转基因发根系T11中东莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近6倍,比自然根高出近25倍;转基因发根系T25中莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近8倍,比自然根高出近75倍;转基因T25中东莨菪碱和莨菪碱总量最高,比非转基因发根系高出近7倍,比自然根高出近44倍.
- 严铮辉潘夕春强玮廖志华
- 关键词：三分三代谢工程
- RNA干扰及其在药用植物代谢工程中的应用被引量：7
- 2005年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是把双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)导入某些生物和细胞而引起同源mRNA降解的现象,是一种转录后基因沉默机制。dsRNA在体内被Dicer二聚体切割成21～25bp的小干涉RNA(smallinterfering RNA,siRNA),然后在siRNA引导下,由RNA诱导沉默复合体(RN Ainduced silencing complex,RISC)降解靶mRNA。RNA干扰作为一种新型反义技术可以有效的抑制特异基因的表达,因此可用于对药用植物次生代谢产物的生物合成途径进行调控,达到调控天然产物生物合成的目的。现将RNAi机制研究的最新进展及RNAi在药用植物代谢工程方面的应用进行综述。
- 潘夕春孙敏张磊廖志华
- 关键词：RNA干扰基因沉默药用植物代谢工程
- 植物表达载体在三分三发根中的高效表达被引量：7
- 2007年
- 目的建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法。方法由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统。将植物高效表达载体pCAMBI-A1304+导入经过“disarmed”改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌。取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根。选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养。经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内。结果建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%。结论该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础。
- 潘夕春陈敏张磊廖志华张明生
- 关键词：三分三发根共转化
- 青蒿琥酯的琥珀酯化衍生物及其制备方法和药物中的用途
- 本发明公开一种青蒿琥酯的琥珀酯化衍生物及其制备方法，该琥珀酯化衍生物为二氢青蒿素‑1,2‑α‑琥珀酸‑乙二醇‑琥珀酸双酯，以及该琥珀酯化衍生物在制备防治脓毒症和胰腺炎药物中的用途，该琥珀酯化衍生物相比青蒿琥酯表现出更强的...
- 岑彦艳潘夕春蒋坤魏晔
- 文献传递
- 玉米异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及其功能分析被引量：8
- 2008年
- 以玉米嫩叶为材料,采用RT-PCR技术克隆了植物萜类物质前体生物合成过程最后一个关键酶——异戊烯基焦磷酸异构酶(IPI)基因的全长cDNA,命名为ZmIPI(GenBank登录号为AY738148),该基因cDNA全长为1 382 bp,包含1 104 bp的开放阅读框,编码367个氨基酸残基.颜色互补分析表明ZmIPI能推动工程菌XL1-Blue+pTrcZmIPI+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,证实ZmIPI具有典型的IPI基因的功能.
- 王伟陆辉强刘万宏潘夕春陈敏廖志华
- 关键词：克隆Β-胡萝卜素玉米
- 青蒿琥酯的琥珀酯化衍生物及其制备方法和药物中的用途
- 本发明公开一种青蒿琥酯的琥珀酯化衍生物及其制备方法，该琥珀酯化衍生物为二氢青蒿素‑1,2‑α‑琥珀酸‑乙二醇‑琥珀酸双酯，以及该琥珀酯化衍生物在制备防治脓毒症和胰腺炎药物中的用途，该琥珀酯化衍生物相比青蒿琥酯表现出更强的...
- 岑彦艳潘夕春蒋坤魏晔
- 喜树碱的生物合成途径及生物技术研究进展被引量：12
- 2006年
- 喜树碱是从我国特有植物喜树中发现的一种具有抗癌活性的萜类吲哚生物碱,具有很好的药用价值。主要介绍喜树碱的合成器官、生物合成途径上已知的酶和基因,以及利用喜树愈伤组织和毛状根培养生产喜树碱的最新进展。
- 李连强潘夕春谈锋
- 关键词：喜树碱愈伤组织毛状根
- 番茄dxs基因的克隆及在大肠杆菌中的颜色互补被引量：4
- 2007年
- 用RT-PCR(反转录-聚合酶链式反应)的方法从番茄中克隆到5-磷酸脱氧木酮糖合成酶(Deoxyoxylulose-5-phosphate synthase,DXS)基因编码区(记为ledxs),并构建了ledxs原核表达载体pTr-cLeDXS。将携带番茄红素生物合成途径上香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate syn-thase,crtE),八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,crtB),八氢番茄红素脱饱和酶(phytoene desatu-rase,crtI)3个关键酶基因的原核表达载体pAC-LYC转入大肠杆菌XL1-Blue。将pTrcLeDXS转入该重组工程菌,获得番茄红素工程菌。将该菌用于构建颜色互补平板,并进行发酵培养以检测番茄红素表达量。颜色互补平板上的菌斑呈现鲜艳的红色。经过21h的培养番茄红素的产量达到605.25μg.L-1。结果显示:ledxs能明显推动类胡萝卜素途径向番茄红素合成的方向流动。
- 潘夕春陈敏刘颜廖志华
- 关键词：番茄番茄红素
