王雪净
- 作品数：20 被引量：103H指数：5
- 供职机构：潍坊医学院公共卫生与管理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学社会学经济管理更多>>
- 同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养的实践探讨被引量：3
- 2010年
- 同等学力申请临床医学硕士专业学位工作的开展,对提高医师的临床能力具有重要意义。文章结合我院同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养工作,就课程设置、实践要求、科研能力培养、临床能力培养与考核、学位论文要求等问题进行了探讨。
- 鞠学红管英俊张金宝孙嘉斌朱红王雪净杜红梅
- 关键词：同等学力专业学位硕士
- 基于持续理论的城市老年社区健康服务项目实证研究被引量：7
- 2016年
- 目的 探讨持续理论下城市社区老年人对社区健康服务项目的认知、利用、需求及满意情况及相关影响因素。方法 采用多阶段随机分层抽样方法,抽取潍坊市城市社区1 028名老年人进行问卷调查。利用SPSS20.0进行统计描述和分析。结果 在社区提供的7项老年健康服务项目中,有3项的需要程度在50.0%左右;2项的需要程度较低,为31.95%~46.52%;有42.96%的老年人对社区健康服务项目不感兴趣,对健康服务服务项目的满意度在33.09%~69.02%。对服务项目不满意前3位的原因是技术水平低、环境差、不感兴趣。结论 老年人对多数项目的认知、利用程度及满意度较低,不能真正满足老年人的需求。社区要基于持续理论理念结合老年人的健康需要,完善、优化社区老年健康服务项目。
- 罗盛张锦安洪庆庄立辉王雪净郭继志李伟
- 论医学研究生思想政治教育的机制建设
- 2011年
- 医学研究生是承载我国医学卫生事业发展重任的精英级人才,如何加强医学研究生的思想政治教育工作,确保医学研究生的培养质量,一直是医学研究生教育工作者的重要课题。本文结合所在医学院校的工作实践,讨论加强医学研究生思想政治教育的机制建设对医学研究生成长、成才的重要性。
- 王雪净鞠学红
- 关键词：医学研究生思想政治教育
- 小鼠分泌型IL-1β真核表达载体的构建及其表达
- 2011年
- 目的:构建小鼠经典分泌途径IL-1β真核表达载体,转染至Hepa1-6细胞,并测定其分泌表达水平。方法:引物延伸获得小鼠AFP信号肽序列(sAFP),RT-PCR扩增获得小鼠IL-1β成熟蛋白基因序列(mIL-1β),SOE方法将两段序列拼接形成融合基因,与pIRES2-EGFP质粒重组构建分泌型真核表达载体pIRES2-EGFP-smIL-1β,并将其转染至Hepa1-6细胞,RT-PCR检测融合基因的表达水平,Western blot检测细胞内mIL-1β蛋白的表达,ELISA法测定培养上清及细胞裂解液中mIL-1β水平。结果:经SOE法拼接获得的融合基因与GenBank中登录的序列一致,RT-PCR检测显示该载体能够在Hepa1-6细胞中表达融合基因mRNA,细胞培养上清中mIL-1β的分泌水平明显上升,而胞质中的mIL-1β无明显变化。结论:成功地构建了经典途径分泌的mIL-1β重组表达载体,该载体可以在Hepa1-6细胞培养上清中有效分泌具有生物活性的mIL-1β。
- 肖伟玲王雪净牟东珍林志娟王焕芹梁淑娟
- 关键词：信号肽分泌表达
- IL-1β反义RNA在HepG2细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响
- 2007年
- 目的:构建IL-1β反义RNA真核表达载体,转染HepG2细胞,探讨阻断IL-1β作用后对其NK细胞杀伤敏感性的作用。方法:RT-PCR方法扩增两段基因序列IL-1β1(17-331,315bp)和IL-1β2(246-505,260bp),经T-A克隆后构建反义RNA表达载体pcDNA3.0-antiIL1β1和pcDNA3.0-anti-IL1β2。采用阳离子聚合物(jetPEI)的方法转染HepG2肝癌细胞,RT-PCR方法检测反义RNA的表达水平,胞内因子染色的方法分析IL-1的表达水平,MTT方法分析NK-92细胞对HepG2杀伤活性的变化。结果:以LPS刺激的人PBMC总RNA为模板,RT-PCR扩增得到两个约315bp和260bp的基因片段,先构建克隆载体pMD18T-IL-1β1和pMD18T-IL-1β2,质粒PCR、XhoI酶切和DNA序列分析正确后,利用PfuDNA聚合酶进行PCR,产物纯化后经EcoRI、XhoI双酶切,反向插入pcDNA3.0,获得人IL-1β反义RNA真核表达载体pcDNA3.0-antiIL-1β1和pcDNA3.0-antiIL-1β2。PCR、PstI酶切和DNA序列分析正确后,将其分别转染HepG2细胞,RT-PCR检测显示HepG2细胞能够高水平表达两种反义RNA,胞内因子染色发现IL-1β的表达水平明显下降,同时该细胞对NK-92杀伤的敏感性明显升高,其中IL-1β1反义RNA的作用更为显著,效靶比10∶1时,NK细胞对HepG2的杀伤活性提高了约20%。结论:以促炎性细胞因子IL-1β为靶点进行干预,能够有效地下调肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗能力。
- 梁淑娟肖伟玲牟东珍吴慧娜王雪净
- 关键词：IL-1Β反义RNANK细胞天然免疫
- 肝癌组织特异性P_(afp)IRES2-EGFP表达载体的构建及表达
- 2008年
- 目的构建AFP最小启动子调控的小鼠肝癌组织特异性表达载体,观察其在小鼠H22肝癌细胞中的特异性表达。方法从H22细胞总DNA和荧光载体pIRES2-EGFP中分别PCR扩增AFP最小启动子区序列和CMV增强子(ECMV),利用重叠延伸PCR方法(SOE)获得AFP启动子驱动的嵌合调控序列,将其克隆入pIRES2-EGFP载体,进行菌落PCR、限制性酶谱分析、DNA序列测定。通过jetPEI方法转染H22肝癌细胞和YAC1淋巴瘤细胞,荧光显微镜下观察其表达的组织特异性。结果从小鼠H22细胞DNA和pIRES2-EGFP中分别扩增得到229bp和324bp的片段,纯化后的PCR产物通过SOE扩增得到一537bp的条带,均与预期序列长度一致。SOE产物与pIRES2-EGFP连接,菌落PCR鉴定获得数个阳性克隆,质粒经Nde I+NheⅠ限制性酶谱分析酶解出537bp条带,DNA序列分析证实重组载体中的嵌合DNA与GeneBank中小鼠AFP启动子和ECMV序列完全一致。结论本研究成功构建了AFP启动子调控的小鼠肝癌组织特异性表达载体PafpIRES2-EGFP,该载体能够在小鼠肝癌细胞中特异性表达外源基因。
- 牟东珍梁淑娟刘艳艳王雪净吴慧娜李若葆
- 关键词：肝癌组织特异性表达AFP启动子
- 大鼠脊髓神经干细胞的体外培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:体外培养大鼠胚胎脊髓神经干细胞,观察其生长、增殖和分化特点。方法:利用倒置显微镜、MTT法、免疫细胞化学等方法检测神经干细胞的增殖、分化情况。结果:分离的脊髓神经干细胞可形成大量悬浮的神经球,并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈nestin阳性。在添加10%胎牛血清7d后,神经球细胞可分化为有神经元、星形胶质细胞特异性抗原表达的细胞。结论:体外培养大鼠胚胎脊髓可得到大量神经干细胞,并能分化为神经元和星形胶质细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽王雪净
- 关键词：脊髓神经干细胞细胞培养
- 小鼠IL-1β在H22细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:重组表达小鼠IL-1β全长基因,转染H22肝癌细胞,分析对NK细胞杀伤活性的影响。方法:构建小鼠IL-1β重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β,利用jetPEI转染H22肝癌细胞,RT-PCR和激光扫描共聚焦显微镜分析IL-1β重组载体的表达,MTT方法分析转染前后,野生型小鼠脾脏NK细胞对H22细胞杀伤活性的变化。结果:RT-PCR扩增出小鼠IL-1β,长度约843bp。纯化的PCR产物与pIRES2-EG-FP同时经XhoI和EcoRI双酶切,在T4连接酶作用下连接,转化大肠杆菌,提取质粒经PCR、限制性酶谱分析(XhoI+EcoRI)和DNA序列测定后,确认获得重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β。将该质粒转染至H22小鼠肝癌细胞中,RT-PCR和荧光观察证实,H22细胞能表达高水平IL-1β重组表达载体,与转染空载体的对照组细胞相比,IL-1β转基因后H22细胞对NK92细胞杀伤抵抗性明显增强,同时野生型小鼠脾脏NK细胞对pIRES2-EGFP-mIL-1β转基因细胞的杀伤活性明显下降,效靶比40:1时下降了约10%。结论:IL-1β能够明显增强H22肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗性,可能是肝癌细胞借以逃逸天然免疫应答的重要机制。
- 肖伟玲梁淑娟牟东珍王雪净吴慧娜
- 关键词：IL-1ΒNK细胞天然免疫肝癌
- 基于对应分析的城市社区不同类型老年人健康服务项目需求研究被引量：22
- 2016年
- 目的了解山东省潍坊市城市社区不同类型老年人对社区健康服务项目的需求情况,为社区有针对性地开展适宜的老年健康服务项目提供依据。方法采用多阶段随机分层抽样方法,对老年人进行问卷调查。应用对应分析对不同类型老年人的健康服务项目需求度数据资料进行分析。结果一类老年人是健康教育、精神慰藉和健康管理参与的高需人群;二类老年人是医疗护理和精神慰藉的高需人群;三类老年人是日常照料、疾病护理和精神慰藉的高需人群;四类老年人是日常生活照料的高需人群。结论运用对应分析对老年人健康服务项目的需求情况进行分析,从而可以发现不同类型老年人的相应健康服务需求项目,为社区有针对性地开展适宜的老年健康服务项目提供依据,从而更好地提高老年人的生活质量。
- 罗盛张锦李伟安洪庆王雪净郭继志冀洪海
- 关键词：老年人社区健康服务
- 城市社区老年人护理需求现状及影响因素研究
- 目的：调查山东省城市社区不同人口学特征、不同生命质量、不同生活自理能力老年人的健康状况和社区护理需求情况及差异，分析其护理需求的影响因素，为社区老年护理适宜项目和内容的规范开展提供支持。
- 罗盛张锦王雪净李伟
