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鼻气管炎鸟疫杆菌株的分离鉴定及最低抑菌浓度测定被引量：4: 2012年; 为测定鼻气管炎鸟疫杆菌对不同药物的敏感程度,本试验从北京、吉林、河北、内蒙和山东地区患严重气囊炎病鸡的肺脏以及辽宁肉种鸡蛋黄中成功分离到了6株鼻气管炎鸟疫杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT),并通过染色镜检、生化试验和PCR法对其进行了鉴定。随后选择山东分离株在培养基上繁殖,经腹腔注射接种21日龄SPF鸡,接种后出现典型的肺炎和气囊炎,并测定其半数致死量。在此基础上,采用微量测定法测定6个临床分离菌株和3个对照菌株对12种药物的最小抑菌浓度(MIC)。9株ORT对于莫西沙星、甲磺酸加替沙星和乳酸环丙沙星比较敏感,MIC值为0.49～31.25μg/mL;临床广泛使用的盐酸强力霉素MIC测定值变化较大,分布在1.90～125μg/mL;除北京株和吉林株外,其他7株ORT对利福平比较敏感,MIC值为3.91～15.6μg/mL;分离株对于氟苯尼考、四环素、金霉素、磺胺间甲氧嘧啶、磷霉素钠和头孢噻肟钠不敏感,部分菌株的MIC值已经超过1 000μg/mL。; 刘爱晶潘青田德雨侯娜何诚; 关键词：最小抑菌浓度

集约化养猪场嗜流产衣原体病流行状况的初步调查被引量：7: 2012年; 本试验对北京郊区5个规模化猪场断奶仔猪、育成猪、育肥猪和怀孕母猪采集血清共507份,同时采集密切接触饲养人员、仔猪、育肥猪的喉头拭子、母猪阴道拭子及公猪的精液共183份。分别使用间接血凝诊断试剂盒、法国ELISA试剂盒检测抗体;利用直接荧光染色法检测抗原,包括166份猪喉头拭子、阴道拭子和精液以及17份饲养人员喉头拭子。结果发现间接血凝诊断试剂盒、ELISA试剂盒抗体阳性率分别为4.14%和2.17%;抗原平均阳性率为14.8%,其中精液阳性率达到37.5%,母猪阴道拭子阳性率为27.5%,饲养人员阳性率为23.5%。本试验证实北京郊区猪嗜流产衣原体在种公猪、母猪群和饲养员呈高流行趋势。同时研究结果显示,5个被调查的规模化猪场嗜流产衣原体抗体阳性率显著低于有报道的其他省市,这与间接血凝诊断试剂盒检测结果高于ELISA试剂有关。针对发现的问题,必须采取有效措施控制种公猪精液污染衣原体现象,阻断向母猪和饲养人员传播,以降低人兽共患病发生的风险。; 田德雨刘哲翔李靖杨君敬信先汪明何诚; 关键词：抗体抗原

副猪嗜血杆菌外膜蛋白pilA基因的克隆与表达被引量：3: 2011年; [目的]克隆和表达副猪嗜血杆菌菌毛蛋白pilA基因。[方法]对已发表的HPS的pilA序列进行分析,合成引物,并以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS的pilA编码基因,获得目的基因片段;构建重组表达质粒,经IPTG诱导表达至大肠杆菌BI21(DE3)中,进行SDS-PAGE与Western blot检测。[结果]表达的重组蛋白分子质量与预期的43 kD一致。[结论]该研究为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础。; 叶飞张培君田德雨孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆

副猪嗜血杆菌外膜蛋白TbpB基因的克隆和表达: 2011年; 为了克隆和表达副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)外膜蛋白TbpB基因,试验采用基因工程的方法对已发布的HPS外膜蛋白P5序列进行相关序列分析,设计并合成引物,以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS外膜蛋白P5编码基因,获得长为1 116 bp的预期基因片段。该基因编码372个氨基酸的蛋白质,预测分子质量约为41 ku,将该基因片段定向克隆至表达载体pGE X-6p-1中。结果表明:诱导表达后分子质量约为67 ku,与副猪嗜血杆菌阳性血清发生了特异性反应。说明该蛋白与抗体发生了反应,有一定免疫原性。; 叶飞张培君田德雨孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆

乌梅、酸枣仁提取物及有效成分抗畜禽病毒病、细菌病的研究: 何诚斯建勇张发明李应超李树梅欧长波栗绍文潘青陈曦蒲忠慧彭剑飞侯娜周德刚郭烨田德雨; 该项目资助来源于国家863重大项目“生物兽药新产品研究和创制”子课题“酸枣仁、乌梅等提取物抗病毒抗细菌新兽药的研发(2006AA10A208-3-2)”、国家科技支撑计划“安全环保型中兽药的研制及应用”的子课题“乌梅口服...; 关键词：; 关键词：兽药病毒病防治促生长添加剂畜禽疾病

副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5基因的克隆和表达被引量：7: 2010年; 副猪嗜血杆菌病(Haemophilus parasuis)是规模化猪场的重要细菌性疾病之一。对已发表的HPS外膜蛋白P5序列进行相关序列分析,设计合成引物,以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS外膜蛋白P5编码基因,获得1 116 bp的预期基因片段。该基因编码372个氨基酸的蛋白质,预测分子量大约为41 kDa,利用基因工程的方法将该基因片段定向克隆至表达载体pGEX-6p-1中,诱导表达后的分子量约为67 kDa。该研究为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础。; 叶飞张培君田德雨徐慧孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆

Cloning and Expression of pilA Gene of Outer Membrane Protein of Haemophilus parasuis: 2011年; [Objective] The aim was to clone and express the pilA gene of outer membrane protein of Haemophilus parasuis.[Method] The published pilA gene sequence of HPS was analyzed for primer synthesis,and the genome of serotype 5-type of HPS was used as template for PCR amplification of the pilA gene of HPS;the recombinant expression plasmid was constructed and transformed into E.coli BL21（DE3）after induced by IPTG.SDS-PAGE and Western blot analysis were then carried out.[Result] The molecular weight of expressed protein was consistent with the expected（43 kD）.[Conclusion] The results provided a foundation for the preparation of subunit vaccine and diagnostic reagents.; 叶飞张培君田德雨孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞; 关键词：CLONING EXPRESSION

北京郊区猪戊型肝炎流行初步调查被引量：4: 2012年; 用间接ELISA试剂盒对北京市郊区所采集的174份猪血清样品进行了抗体检测,结果显示,其抗体总阳性率达62.1%。针对戊型肝炎病毒(HEV)ORF2/ORF3重叠区设计了简并引物,采用巢式RT-PCR对随即采取的少量猪粪便样品进行了抗原检测。结果表明,部分粪便样品中存在HEV。; 李靖刘波杨君敬田德雨凌勇何诚; 关键词：戊型肝炎病毒血清流行病学逆转录聚合酶链式反应

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田德雨