石凤敏
- 作品数：16 被引量：59H指数：6
- 供职机构：内蒙古农业大学生态环境学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 蒙古冰草MwDREB3基因的克隆及表达分析被引量：12
- 2015年
- 以蒙古冰草(Agropyron mongolicum)为研究材料,利用同源序列法克隆得到1个DREB3类转录因子基因,命名为MwDREB3,采用实时荧光定量RT-PCR技术分析MwDREB3基因的表达特征,为蒙古冰草优异抗性基因的挖掘和利用提供理论依据。结果表明:该基因全长1056bp,包含1个完整的开放阅读框,长度为774bp,编码257个氨基酸,该蛋白近5'端含有1个保守的AP2结构域。系统进化树分析表明MwDREB3编码的蛋白与小麦(Triticum aestivum)的DREB、山羊草(Aegilops columnaris)DRF1的进化关系较近。该基因在干旱、高盐、ABA诱导条件下,表达量上调;在低温条件下,表达量下调。
- 赵彦陈雪英石凤敏云锦凤王俊杰
- 关键词：蒙古冰草DREB基因克隆
- 蒙古冰草LEA3基因RNAi表达载体的构建
- 本研究以蒙古冰草LEA3基因为靶标,设计2对分别含有XhoI-EcoRI和HindIII-ClaI酶切位点的引物S2、N2,通过RT-PCR扩增获得目的基因LEA3的部分cDNA片段(467bp),并将扩增的2个基因片段...
- 赵彦云锦凤石凤敏刘亚玲王俊杰张众
- 关键词：蒙古冰草RNA干涉
- 文献传递
- 蒙古冰草MwLEA3基因ihpRNA表达载体的构建
- 2011年
- 采用RT-PCR方法从蒙古冰草中克隆出MwLEA3基因的特异性cDNA序列,并连入克隆载体pGM-T中。根据植物中ihpRNA原理,成功构建了35S启动子调控的具有MwLEA3基因反向重复结构的ihpRNA表达载体pART27-MwLEA3(HB)-MwLEA3(EX),并通过冻融法转化将MwLEA3基因的ihpRNA表达框架成功导入根癌农杆菌LBA4404中。
- 石凤敏云锦凤赵彦
- 关键词：蒙古冰草
- 荧光原位杂交技术及其在植物染色体基因定位中的应用
- 荧光原位杂交技术(Fluorescence in Situ Hybridization,FISH)是20世纪80年代末由放射性原位杂交发展起来的一种非放射性原位杂交技术。FISH综合应用细胞遗传学和分子生物学的原理,成为...
- 石凤敏云锦凤赵彦
- 关键词：荧光原位杂交染色体基因定位
- 文献传递
- 农杆菌介导遗传转化在禾本科植物中的应用
- 来，农杆菌介导的基因转化系统广泛应用于水稻、玉米、小麦、等禾本科植物的研究中,获得了突破性的进展和较为广泛的应用。本文主要对农杆菌介导转化的过程、机理、特点及其在禾本科植物转化中的应用进行简要的概述。
- 石凤敏云锦凤赵彦
- 关键词：农杆菌禾本科植物
- 蒙古冰草有丝分裂及染色体核型分析
- 以内蒙沙芦草为材料,研究蒙古冰草的染色体核型,并观察其有丝分裂过程。结果表明,蒙古冰草的核型公式为2n=2x=12m（2SAT）+2sm。在有丝分裂中期可以观察到1～2条B染色体,形态为圆点状和短棒状。
- 赵彦石凤敏云锦凤
- 关键词：蒙古冰草染色体核型
- 文献传递
- 不同贮藏时间披碱草种子劣变及活力测定被引量：12
- 2008年
- 采用室内常规发芽法和电导法,对室温开放贮藏9个不同年份披碱草Elymus dahuricus种子的萌发特性和活力变化进行测试,以检验其种子的劣变进程及种用价值。结果表明：随贮藏时间延长,披碱草种子生活力、发芽势、发芽率、活力指数和种苗干质量呈“抛物线”形状变化,其生活力、发芽势、发芽率、活力指数、种苗干质量、电导率与贮藏时间呈显著相关。贮藏1年种子存在休眠;贮藏2-3年种用价值最佳;贮藏4年保持较高的活力,适当可作播种用;贮藏6年活力骤然下降,不宜作为播种用;贮藏14年的丧失活力。
- 张东晖云锦凤石凤敏刘芬
- 关键词：披碱草贮藏时间种子劣变
- 蒙古冰草MwLEA3基因植物表达载体的构建
- 2010年
- 以植物双元表达载体pCAMBIA2300为基础,设计分别带有酶切位点XbaI和PstI的一对引物,从克隆载体pGM-T-MwLEA3中扩增到目的基因MwLEA3。用XbaI和PstI双酶切该目的基因及表达载体pCAMBIA2300,回收后利用T4DNA连接酶连接,获得植物表达载体pCAM-MwLEA3。通过冻融法将所获得的植物表达载体重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404菌株中,为该基因的功能鉴定及通过农杆菌介导法将MwLEA3基因导入植物提高相关抗性奠定了基础。
- 石凤敏云锦凤赵彦逯晓萍
- 关键词：蒙古冰草植物表达载体
- 蒙古冰草Actin基因片段的克隆及序列分析被引量：6
- 2009年
- 旨在利用同源序列法分离蒙古冰草(Agropyron mongolicumKeng)Actin基因同源片段,为研究其他基因在蒙古冰草中的表达和调控提供内标参照。根据禾本科植物小麦Actin基因(AB181991)的保守序列设计2对引物A4和A5,采用RT-PCR扩增蒙古冰草的Actin基因片段,分别得到656 bp和848 bp的片段,使用DNAman和DNAuser等分子生物学软件进行序列分析,将2个片段的重复序列合并后获得一段长度为962 bp的基因片段,编码237个氨基酸,将克隆的Actin基因片段命名为MwACT。该序列与其它植物Actin基因核苷酸序列的同源性均在80%以上,其中与小麦、大麦的同源性达到94%;与氨基酸序列的同源性均在90%以上。
- 赵彦云锦凤石凤敏刘亚玲
- 关键词：蒙古冰草ACTIN基因克隆
- 野生黄花苜蓿冷诱导基因克隆及序列分析被引量：2
- 2010年
- 根据紫花苜蓿抗寒基因cas15B(登录号:L12462)的cDNA序列,设计1对特异引物,以经过低温胁迫的黄花苜蓿总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获得了550bp的cDNA片段。测序和序列分析结果表明,扩增片段长度为550bp,编码159个氨基酸。主要由Gly(甘氨酸)、Glu(谷氨酸)、His(组氨酸)、Lys(赖氨酸)这4种氨基酸组成,占总量的70%。含1个重复了5次的10肽基序,其序列为Lys-Gly-Glu-Gln-His-Gly-His(Phe)-Val(Leu)-Gly-Gly。经序列比较分析,该片段与紫花苜蓿冷诱导基因CAS15B的核苷酸、氨基酸的同源性均为90%,命名为MfCAS15-1。亚细胞结构定位分析结果显示,MfCAS15-1是一种定向到核的蛋白,在调节或维持核的结构与功能方面起作用。本研究在黄花苜蓿中成功获得了抗寒基因同源序列,为最终克隆黄花苜蓿MfCAS15-1抗寒基因全长奠定了基础。
- 刘亚玲王俊杰云锦凤赵彦石凤敏
- 关键词：黄花苜蓿冷诱导基因克隆
