穆小萍 作品数:109 被引量:518 H指数:12 供职机构: 广东省妇幼保健院 更多>> 发文基金: 广东省中医药管理局基金 广东省医学科学技术研究基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
基于细菌16SrRNA基因的PCR扩增与测序分析在临床不常见菌鉴定中的应用 被引量:28 2012年 目的探讨细菌16SrRNA基因的广谱PCR扩增与测序分析在临床分离的少见病原菌的鉴定及分类中的价值。方法收集2010年12月至2011年9月来自7家不同医院和机构,常规方法难以鉴定或具有特殊表型的少见菌48株,以及仪器法连续监测报警阳性、但二次传代无细菌生长的液体增菌培养瓶7个,采用细菌16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因MicroSeq500试剂盒、通用引物27f-1492r、27f-1525r进行广谱PCR扩增及目的片段的基因测序。运用美国国立生物信息中心“基于局部比对算法的搜索工具(Blast)”,结合“具有法定分类学地位的原核生物名称目录(http://W^Ufir.bacterio.cict.fr/)”提供的分类学信息,比较待鉴定细菌与近缘种模式菌株基因序列的相似程度;参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)MM18-A的解释标准,以确定待鉴定细菌的种属及分类学位置。结果采用广谱PCR测定,7份假阳性血培养瓶中,2份扩增到细菌的16SrRNA基因,经序列分析鉴定均为肺炎链球菌。48株不同来源、不同种属的少见菌,均扩增到16SrRNA基因目的片段并成功测序,参考CLSIMM18-A的解释标准,35株(72.9%)直接鉴定到“种”,11株(22.9%)鉴定到“属”,另2株鉴定为可能的新属新种。进一步结合细菌的生化反应特征及其他管家基因序列分析结果,则可鉴定到“种”的细菌可增加到42株(87.5%),其中包括链杆菌、嗜二氧化碳噬纤维菌、玫瑰单胞菌、奴卡菌、弯曲菌、分枝杆菌等具有明确临床意义的少见菌,以及多株近十年内命名的新细菌,如小不动杆菌、富西亚分枝杆菌、黏液玫瑰单胞菌、Halomonasjohnsoniae等。此外,还发现了1个新亚型的胎儿弯曲菌。结论16SrRNA基因测序鉴定能明确提供细菌的遗传学信息,且无种属选择性,对临床少见菌、苛养菌、以及固体培养基不生长的� 陈茶 屈平华 顾全 黄彬 张伟铮 穆小萍 张磊 陈默蕊 王露霞 鄂顺梅 叶金艳 唐小龙 蓝锴 罗强 戴小波 袁慧关键词:聚合酶链反应 细菌学技术 一种登革病毒通用型RT-RAA-LFD扩增引物及检测方法 本发明提供了一种登革病毒通用型RT‑RAA‑LFD扩增引物及检测方法。本发明针对1~4型登革病毒的3'端非翻译区共同保守区域,设计了一对使用于RAA技术的特异性引物,正、反向引物的5'端分别用6‑羧基荧光素和生物素进行标... 穆小萍 罗娅莎 熊玉锋 赖科峰 叶青 郑淑华 郭军飞文献传递 血清铁蛋白在儿童嗜血细胞综合征诊断中应用价值 被引量:4 2021年 目的检测儿童嗜血细胞综合征(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)和非HLH患儿血清铁蛋白水平,探讨血清铁蛋白对儿童HLH的诊断价值。方法血清铁蛋白≥500μg/L的患儿409例,其中HLH患儿58例为HLH组,非HLH患儿351例为非HLH组,记录患儿临床检测结果。采用化学发光微粒子免疫检测技术检测患儿血清铁蛋白水平;绘制ROC曲线,分析血清铁蛋白在儿童HLH诊断中的最佳截断值。结果HLH组患儿年龄大于非HLH组(P<0.05),血清D-二聚体、三酰甘油水平高于非HLH组(P<0.05),白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原和总蛋白水平均低于非HLH组(P<0.05)。HLH组患儿血清铁蛋白水平[9854.00(4760.00,40000.00)μg/L]明显高于非HLH组[1222.00(701.40,2891.00)μg/L](P<0.05);血清铁蛋白诊断儿童HLH的最佳截断值为4427.00μg/L,灵敏度为75.86%,特异度为88.03%,AUC为0.88(95%CI:0.82~0.93,P<0.001)。结论与原有诊断标准(血清铁蛋白≥500μg/L)相比,较高的铁蛋白临界值(4427.00μg/L)对儿童HLH诊断有更高的特异度。 罗欣 吴耿航 李碧婷 王惠丽 方莉芹 穆小萍关键词:嗜血细胞综合征 儿童 血清铁蛋白 高压氧联合辛伐他汀治疗脑出血的效果观察 2015年 目的 观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)联合辛伐他汀治疗对脑出血患者血清白细胞介素-1β(IL-1β)含量的影响及其疗效.方法 将92例患者按患者意愿并在不违背医学伦理学的前提下分成3组,HBO组30例,辛伐他汀组32例,HBO+辛伐他汀组30例,3组患者在常规治疗的基础上,HBO组再用HBO治疗,辛伐他汀组再用辛伐他汀,HBO+辛伐他汀组2种方法联合使用,分别于治疗前、治疗15、30 d检测血清IL-1β含量,同时记录各阶段神经功能缺损评分和日常活动Barthel指数(BI)评分.另选31名健康体检者作为正常对照组.结果 脑出血患者血清IL-1β较正常值明显升高(P<0.05),HBO组、辛伐他汀组、HBO+辛伐他汀组治疗后血清IL-1β均下降,HBO+辛伐他汀组下降更为明显[治疗前(73.56 ±22.40) μg/L,治疗15 d(42.36±16.28) μg/L,治疗30 d(23.25 ±6.62) μg/L];治疗30 d,组间[HBO组(28.32±6.78) μg/L,辛伐他汀组(30.46±5.27) μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.05);HBO组、辛伐他汀组、HBO+辛伐他汀组神经功能缺损评分较治疗前均下降,HBO+辛伐他汀组下降明显,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);3组BI评分比较,HBO+辛伐他汀组上升明显,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBO+辛伐他汀联合治疗脑出血有协同和增强作用,能显著降低脑出血患者血清中IL-1β含量,使神经功能及日常生活活动能力恢复明显. 于连荣 李学慧 江小伟 李志才 骆晓梅 穆小萍 陈梅香 柳青关键词:脑出血 白细胞介素-1Β 辛伐他汀 高压氧 孕早期血脂水平与早产发生风险的相关性研究 被引量:1 2020年 目的阐明孕早期血脂水平与早产发生风险的关联,为从孕早期开始预防早产提供依据。方法从广东省妇幼卫生信息系统中选取2015年9月至2018年3月在广东省妇幼保健院分娩的孕妇及其胎儿资料,提取孕早期血脂指标检测值及相关登记信息,包括三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、胎龄等。以线性回归模型分析血脂水平与胎龄的关系,Logistic回归模型分析血脂水平与早产发生风险的关联。结果共有855对母婴纳入该研究,早产发生率为6.1%。在调整潜在协变量后,孕早期TG、LDL-C每增加1 mmol/L可分别减少胎龄3.2(95%CI:-4.5,-2.0)、2.3(95%CI:-3.4,-1.1)d,早产发生风险分别增加97.4%(OR:1.974;95%CI:1.350,2.852)及63.3%(OR:1.633;95%CI:1.072,2.471)。孕早期TG/HDL每增加1个单位,可减少3.5(95%CI:-5.1,-1.8)d胎龄,早产发生风险可增加94.6%(OR:1.946;95%CI:1.158,3.166)。结论孕早期血脂升高与早产发生风险增加有关,提示妇幼保健医务人员应加强孕早期血脂水平监测,尽早发现早产高危孕妇并及时采取相应干预措施。 纪存委 罗绍兰 刁福强 吴云涛 穆小萍 夏建红关键词:血脂水平 早产 胎龄 连续监测血培养系统中肺炎链球菌自溶特点分析 被引量:7 2013年 目的:研究临床分离的肺炎链球菌菌株的血清型和重要毒力因子碱基序列的保守情况,为临床肺炎链球菌疫苗的使用和蛋白质疫苗的研发提供参考依据。 方法:收集2010~2013年重庆医科大学附属儿童医院11岁以下儿童中分离的46株肺炎链球菌,用多重PCR进行血清型分型。同时PCR扩增肺炎链球菌的11个毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP,测序后分析碱基序列的突变情况。 结果:46株肺炎链球菌共检出13种血清型,其中19A(19.57%)为最常见的血清型,其次为23F和19F(各占15.22%)。临床菌株毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP的碱基序列保守性分别为97.82 %、96.31 %、82.96 %、87.50 %、98.48 %、83.68 %、66.27 %、99.46 %、98.63 %、88.72 %和96.67 %。 结论:在重庆地区儿童感染的肺炎链球菌中,血清型19A分布比例最高,本地区儿童接种肺炎链球菌疫苗时应首选含有19A血清型荚膜多糖抗原的PCV13疫苗。毒力因子ply、stkP、piaA、lytA、clpP和psaA基因在临床菌株中保守性较高,具有作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白质的潜力。 蔡婷婷 屈平华 穆小萍 张磊 林冬玲 陈茶 吴尚为关键词:血培养系统 肺炎链球菌 细菌鉴定 Allergy Screen和EUROLINE Atopy血清过敏原特异性IgE检测结果对比分析 被引量:3 2022年 目的对Allergy Screen与EUROLINE Atopy过敏原特异性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E,sIgE)检测结果进行一致性和等级相关性研究,为临床合理应用检测方法和解读检验结果提供依据。方法收集过敏性疾病患儿血清样本180份,其中男86例,女94例,年龄3~15岁。分别应用Allergy Screen法和EUROLINE Atopy法检测血清样本中树花粉、混合草、尘螨、猫毛、狗毛、屋尘、蟑螂、霉菌、牛奶、鸡蛋、牛肉、贝类、虾、蟹过敏原sIgE。结果两种检测方法Kappa分析得出:尘螨、牛奶、蟹三项一致性最高(Kappa值分别为0.846、0.845、0.813)。混合草、屋尘、蟑螂、霉菌、鸡蛋、虾等六种过敏原一致性较高(Kappa值分别为0.719、0.722、0.662、0.652、0.780、0.710)。树花粉、牛肉一致性中等(Kappa值分别为0.483、0.486)。猫毛、贝类一致性一般(Kappa值分别为0.392、0.389)。狗毛一致性较差(Kappa值为0.142)。两种检测方法过敏原sIgE的等级资料Spearman相关性分析显示:混合草、尘螨、屋尘、牛奶、鸡蛋、虾、蟹等7项相关性非常紧密(Spearman值分别为0.735、0.878、0.707、0.835、0.821、0.704、0.826),蟑螂、霉菌组合、牛肉等3项相关性紧密(Spearman值分别为0.670、0.689、0.445)。树花粉、猫毛、狗毛、贝类等4项相关性一般(Spearman值分别为0.389、0.324、0.237、0.311)。结论两种检测方法大部分项目过敏原sIgE不仅具有较强一致性,还具有非常紧密的等级相关性,二者均可用于一般过敏性疾病的筛查,临床医生和实验室应该综合分析,合理科学地选择检测方法。 王文强 古春明 赖科峰 闫琦 穆小萍关键词:特异性IGE 双歧啤酒对免疫功能的影响及延缓衰老作用的研究 目的:研究双歧啤酒对小鼠免疫功能的影响及其在延缓衰老方面的作用。 方法:1.双歧啤酒的制备:选用双醪浸出糖化法进行麦汁制备,过滤和添加酒花后进行麦汁煮沸。利用双歧杆菌(厌氧)和酿酒酵母(需氧)共同发酵啤酒。2.双歧啤酒对... 穆小萍关键词:人体免疫 食物营养 文献传递 硝酸镓和多黏菌素B抑制耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生长的作用 2016年 目的评价硝酸镓和多黏菌素B对临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生长的抑制作用,分析其抗菌机制。方法采用微量稀释法检测硝酸镓和多黏菌素B对20株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的抑制作用,观察两者联合应用的抑菌情况。结果试验菌株对硝酸镓和多黏菌素B均敏感,硝酸镓对试验菌株的最小抑菌浓度(MIC)均为16μmol/L,多黏菌素B对试验菌株的MIC均为≤2.0μg/ml,两者联合应用对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生长有协同抑菌作用。结论硝酸镓和多黏菌素B对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌有明显抑菌效果,有望成为控制其蔓延感染有效的治疗药物,为临床治疗这类难治细菌感染提供药物选择。 王浩平 郑淑华 穆小萍 黄瑞玉 卢春敏关键词:多黏菌素B 肺部感染性疾病患儿支气管冲洗液细菌培养及药敏结果分析 被引量:12 2011年 目的纤维支气管镜采集肺部感染性疾病患儿支气管冲洗液,分析病原菌的分布特点和耐药情况,为临床的诊断与治疗提供实验室依据。方法对2008年10月~2010年9月本院儿科和新生儿科送检的120份支气管冲洗液标本进行细菌培养,以法国梅里埃生产的全自动细菌鉴定药敏系统(VITEK-2 compact)对分离的病原菌做药敏试验和菌种鉴定。结果从73例患儿的支气管冲洗液标本中分离出细菌83株。其中革兰阴性(G-)菌41株,排名前3位为大肠埃希菌(10株)、肺炎克雷伯菌(10株)和铜绿假单胞菌(6株);革兰阳性(G+)菌7株;真菌17株;咽部正常菌群18株。余47例患儿支气管冲洗液无菌生长。药敏试验结果显示G-杆菌对碳青霉烯类、喹诺酮类、氨基糖苷类以及头霉素类抗生素均敏感,对其他类型抗生素耐药性较高。结论小儿肺部感染性疾病支气管冲洗液中病原菌分布以G-杆菌为主。根据药敏结果合理地选用抗生素对病例的治疗和减少细菌耐药性具有重要意义。 穆小萍 张德纯 邓文喻 赖卫明 柏彩英关键词:支气管冲洗液 细菌培养 药敏试验