符武钊
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析被引量：3
- 2003年
- 采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：毕节酵母高密度发酵纯化生物活性分析
- 内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析被引量：4
- 2004年
- 用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：内皮细胞抑制素纯化毕赤酵母
- 重组METH-1在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析
- METH-1是一种新发现的具有抗血管生成和抑制内皮细胞增殖活性的蛋白质.METH-1基因最初是以TSP1具有抗血管生成活性区域序列的EST为探针,从成年人心脏cDNA文库中分离得到的.本研究利用PCR技术从人胎脑cDNA...
- 符武钊
- 关键词：基因克隆与表达毕赤酵母纯化生物活性分析
- 文献传递
