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智力低下相关蛋白(FXR1P)与CMAS相互作用的生物学效应研究(英文)被引量：2: 2013年; 脆性X综合征(FXS)是一种遗传性智力低下疾病,其发病率仅次于21三体综合征.脆性X智力低下蛋白(FMRP)是FXS的关键性致病因子,该蛋白由脆性X智力低下基因1(FMR1)编码所得.FMR1在神经肌肉和睾丸组织中广泛表达.脆性X相关蛋白1(FXR1P)则是由FMR1的同源基因脆性X相关基因1(FXR1)编码所得,并且与蛋白质和RNAs之间存在着相互作用.许多疾病都涉及到FXR1表达的改变.为了了解FXR1P与CMAS(胞嘧啶单核苷酸-N-乙酰神经氨酸合成酶)相互作用所产生的的生物学效应,我们构建了FXR1的过表达载体,并观察其在PC12细胞(大鼠鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)和VSMC(血管平滑肌细胞)中的表达以及继而对于细胞形态和CMAS活性相关的许多细胞指标的效应.我们证实,FXR1基因的过表达可以提高PC12细胞中CMAS的活性,并对于该类细胞的生长提供一定程度的保护作用.PC12细胞是一种较为常见的用于研究神经系统疾病的细胞系.结论:我们推测FXR1P是一个组织特异调节因子,可以改变PC12细胞而非VSMC细胞中神经节苷酯(GM1)的浓度.; 马云秦凌雪董晓李斌元王昌博许璨王三虎何淑雅; 关键词：GM1 生物学效应 PC12细胞 VSMC

智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用生物学效应的研究: 脆性X综合征（fragile X syndrome，FXS）是常见的遗传性智力低下疾病之一，99/%的患者是由FMR1（智力低下基因1）的5’端非编码区的CGG三核苷酸重复序列异常扩增或其上游的CpG岛过度甲基化引起的F...; 董晓; 关键词：GM1 ATP酶; 文献传递

智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用区域的鉴定: 本文通过构建不同的FXR1P选择剪接异构体诱饵载体，进行其与本实验室经酵母双杂交、Co-IP和细胞内蛋白共定位技术证实与FXR1P有相互作用的蛋白质CMAS(胞嘧啶单核苷酸N-乙酰神经氨酸合成酶)间的相互作用区域研究，鉴...; 符向辉何淑雅董晓李斌元王三虎秦凌雪陈小卫马云; 关键词：脆性X综合征酵母双杂交发病机制; 文献传递

FTH1真核表达载体的构建与鉴定: 2011年; 目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(FTH1)基因的真核表达载体pCMV-Myc-FTH1,为研究FXR1P与FTH1体内相互作用奠定基础。方法以人胎脑cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FTH1基因片段,将扩增片段经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到同样经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pCMV-Myc载体,酶切鉴定阳性克隆并进一步测序鉴定。结果成功构建了pCMV-Myc-FTH1重组真核表达载体。结论 pCMV-Myc-FT1重组真核表达载体的构建为进一步在细胞内鉴定FXR1P与FTH1相互作用奠定了基础,对研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理提供了依据。; 董晓何淑雅李斌元王三虎自映萍马云; 关键词：脆性X综合征真核表达载体

脆性X相关蛋白Ⅰ结构及功能研究进展: 2011年; 脆性X相关蛋白Ⅰ(FXR1P)是脆性X蛋白家族成员,与脆性X智力低下蛋白(FMRP)的氨基酸序列60%以上相似。FXR1P分子中存在KH-Ⅰ结构域、RGG结构域、Agenet结构域、NLS、NES信号、NoS等结构;FXR1P可作为转录调节因子参与特定mRNA的转录与翻译。研究表明,FXR1P可以参与miRNA调控途径,实现对靶mRNA的调节。从结构和功能方面对FXR1P研究进展作一综述。; 符向辉何淑雅李斌元董晓马云

FXR1真核表达载体的构建与表达及其对神经节苷脂浓度的影响被引量：1: 2014年; 目的:构建脆性X相关基因1(FXR1)的真核表达载体并检测其对神经节苷脂(GM1)浓度的影响。方法:以pYESTrp3-FXR1为模板,利用PCR扩增FXR1基因,PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1(-)中,获得的阳性克隆进一步酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-FXR1转染SH-SY5Y细胞后,采用Western blot检测FXR1的表达情况,同时采用ELISA试剂盒检测细胞内GM1的浓度。结果:PCR扩增产物为1.9 Kb的片段,与FXR1基因大小相符,阳性克隆经双酶切后获得两条分别为5.4 Kb和1.9 Kb的片段,测序结果与GeneBank中序列相同。构建成功的重组质粒pcDNA3.1(-)-FXR1转染SH-SY5Y细胞后,细胞中FXR1的表达增加,同时有效提高了细胞内GM1的浓度(P<0.05)。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-FXR1,FXR1的表达增加可以提高SH-SY5Y细胞中的GM1浓度,这些为后续深入研究FXR1基因在神经组织发育中的调控功能及其在脆性X综合征(FXS)中的作用机制奠定了基础。; 马云王昌博李斌元秦凌雪付亮董晓何淑雅; 关键词：真核表达神经节苷脂

智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用区域的鉴定: 目的FXR1P是一种对于神经和肌肉系统发育有重要调控作用的蛋白,FXR1是脆性X致病相关基因家族成员,通过构建不同的FXR1P选择剪接异构体诱饵载体,进行其与本实验室经酵母双杂交、Co-IP和细胞内蛋白共定位技术证实与F...; 符向辉何淑雅董晓李斌元王三虎秦凌雪陈小卫马云; 关键词：脆性X综合征酵母双杂交; 文献传递

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董晓