袁超
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 发酵液中莽草酸分离纯化的工艺研究被引量：2
- 2013年
- 为了有效提取基因工程菌DHPYAAS-T7发酵液中的莽草酸,文章采用了离子交换色谱法对发酵液中莽草酸进行分离纯化。包括发酵液的预处理、离子交换树脂的选择、动态吸附、洗脱、脱色、脱盐以及纯度检测等过程。研究结果表明,所选的4种树脂中,717型强碱性阴离子交换树脂的吸附容量最大,发酵液的浓缩上样浓度为6.46 g/L。当调节发酵液pH值为6.0时,莽草酸成完全解离状态,能被树脂完全吸附。以1.0 mol/L的NH4Cl溶液洗脱,莽草酸回收率为91.7%。以HZ-816大孔吸附树脂进行脱色,莽草酸回收率为98.8%。以732型强酸性阳离子交换树脂进行脱盐,回收率为98.3%。将得到的莽草酸溶液进行结晶,HPLC检测纯度,晶体纯度达到98.6%。该工艺能有效的从发酵液中分离纯化高纯度的莽草酸,为莽草酸生产工业化奠定了基础。
- 王慧袁超陈凯窦洁方宏清周长林
- 关键词：莽草酸发酵液离子交换纯化
- 甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶基因在大肠杆菌中的克隆表达被引量：4
- 2014年
- 莽草酸是抗流感有效药物"达菲"的前体物质。作者等之前的研究中,发现甘油作为碳源时重组大肠杆菌生物合成莽草酸的量最高,说明甘油代谢途径对莽草酸的生物合成有重要的影响,甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶是大肠杆菌甘油代谢途径的关键酶,对它们进行克隆表达来研究甘油代谢途径对大肠杆菌生物合成莽草酸的影响。文章采用PCR方法从大肠杆菌DH5α基因组中扩增得到长度均为1.5 kb的甘油激酶基因(glpK)和3-磷酸甘油脱氢酶基因(glpD),并构建了重组表达载体pET-3b-glpD-glpK,转化E.coli BL21(DE3)后得到重组的E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK,并采用SDS-PAGE检测目的基因蛋白的表达。结果表明,glpK和glpD基因已成功构建到pET-3b-glpD-glpK质粒中,SDS-PAGE也检测到了目的基因的成功表达(55 k);同时,重组E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK的甘油消耗比出发菌株提高了16%,莽草酸积累量是出发菌株的3.5倍。
- 袁超杨洋韩小容窦洁王慧周长林
- 关键词：3-磷酸甘油脱氢酶甘油莽草酸大肠杆菌克隆
- 重组大肠杆菌合成莽草酸代谢调控的研究
- 陈凯袁超陈海龙周长林
- 产腺苷甲硫氨酸酿酒酵母半胱氨酸补料工艺的研究
- 对酿酒酵母生物合成腺苷甲硫氨酸发酵过程进行工艺优化，研究了半胱氨酸添加量、半胱氨酸添加时间、碳源对菌体浓度和SAM产量的影响。结果表明,在10 L发酵罐中,发酵16h时,补加半胱氨酸至浓度2mmol/L,发酵36h时菌体...
- 夏毅杨依顺李扬袁超窦洁王慧周长林
- 关键词：腺苷甲硫氨酸酿酒酵母发酵工艺优化设计
- 文献传递
- 重组大肠杆菌合成莽草酸代谢调控的研究
- 莽草酸(shikimic acid)是芳香族氨基酸合成途径中一种重要中间代谢产物。近年来,莽草酸作为临床上对抗禽流感的唯一有效药物达菲的合成前体而备受关注。大肠杆菌芳香族氨基酸生物合成途径分为中心代谢途径(Central...
- 陈凯袁超陈海龙周长林
- 文献传递
