邓文汉 作品数:10 被引量:139 H指数:6 供职机构: 福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所 更多>> 发文基金: 福建省科委基金 福建省自然科学基金 福建省科技厅资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 理学 化学工程 更多>>
大黄鱼生长激素基因的分离及序列测定 被引量:17 2002年 本文从大黄鱼 (Pseucdosiaenacrocea)脑下垂体中提取得到总RNA ,根据近源鱼种生长激素(GH)基因保守序列设计了上游和下游引物 ,通过反转录和PCR扩增得到大黄鱼生长激素cDNA片断 ,并进行序列分析。所得到的序列与近源鱼种生长激素基因序列有较高的同源性 ,断定为大黄鱼生长激素基因序列 。 江树勋 马鸿媚 邓文汉 饶平凡关键词:大黄鱼 生长激素基因 反转录PCR 变异型酪氨酸酶对治疗黑色素代谢异常疾病的研究 被引量:1 2010年 本文在野生型酪氨酸酶(TYR)的基础上,运用分子生物学手段成功构建两种变异型表达质粒pET-Tat-TYR(含双精氨酸分泌信号肽变异型)、pGEX-TYR(缺失C端跨膜区的GST融合变异型),表达了两种变异型酪氨酸酶,并分别对产物进行了分析。该研究结果拓宽了蛋白药物在递送方面的应用范围,为酪氨酸酶在治疗色素代谢异常疾病方面开辟了新的视野,并为酪氨酸酶的有效应用提供理论指导。 陈菁 刘树滔 郑淑霞 邓文汉 饶平凡黑曲霉内切β-葡聚糖酶的纯化和性质 被引量:6 2002年 黑曲霉(Aspergillus niger)的粗酶滤液经过硫酸铵沉淀和四种色谱CM-Sephadex C-50离子交换色谱、DEAE-Sephadex A-50离子交换色谱、POROS 20 HQ离子交换色谱和TSK-G3000SW凝胶色谱,从中提纯了一个新的内切β-葡聚糖苷酶该酶经SDS-PAGE电泳检测分子量为36.0KD,该酶活力的最适温度为70℃,最适pH值为3.6 纯化后的该酶只能降解羧甲基纤维素,不能降解微晶纤维素,对蔗糖、麦芽糖和纤维素也不起作用。其N-末端部分氨基酸序列为V F E W F G C N E C G A E F Tx N I P G。 郭春腾 傅蓉 邓文汉 林向阳 饶平凡关键词:黑曲霉 纯化 毛细管电泳法检测蜂蜜中残留的抗生素 被引量:69 2001年 用毛细管电泳法对 5种常用的抗生素四环素 (TC) ,土霉素 (OTC) ,多西环素 (DOC) ,金霉素 (CTC)和氯霉素 (CP)进行了分离。研究了电泳缓冲液的 pH、不同有机试剂添加剂、温度等因素对抗生素分离的影响。实验结果表明 ,体积分数为 4%的N 甲基吗啡啉的加入可大大改善分离效果。在各自相应的浓度范围内 ,峰面积和样品浓度之间呈现良好的线性关系 ,重现性好。氯霉素的检测极限为 10 μg/L ,四环素、土霉素、多西环素为 2 0 μg/L ,金霉素为 40 μg/L(信噪比 >5 )。该方法成功地应用于蜂蜜中残留抗生素的测定 ,具有操作简单、快速方便、灵敏度及自动化程度高、重现性好等优点 ,是对含抗生素类物质进行痕量分析的好方法。 陈天豹 邓文汉 卢菀华 陈儒明 饶平凡关键词:毛细管电泳 抗生素 蜂蜜 痕量分析 残留量检测 分离纯化内切β-葡聚糖苷酶和部分N-末端序列分析 被引量:2 2001年 使用硫酸铵分级沉淀、DEAE -TOYOPEARL 6 5 0M和POROS 2 0PI弱阴离子交换色谱等分离技术 ,从黑曲霉 (Aspergillusniger)发酵酶粉中分离提纯出一种新内切 β -葡聚糖苷酶 ,在非还原条件下分子量为 36kD ,还原条件为 38kD ,该酶最适pH3 5 ,最适温度 5 5℃ ,N -末端部分氨基酸序列为XXXFKCVGSMEDGAES。 沈志扬 郭春腾 邓文汉 饶平凡关键词:黑曲霉 分离纯化 黑曲霉发酵粉中一种β-葡萄糖苷酶的分离纯化与表征 被引量:25 2004年 黑曲霉发酵酶粉通过硫酸铵分级沉淀、SephadexG-25脱盐、再通过两步DEAE-TOYOPEARL650M弱阴离子交换色谱,分离得到一个新的电泳纯的β-葡萄糖苷酶.该酶对水杨素的比活力为597.12IU mg,并对其专一,不能水解棉花和羧甲基纤维素钠;DTT处理前后分子量均为117.5kDa;最适pH和温度分别为4 5和70℃;在pH5.0、50℃下对水杨素钠的米氏常数Km为3.73mg mL,最大反应速率Vm为0.088mg葡萄糖 (mL·min). 郑淑霞 沈志扬 刘树滔 邓文汉 饶平凡关键词:黑曲霉 发酵粉 Β-葡萄糖苷酶 分离纯化 纤维素酶 生物催化剂 抗生素的毛细管电泳分离 被引量:9 2000年 通过对电极缓冲体系、pH值、乙腈添加浓度、N -甲基吗啡啉添加浓度及温度、电压的优化选择 ,用毛细管电泳方法分离土霉素、金霉素、多西环素、四环素、氯霉素 5种抗生素 .应用胺类修饰剂N -甲基吗啡啉作为添加剂 ,提高了抗生素的分离效果 .实验结果表明 ,此方法操作简单快速、成本低、定量准确 (R <0 .9917)、灵敏度高 ,检测极限分别为 0 .0 118,0 .0 2 36 ,0 .0 118,0 .0 118,0 .0 0 0 4ng . 卢菀华 陈天豹 邓文汉 陈儒明 饶平凡关键词:抗生素 毛细管电泳 小鼠酪氨酸酶的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1 2005年 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT -PCR)方法,从小鼠黑色素瘤总RNA中扩增得到小鼠酪氨酸酶的cDNA .该基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET - 2 2b(+)中,构建表达质粒pET -TYR并转化大肠杆菌Rosetta (DE3) .SDS -PAGE及蛋白质序列测定表明,经0 .8mmol/L异丙基硫代- β-D -半乳糖苷(IPTG)诱导后,可高效表达重组的小鼠酪氨酸酶,表达量约占菌体总蛋白质的2 5 % 。 邓文汉 卢菀华 傅蓉 陈菁 饶平凡 刘树滔关键词:基因克隆 基因表达 大肠杆菌 蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征 被引量:6 2002年 使用DEAE SephadexA 5 0、POROS 5 0HS及POROS 2 0PI等色谱分离技术 ,从蕲蛇粗毒中分离提纯得到 1个具有凝血活力的组分 ,经SDS PAGE和PAGE检测均为一条带 ,非还原条件下相对分子质量 2 4 .3kDa,还原条件下相对分子质量 33.0kDa ;其凝血活力为 91 .0NIHu mg.该组分不具有激活因子ⅩⅢ的活性 ,肝素不影响该组分的凝血活性 ,EDTA部分抑制其活性 ,苯甲基磺酰氟 (PMSF)则会产生不可逆抑制作用 .该酶N 末端氨基酸序列为VIGGNGXDINEHRFLVAFF 。 赖伟苹 郭春腾 邓文汉 卢菀华 宁千年 饶平凡关键词:类凝血酶 分离纯化 大黄鱼生长激素基因的克隆与表达 被引量:11 2004年 采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%. 陈莉 邓文汉 卢菀华 刘树滔 饶平凡关键词:大黄鱼 生长激素 基因克隆