高丛丛
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
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- 肥城桃果实乙烯受体ETR1蛋白重组条件优化及NO对ETR1基因表达的影响被引量:1
- 2012年
- 克隆与肥城桃成熟有关的乙烯受体ETR1基因片段,优化ETR1的表达条件,获得ETR1重组蛋白,为进一步研究ETR1功能并改善肥城桃贮运性能奠定基础。以肥城桃成熟果实总RNA反转录cDNA为模板,经PCR扩增得到特异片段,将该片段连接到质粒,经双酶切后,连接至质粒并转染至表达载体,IPTG诱导,优化表达条件。并以cD-NA为模板,进行实时荧光定量PCR,测定外源NO对ETR1相对表达量的影响。序列分析结果表明,该序列与Gen-Bank中的AF124527的cDNA序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%。优化蛋白表达条件为:IPTG最佳浓度为0.5 mmol/L,最适温度为30℃,最适诱导时间为8 h。经优化后,ETR1重组蛋白成功表达,为TETR1的重组生产和对ETR1功能的体外研究提供了条件。此外,外源NO对体外表达的ETR1基因有抑制作用。
- 高丛丛姚婷婷周杰朱树华
- 关键词:肥城桃乙烯受体ETR1基因克隆重组蛋白
- 一氧化氮对肥城桃可溶性鸟苷酸环化酶基因表达及酶活性的影响
- 肥城桃是中国水果名优特产,但其果实在采后难以贮存,容易腐烂。一氧化氮作为一种信号分子的重要性越来越受到关注。在水果保鲜方面,NO具有不可替代的功能。而可溶性鸟苷酸环化酶作为NO的受体,参与NO/cGMP信号转导调节,其研...
- 高丛丛
- 关键词:肥城桃实时荧光定量PCR可溶性鸟苷酸环化酶基因表达一氧化氮
- 文献传递