高共鸣
- 作品数：25 被引量：70H指数：5
- 供职机构：常州市第二人民医院更多>>
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- 周期性应力通过G蛋白耦联受体激酶结合蛋白1调控髓核细胞细胞外基质的表达被引量：1
- 2015年
- 目的 观察周期性应力下G蛋白耦联受体激酶结合蛋白1（Git1）对大鼠髓核细胞细胞外基质表达的影响.方法 首先将细胞玻片分为对照组和加压组,通过Western blot检测两组Git1蛋白的表达,荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测两组细胞外基质的表达变化.然后使用小干扰RNA（siRNA）阻断Git1蛋白,分为对照组、Git1 siRNA组、siRNA阴性对照组,在加压环境下比较各组细胞外基质的表达变化.结果 加压组细胞的Git1蛋白表达（1.372±0.205）较对照组（0.478 ±0.186）明显增高,加压组细胞外基质的基因表达较对照组明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.siRNA处理细胞后,Git1 siRNA组Git1蛋白表达（0.587±0.142）较对照组（1.041±0.103）明显降低.加压环境下,Git1 siRNA组细胞外基质的基因表达较对照组和siRNA阴性对照组明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 周期性压力能促进髓核细胞细胞外基质的表达,Git1在压力传导中起信号传递作用.
- 谢华农鲁明高共鸣周栋黄永静
- 关键词：髓核细胞
- 不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨在周期性压力条件下构建组织工程软骨每天加压的最佳持续时间。方法构建自行设计的生物反应器和往复式加压泵组成的“周期性压力场培养系统”，将体外培养的第二代乳兔关节软骨细胞接种到聚乳酸一聚羟基乙酸共聚物（PLGA）支架上，随机分成四组。第一、二、三组分别在每天持续时间为4、8、12h的周期性压力（强度0～200kPa，频率为0．1Hz）下培养，第四组（对照组）为不加压的静态培养，各组培养时间均为2周。2周后肉眼大体观察，HE染色组织学观察工程软骨细胞增殖及分布；甲苯胺蓝染色法观察硫酸糖氨多糖（GAG）的分泌及分布，并用1，9-二甲基亚甲蓝法定量检测GAG的含量；采用Ⅱ型胶原免疫组织化学法观察Ⅱ型胶原的分泌及分布，并用image—proplus图像分析系统对Ⅱ型胶原染色面积行半定量分析。结果在强度0～200kPa，频率为0．1Hz周期性压力作用下，8h组支架．细胞复合体体积最大，表面光滑、有光泽、有弹性，支架内软骨细胞数量最多，排列最为规则，Ⅱ胶原和GAG含量也最高（P〈0．01）。结论软骨细胞的新陈代谢受周期性压力持续时间的影响，在0～200kPa、0．1Hz频率作用下，每天持续8h的周期性压力能更好地促进软骨细胞增殖，合成Ⅱ型胶原、GAG等细胞外基质。
- 盛英俊范卫民马益民高峰高共鸣
- 关键词：软骨细胞
- 多孔钽棒置入联合髓芯减压治疗早期股骨头坏死中远期疗效的临床评价被引量：12
- 2012年
- 目的探讨应用髓芯减压和多孔钽棒植入术治疗早期股骨头坏死的中远期临床疗效。方法对19例19髋早期股骨头坏死患者应用髓芯减压和钽棒植入术治疗,19例患者平均随访24个月。根据Harris髋关节评分系统进行手术前后的关节功能评价,根据ARCO分期系统进行影像学评价。结果影像学坏死区骨硬化和囊性变亦无1例进展,18例出现股骨头出现骨重建迹象而外形及关节间隙仍未发生改变。Harris评分由术前62~84分（平均75分）增加到85~99分（平均92分）,优良率100%。结论采用髓芯减压加钽棒植入术治疗早期股骨头坏死,增加了股骨头负重区软骨下骨的机械支撑,可阻止影像学进展,缓解症状,促进骨长入,中远期疗效满意。
- 蒋羽清周栋王禹基农鲁明孙奇高共鸣徐南伟
- 关键词：股骨头坏死钽棒髓芯减压中远期疗效
- 骨形态发生蛋白-2在制备治疗椎间盘退变药物的应用
- 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及IPC A61L27，更具体地涉及，骨形态发生蛋白‑2在制备治疗椎间盘退变药物的应用。本发明通过配制不同浓度的BMP‑2凝胶制剂，能减缓大鼠尾椎间盘退变的进程，能治疗椎间盘退变。
- 高共鸣农鲁明
- 周期性应力下大鼠髓核细胞中Src蛋白磷酸化及其作用的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨周期性应力下大鼠髓核细胞中Sre蛋白的磷酸化水平及其意义。方法体外培养SI）大鼠髓核细胞，取第2代细胞按1x105／mL的密度接种于玻片上。将玻片随机分成4组（n=8）：对照组、加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组。加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组细胞以0—200kPa的压力、0．1Hz的频率分别加压0．5、1．0、2．0h，对照组在无压力环境下培养。应刖Westernblot检测各组磷酸化Src（pSrc）蛋白的表达。应用PP2[4-氨基-5-（4。氯苯）-7．（t-丁基）吡畔啉酮（3，4-d）嘧啶]抑制Src蛋白，另取细胞玻片，随机分为3组（n=8）：对照组、加压6h组、PP2＋加压6h组。使用荧光实时定量多聚酶链式反应（RT-PCR）检测3组细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达。结果对照组、加压0．5h组、加压1．0h组及加压2．0h组pSrc／磷酸片油醛脱氧酶灰度比值平均分别为0．244±0．013、0．477±0．044、0．530±0．014、0．700±0．063，4组之问比较差异有统计学意义（P〈0．05），除加压0．5h组与加压1．0h组之问外，其余组别之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。荧光RT．PCR检测3组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达结果显示：对照组表达量最低（1．00l±0．039、1．004±0．104），加压6h组最高（5．404±0．219、2．127±0．028），PP2＋加压6h组居中（3．038±0．237、1．678±0．125），3组之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论周期性压力能促进髓核细胞Ⅱ型胶原和蛋rI多糖的分泌，Src蛋白磷酸化在压力传导中起信号传递作用。
- 高共鸣农鲁明周栋谢华蒋羽清徐南伟
- 关键词：椎间盘髓核细胞
- 微创椎弓根钉技术治疗胸腰椎压缩性骨折的疗效分析被引量：9
- 2015年
- 随着技术进步,C臂机透视下的微创椎弓根螺钉技术得到了临床广泛应用[1]。近年来,本院通过该技术治疗胸腰椎椎体压缩性骨折,取得了满意的疗效,现将结果报告如下。1资料与方法1.1临床资料2012年1月-2014年7月,本科采用微创椎弓根螺钉技术治疗胸腰椎椎体压缩性骨折患者44例,其中男25例,女19例;年龄15~62岁,平均45.3岁。
- 高共鸣农鲁明周栋汤雪明蒋羽清徐南伟
- 关键词：胸腰椎骨折微创手术椎弓根螺钉
- 经椎间孔椎体间融合术(TLIF)后对侧早期神经根性疼痛的危险因素分析
- 2023年
- 目的确定经椎间孔椎体间融合术(TLIF)术后患者常伴有健侧神经根性疼痛术后早期对侧神经根性疼痛的主要危险因素。方法回顾性收集2020年1月至2022年1月期间在南京医科大学附属常州市第二人民医院城中院区脊柱外科行TLIF手术的170名患者,根据其是否发生术后早期对侧神经根性疼痛,将其分为无症状组与症状组。其中66例患者符合纳入排除标准,33例患者发生术后早期健侧神经根性疼痛。对两组患者术后进行随访,收集患者的一般资料及手术相关指标,术后3d伤口引流液中炎症因子的浓度,进行组间比较和回归分析。结果最终纳入66例患者作为研究对象,随访时间(26.6±1.1)d。男36例,女30例,平均年龄(66±8)岁。单因素分析显示:相较于无症状组,症状组患者引流液中的PGE2浓度降低(P<0.01);引流液中HIS、BK浓度均高于无症状组(P<0.01),其余指标组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。将单因素分析中组间有差异的指标纳入多因素回归分析,结果显示,引流液中HIS(OR=4.384)和BK(OR=10.921)是TLIF术后对侧早期神经根性疼痛的影响因素。结论TLIF术后患者引流液中HIS、BK水平是发生对侧早期神经根性疼痛的独立危险因素,可作为管理发生术后早期对侧神经根性疼痛患者的参考依据,为临床上治疗该类患者提供新思路。
- 李子彤李林斌马涛高共鸣农鲁明
- 关键词：腰椎融合术
- 人胰岛素样生长因子Ⅰ基因对兔关节软骨细胞的有效转染及表达被引量：3
- 2008年
- 目的研究人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ)基因构建的真核表达载体质粒对兔关节软骨细胞的有效转染和表达。方法将hIGF-Ⅰ基因构建在pcDNA3.1质粒上,经FuGENE6介导转入兔关节软骨细胞;设未转hIGF-Ⅰ基因软骨细胞作对照。转染后第3天用RT-PCR技术检测hIGF-Ⅰ、Ⅱ型胶原和聚合素在mRNA水平的表达,用细胞爬片免疫组织化学和Westernblot测定hIGF-Ⅰ在蛋白水平的表达。结果RT-PCR显示hIGF-Ⅰ在转染组中琼脂糖电泳318bp处见到相应的目的条带,而对照组未出现目的条带;Ⅱ型胶原和聚合素在转染和对照组中以β-actin为参照半定量检测分别增加到1.3倍和1.4倍(P<0.05)。免疫组织化学显示转染组细胞爬片有hIGF-Ⅰ表达的棕黄色颗粒,对照组胞浆中未见棕黄色颗粒,转染组胞浆中出现大量的Ⅱ型胶原棕黄色颗粒。Westernblot显示转染组细胞在7.6KDa标记处有hIGF-Ⅰ的蛋白条带出现对照组则没有。结论FuGENE6介导的重组hIGF-Ⅰ基因真核表达载体质粒可有效转染兔关节软骨细胞,在mRNA和蛋白水平上有效表达hIGF-Ⅰ及Ⅱ型胶原,表达的hIGF-Ⅰ能在mRNA水平上增加Ⅱ型胶原和聚合素的合成,保持软骨细胞表型的稳定。
- 刘瑞平范卫民高共鸣马益民
- 关键词：关节软骨细胞
- 经皮植入棘突间撑开系统治疗腰椎管狭窄症伴腰椎不稳的短期疗效分析
- 2011年
- 目的探讨椎板开窗减压加In-Space经皮植入棘突间撑开系统与单纯椎板开窗减压治疗腰椎管狭窄症伴腰椎不稳短期疗效的不同。方法选取2009年5月至2010年7月收治的33例腰椎管狭窄症伴腰椎不稳患者，采用随机数字表法分为A组和B组。A组16例，采用椎板开窗减压加In—Space经皮植入棘突间撑开系统；B组17例，采用单纯椎板开窗减压。术前，术后1d，术后1、3、6个月及末次随访分别摄腰椎正、侧位及动力位X线片，测量植入节段椎间隙前、后缘高度，椎弓根间距离，腰椎活动度。并采用Oswestry功能障碍指数（ODI）和视觉模拟评分法（VAS）对临床疗效进行评价。结果全部病例随访6．21（13．20±2．91）个月。A组术后各时间点椎间隙前缘高度较术前略有下降（P〉0．05），术后1d椎间隙后缘高度、术后各时间点椎弓根间距离均较术前明显增高，差异有统计学意义（P〈O．05）。而B组术后1d，术后1、3个月椎间隙前缘高度、椎间隙后缘高度、椎弓根间距离与术前比较差异无统计学意义（P〉0．05），术后6个月、末次随访较术前或术后1d明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。A组腰椎活动度由术前的9．86°±1．90°减小到末次随访的5．60°±2．02°，B组腰椎活动度由术前的9．89°±2．00°增大到末次随访的10．76°±3．14°（P〈0．05）。在末次随访中，A组腰背部疼痛VAS、ODI评分[（2．02±1．98）、（20．18±18．80）分]均明显低于B组[（4．15±2．36）、（30．39±16．62）分]，差异有统计学意义（P〈0．05）。所有患者未发生假体松动、断裂及脱落。结论In-Space经皮植入棘突间撑开系统能够较好地维持脊柱活动度及稳定性，防止椎间隙塌陷及继发腰椎不稳的发生，短期疗效满意。
- 杜瑞周栋农鲁明徐南伟谢华蒋世杰高共鸣
- 关键词：椎管狭窄减压术动态稳定系统
- 携带hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体构建
- 2009年
- 目的探讨构建携带hIGF-Ⅰ基因腺病毒载体的可行性。方法从pcDNA3.1-hIGF-Ⅰ质粒中克隆出hIGF-Ⅰ基因的编码序列,酶切、连接后,插入腺病毒系统中的穿梭载体pAdshuttle-CMV,获得重组质粒pAdshuttle-CMV-hIGF-Ⅰ,将其转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183,进行同源重组,获得重组子pAdeasy-1-IGF-Ⅰ。鉴定后,将pAdeasy-1-IGF-Ⅰ转染人胚肾细胞(Ad293细胞),获得含hIGF-Ⅰ基因的重组腺病毒(rAd-hIGF-Ⅰ)。再鉴定后,Ad293细胞反复感染冻融扩增腺病毒,50%组织培养感染量法(TCID50)检测病毒滴度。将病毒颗粒感染绿猴肾成纤维细胞(COS-7细胞),荧光显微镜观测绿色荧光蛋白(GFP)的表达,RT-PCR分析hIGF-Ⅰ基因在mRNA水平的表达,Western blot分析hIGF-Ⅰ在蛋白水平的表达。结果成功构建出含有hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ,转染COS-7细胞后发现绿色荧光蛋白表达,同时RT-PCR扩增出318 bp的目的条带,Western blot得到7.6kDa大小的目的蛋白,证明了腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ能成功转染COS-7细胞,hIGF-Ⅰ基因能在其中成功表达。结论成功构建出含有hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ,并且证实其能对COS-7细胞进行有效转染,为组织工程软骨的进一步改良提供了高效的基因载体。
- 高共鸣范卫民刘瑞平卫积书马益民
- 关键词：腺病毒载体转染
