刘昌菊
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划重大科技专项山东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 奶牛乳腺干细胞的体外分离培养及鉴定研究
- 目的:
体外分离培养奶牛MaSCs，研究其生物学特性，并对其进行体外扩增和鉴定，开辟奶牛乳腺疾病治疗的新途径，为乳腺生物反应器的制备提供种子细胞。
方法:
本试验分为三个部分:试验一分离MaSCs，并进...
- 刘昌菊
- 关键词：奶牛乳腺干细胞体外分离培养增殖能力
- 转基因动物乳腺生物反应器原理及其研究概况
- 乳腺反应器是目前生产外源蛋白最有效的生物反应器，也是目前国际上惟一证明可以达到商业化生产水平的生物反应器。本文综述了乳腺生物反应器的发展背景、原理，国内外研究现状及进展、应用前景极其研究存在的问题。
- 刘昌菊董雅娟柏学进龚宜超李兴芳
- 关键词：生物反应器转基因动物外源蛋白
- 文献传递
- 5-Aza诱导BMSC分化为心肌细胞的分子生物学检测被引量：4
- 2009年
- 【目的】利用分子生物学方法探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)体外诱导牛骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)向心肌细胞的分化,为转基因良种肉牛培育提供种子细胞,提高转基因效率。【方法】利用获取的纯化稳定的P4、P8、P12代BMSC各经5、10、15μmol·L-1的5-Aza进行体外诱导分化,统计并计算心肌细胞的转化率,对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT-PCR鉴定。【结果】诱导后细胞大多呈现梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。相同代数的BMSC在10μmol·L-1的5-Aza作用下诱导效果最佳;在相同浓度的5-Aza作用下,BMSC向心肌细胞的转化率随着传代次数的增加逐渐降低。RT-PCR显示诱导分化后的细胞明显表达心肌细胞的4种特异性基因,分别是α-心脏肌动蛋白(378bp)、结蛋白(601bp)、心脏肌钙蛋白T(331bp)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)(273bp)。【结论】5-Aza体外可诱导牛骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞;利用P4代BMSC在10μmol·L-1的5-Aza的作用,诱导效果明显。
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武李兴芳刘昌菊
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-氮杂胞苷心肌细胞
- 荷斯坦牛骨髓间充质干细胞的分离培养和体外诱导分化的研究被引量：1
- 2009年
- 本试验采用密度梯度离心法来分离纯化和体外培养荷斯坦牛骨髓间充质干细胞,并在体外分别诱导其分化为神经样细胞和脂肪样细胞。结果表明,采用密度梯度离心法可获得纯化度较高的荷斯坦牛骨髓间充质干细胞,并且在一定的诱导条件下能够分化为脂肪样和神经样细胞,为利用骨髓间充质干细胞作为核供体进行核移植的研究和动物遗传资源的保存研究奠定理论基础。
- 龚宜超董雅娟柏学进李兴芳刘昌菊封纪武
- 关键词：诱导分化
- 黑牛繁育工程及其产业开发战略
- 黑牛繁育工程是山东省自主创新重大科技专项资助的良种牛培育项目，本文通过对国内外肉牛产业及优良品种的综合评述之后，主要介绍了本工程技术研究中心的工作思路及其产业开发战略，通过种质资源储备、体细胞克隆、分子标记、转基因育种、...
- 董雅娟龚宜超刘昌菊王文明刘伟张守宝柏学进封纪武肖超柱村上正夫林兴星董懿为高天宇李兴芳
- 关键词：自主创新产业结构区域经济
- 文献传递
- 渤海黑牛H-FABP基因外显子2的序列测定与分析被引量：6
- 2009年
- [目的]为改良渤海黑牛地方品种及种质资源的保护提供技术依据。[方法]根据GenBank发表的牦牛心脏脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)的序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出渤海黑牛H-FABP基因外显子2的DNA片段,测定其核苷酸序列并进行氨基酸序列的推导,同时将序列与牦牛、山羊、猪、人、小鼠和鸡的外显子2序列进行比较,并且进行系统发生树的构建。[结果]渤海黑牛的H-FABP外显子2核苷酸序列和氨基酸序列与牦牛、山羊、猪、人、小鼠和鸡各物种间同源性分别为100%、97.1%、94.2%、89.0%、83.8%、79.8%,100%、98.2%、94.7%、86.0%、86.0%、77.2%。系统发生结果显示,系统发生树总体分为两支,鸡单独为一支;渤海黑牛、牦牛、山羊、猪、人、小鼠聚在一起成为另一支。[结论]渤海黑牛H-FABP外显子2具有很强的保守性,H-FABP基因外显子2进化树符合物种进化规律。
- 李兴芳柏学进龚宜超刘昌菊董雅娟
- 关键词：渤海黑牛H-FABP基因
- 奶牛乳腺成体干细胞的体外分离培养及鉴定试验
- 2009年
- [目的]体外分离、培养奶牛乳腺成体干细胞(mammary stem cells,MaSCs),研究其生物学特性并对其进行扩增和鉴定。[方法]用贴壁筛选法纯化牛MaSCs,传代扩增,测定生长曲线并进行细胞核型分析。[结果]通过体外分离培养获得纯度较高的MaSCs,观察到MaSCs的生物学特性,细胞具有正常核型,分离得到的细胞确实为比较原始的干细胞。[结论]成功地建立了一种分离培养牛MaSCs的方法,分析MaSCs的生物学特性,为进一步深入研究MaSCs的诱导分化及其在乳腺生物反应器中的应用打下基础。
- 刘昌菊董雅娟龚宜超李兴芳柏学进
- 关键词：奶牛乳腺干细胞
