刘楠楠 作品数:4 被引量:11 H指数:2 供职机构: 吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
小尾寒羊溶菌酶基因的克隆与差异表达分析 被引量:4 2013年 本试验从猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊构建的白细胞层SSH cDNA文库中筛选1段cDNA序列,经测序和BLAST同源性搜索比对发现其为溶菌酶重组片段,该片段大小为770bp,编码148个氨基酸残基,编码的蛋白质是一种天然抗感染物质,已提交GenBank,登录号为JX263305。经荧光定量PCR分析,与正常组羊相比,在S2免疫14和30d的羊白细胞层中该溶菌酶基因表达轻微上调,但差异不显著(P>0.05);在免疫40d时恢复到正常水平。这也进一步说明溶菌酶是一种存在机体内必不可少的天然免疫因子,为布鲁氏菌病有效防控方面的研究奠定了基础。 李闯 徐云明 唐峰 邹德颖 刘楠楠 郭兴 杨咏洁 周玉 柳增善 卢士英 鲁承 任洪林关键词:布鲁氏菌 溶菌酶 差异表达分析 荧光定量PCR 小尾寒羊白介素1β全长cDNA序列克隆及生物信息学分析 被引量:2 2014年 本研究旨在克隆白介素1β(IL-1β)全长cDNA,为深入研究其生物学功能提供全长cDNA信息和试验材料。本试验利用前人构建的布鲁氏菌强、弱毒株感染小尾寒羊白细胞层抑制性差减杂交(SSH)cDNA文库,获得小尾寒羊IL-1β部分cDNA序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE),克隆小尾寒羊IL-1β全长cDNA,并申请GenBank登录号KC425612.2。该cDNA全长1494bp,含有801bp开放阅读框(ORF),可编码266个氨基酸残基,预测其编码蛋白分子质量为30.622ku,与林麝、牛、海豚、虎鲸的IL-1β一致性较高,亲缘关系较近。 郭兴 刘楠楠 陈晓峰 张文惠 胡盼 李岩松 李岩松 王光明 李兆辉 周玉 王光明 任洪林关键词:白介素1Β 小尾寒羊 克隆 生物信息学 小鼠Peroxiredoxin 6基因克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:3 2016年 过氧化物氧还酶6(peroxiredoxin6,Prdx6)是一种双功能蛋白质,具有GSH过氧化物酶和磷脂酶A2活性。前期研究构建布鲁氏菌强弱毒株感染绵羊白细胞层SSH c DNA文库,发现Prdx6在不同毒力布鲁氏菌感染时存在一定的差异性表达,推测Prdx6可能在布鲁氏菌感染中发挥一定的作用。为了更好地研究其在生物体中的作用,以RT-PCR技术,提取小鼠巨噬细胞系RAW264.7总RNA,反转录制备c DNA,设计特异引物克隆Prdx6开放阅读框核酸序列,并构建原核表达载体,进行原核表达,以镍柱纯化获得纯度较高的Prdx6蛋白,免疫家兔制备高特异性、高灵敏度的鼠Prdx6兔源多克隆抗体,为后续进一步研究Prdx6蛋白功能提供科学依据和应用工具。 陈晓峰 胡盼 李岩松 郭兴 邹德颖 刘楠楠 卢士英 周玉 柳增善 李兆辉 任洪林关键词:基因克隆 多克隆抗体 区别检测小肠结肠炎耶尔森氏菌与布鲁氏菌LAMP引物的设计与分析 被引量:2 2013年 目的小肠结肠炎耶尔森氏菌(耶氏菌)和布鲁氏菌都是人兽共患细菌病的主要病原菌,血清学检测过程中,两者常出现交叉反应,尤其是O:9型耶氏菌与布鲁氏菌干扰更为明显。本实验目的是在DNA水平上区别检测这两种致病菌。方法根据耶氏菌outL基因设计一套可用于环介导等温扩增(LAMP)检测方法的引物,拟采用该项特异性强、灵敏性高、操作简单的核酸检测技术,对两种菌进行检测。结果 LAMP方法检测耶氏菌结果为阳性,检测布鲁氏菌结果为阴性。结论成功地在DNA水平上区别检测这两种致病菌。并且为建立耶氏菌的非特异性干扰小的LAMP检测方法提供可应用的引物,同时也为LAMP技术的开发应用以及LAMP引物设计提供应用参考。 徐云明 邹德颖 唐峰 郭兴 王光明 宋杰 刘楠楠 周玉 柳增善 卢士英 李兆辉 任洪林关键词:小肠结肠炎耶尔森氏菌 布鲁氏菌 环介导等温扩增